Mitochondrial complex II or succinate dehydrogenase (SDH) is at the crossroads of oxidative phosphorylation and the tricarboxylic acid cycle. It has been shown that Sdh5 (SDHAF2/SDH5 in mammals) is required for flavination of the subunit Sdh1 (SDHA in human cells) in yeast. Here we demonstrate that in human breast cancer cells, SDHAF2/SDH5 is dispensable for SDHA flavination. In contrast to yeast, CRISPR-Cas9 nickase-mediated SDHAF2 KO breast cancer cells feature flavinated SDHA and retain fully assembled and functional complex II, as well as normal mitochondrial respiration. Our data show that SDHA flavination is independent of SDHAF2 in breast cancer cells, employing an alternative mechanism.

• MeSH
• flaviny MeSH
• genový knockdown MeSH
• lidé MeSH
• mitochondriální proteiny genetika   metabolismus   MeSH
• mitochondrie genetika   metabolismus   MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• nádorové proteiny genetika   metabolismus   MeSH
• nádory prsu genetika   metabolismus   MeSH
• posttranslační úpravy proteinů * MeSH
• respirační komplex II genetika   metabolismus   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Gastrointestinální stromální nádory (GIST) tvoří nejčastější mezenchymální nádory gastrointestinálního traktu. Velká část z nich vzniká na základě aktivačních mutací v genech KIT (75 - 85 %) nebo PDGFRA (méně než 10 %). Identifikace aktivačních mutací v genech KIT a PDGFRA, které kódují příslušné receptorové tyrozinkinázy (RTK), znamenala významný průlom v cílené terapii metastatických, neoperabilních nebo recidivujících GIST. Primární a/nebo sekundární rezistence je významným problémem biologické terapie imatinib mesylátem (IM) u pacientů s GIST. Oba typy rezistence vedou ke snížené terapeutické odpovědi na IM, případně k selhání této léčby a progresi onemocnění. Hlavním mechanizmem sekundární rezistence je vznik sekundárních mutací. Problémem progrese onemocnění je kromě primární a sekundární rezistence také selhání úplné eradikace nádorových buněk i při dlouhotrvající terapii inhibitory RTK. GIST bez přítomnosti mutací v genech KIT/PDGFRA tvoří u dospělých 10 - 15 %, u pediatrických GIST je to až 85 % případů. KIT/PDGFRA nemutované GIST tvoří heterogenní skupinu nádorů s několika molekulárně-genetickými i morfologickými odlišnostmi. Molekulárně se KIT/PDGFRA nemutované GIST liší např. mutacemi v genech BRAF, KRAS, NF1 nebo defekty v sukcinát dehydrogenázových (SDH) podjednotkách. GIST s nemutovanými geny KIT/PDGFRA vykazují nižší citlivost na cílenou terapii IM v porovnání s mutovanými GIST. Terapeutické možnosti se ve skupině KIT/PDGFRA nemutovaných GIST soustřeďují na BRAF inhibitory, inhibitory PI3K dráhy (mTOR), nebo na inhibitory receptorů IGF1R a VEGFR.

Gastrointestinal stromal tumors (GISTs) are the most common mesenchymal tumors of the gastrointestinal tract. Most of them arise due to activating mutations in KIT (75 – 85 %) or PDGFRA (less than 10 %) genes. Identification of the activating mutations in KIT and PDGFRA genes, which code for receptor tyrosine kinases (RTKs), has improved the outcome of targeted therapy of metastatic, unresectable or recurrent GISTs. Primary and/or secondary resistance represents a significant problem in the targeted therapy by Imatinib mesylate (IM) in patients with GIST. An important mechanism of the secondary resistance is the evolvement of secondary mutations. Except for primary and secondary resistance, there is another problem of disease progression - a failure of tumor cells eradication even in the long term therapy of tyrosine kinase inhibitors. GISTs without mutations in KIT/PDGFRA genes constitute 10 - 15% GISTs in adults, and a majority (85 %) of pediatric GISTs. KIT/PDGFRA wild-type GISTs represent a heterogeneous group of tumors with several molecular-genetics and/or morphologic differences. KIT/PDGFRA wild-type GISTs are different in their molecular features, for example in mutations in the BRAF, KRAS, NF1 genes or defects of succinate dehydrogenase (SDH) subunits. KIT/PDGFRA wild-type GISTs are generally less sensitive to targeted therapy by tyrosine kinase inhibitors in comparison with KIT/PDGFRA mutated GISTs. Inhibitors of BRAF, PI3K (mTOR) or inhibitors of IGF1R and VEGFR receptors provide alternative therapeutic strategies.

• Klíčová slova
• IGH systém,
• MeSH
• antitumorózní látky MeSH
• biologická terapie MeSH
• chemorezistence * fyziologie   MeSH
• DNA analýza   MeSH
• gastrointestinální stromální tumory * etiologie   terapie   MeSH
• imatinib mesylát terapeutické užití   MeSH
• lidé MeSH
• mutace genetika   MeSH
• protoonkogenní proteiny B-raf antagonisté a inhibitory   fyziologie   terapeutické užití   MeSH
• receptor IGF typ 1 fyziologie   MeSH
• sukcinátdehydrogenasa fyziologie   MeSH
• tyrosinkinasy antagonisté a inhibitory   terapeutické užití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

Mitochondria play a pivotal role in apoptosis: permeabilization of the outer mitochondrial membrane and the release of pro-apoptotic proteins from the intermembrane space of mitochondria are regarded as the key event in apoptosis induction. Here we demonstrate how non-toxic doses of the mitochondrial Complex II inhibitor thenoyltrifluoroacetone (TTFA), which specifically inhibits the ubiquinone-binding site of succinate dehydrogenase (SDH), synergistically stimulated cell death, induced by harmless doses of cisplatin in a panel of chemoresistant neuroblastoma cell lines. Apoptotic cell death was confirmed by cytochrome c release from the mitochondria, cleavage of poly ADP-ribose polymerase, processing of caspase-3, which is an important executive enzyme in apoptosis, and caspase-3-like activity. Methyl malonate, an inhibitor of the SDHA subunit partially reversed apoptosis stimulated by TTFA in SK-N-BE(2) neuroblastoma cells (NB), indicating that sensitization requires oxidation of succinate. In contrast, in IMR-32 NB cells, the same concentrations of TTFA markedly suppressed cisplatin-induced apoptosis. Comparison of oxygen consumption in cisplatin-resistant SK-N-BE(2) and cisplatin-sensitive IMR-32 cells clearly demonstrated impaired Complex II activity in IMR-32 cells. We also found that in SK-N-BE(2) cells co-treatment with cisplatin and TTFA markedly stimulated formation of reactive oxygen species (ROS), whereas in IMR cells, cisplatin-mediated ROS production was attenuated by TTFA, which explains apoptosis suppression in these cells. Thus, functionally active SDH is a prerequisite for the ROS-mediated sensitization to treatment by TTFA.

• MeSH
• antitumorózní látky farmakologie   MeSH
• apoptóza účinky léků   MeSH
• chemorezistence MeSH
• cílená molekulární terapie * MeSH
• cisplatina farmakologie   MeSH
• kyselina jantarová metabolismus   MeSH
• léky antitumorózní - screeningové testy MeSH
• lidé MeSH
• mitochondrie účinky léků   enzymologie   MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• nádorové proteiny antagonisté a inhibitory   MeSH
• neuroblastom patologie   MeSH
• oxidace-redukce MeSH
• reaktivní formy kyslíku metabolismus   MeSH
• respirační komplex II antagonisté a inhibitory   MeSH
• spotřeba kyslíku účinky léků   MeSH
• superoxidy metabolismus   MeSH
• synergismus léků MeSH
• thenoyltrifluoraceton farmakologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• srovnávací studie MeSH

Feochromocytomy a paragangliomy jsou nádory vznikající z chromafinních buněk, mohou metabolizovat, skladovat, ale ne vždy vylučovat katecholaminy. Typickými projevy feochromocytomu nebo paragangliomu jsou hypertenze (trvalá i záchvatovitá), palpitace, bolesti hlavy a pocení. Se vznikem těchto nádorů je dnes spojeno deset genů a předpokládá se, že další budou objeveny. Oba typy nádorů se vyskytují také v rámci genetických syndromů: syndromu familiární paragangliomatózy (geny SDH, SDHAF2), syndromu von Hippel-Lindau (gen VHL), syndromu mnohočetné endokrinní neoplazie typu 2 (gen RET) a neurofibromatózy typu 1 (gen NF1). U některých syndromů jsou tyto nádory prvním a jediným manifestovaným onemocněním. Některé typy mutací, především v genu SDHB, jsou spojeny s vysokým počtem maligních onemocnění, která jsou v současné době standardními postupy nevyléčitelná. Z těchto důvodů je nezbytné provádět genetické vyšetření nejen u pacienta, ale v celé rodině, a nabídnout nositelům mutací dlouhodobé nebo celoživotní sledování a případně včasnou léčbu. Péče o pacienty s těmito onemocněními proto vyžaduje multidisciplinární spolupráci a měla by být prováděna pouze ve specializovaných centrech, která mají s tímto druhem onemocnění dostatečné zkušenosti.

Pheochromocytomas and paragangliomas are tumors arising from chromaffin cells. These tumors produce catecholamines and are typically found with symptoms and signs that may include hypertension (persistent or episodic), palpitations, headache and sweating. So far, 10 different genes have been associated with both tumors and other genes are expected to be detected. Pheochromocytoma and paraganglioma can occur as a part of genetic syndromes – familial paragangliomas (SDH genes, SDHAF2 gene), von Hippel-Lindau syndrome (VHL gene), multiple endocrine neoplasia type 2 (RET gene), and neurofibromatosis type 1 (NF1 gene). These tumors may be the first and only manifestation of these genetic syndromes. Patients with SDHB mutations are at high risk to develop malignant disease and unfortunately current therapeutic options for malignant form of disease are poor. Genetic testing plays a key role in the management of these tumors and therefore not only index patients with pheochromocytoma but also relatives should be tested. Management of this disease requires multidisciplinary cooperation and should be performed in the specialized medical centres.

• Klíčová slova
• genetické vyšetření, sledování,
• MeSH
• biologické markery krev   MeSH
• bolesti hlavy MeSH
• chirurgie operační metody   využití   MeSH
• chromafinní buňky cytologie   patologie   MeSH
• diagnostické zobrazování metody   využití   MeSH
• feochromocytom diagnóza   genetika   terapie   MeSH
• financování organizované MeSH
• genetické nemoci vrozené diagnóza   genetika   prevence a kontrola   MeSH
• genetické testování MeSH
• hypertenze MeSH
• katecholaminy izolace a purifikace   škodlivé účinky   MeSH
• klinický obraz nemoci MeSH
• lidé MeSH
• paragangliom diagnóza   genetika   terapie   MeSH
• podjednotky proteinů MeSH
• pooperační péče MeSH
• preventivní lékařství MeSH
• respirační komplex II genetika   izolace a purifikace   MeSH
• sukcinátdehydrogenasa genetika   izolace a purifikace   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Úvod: Ischemická choroba srdeční patří mezi nejčastější onemocnění a značnou měrou se podílí na mortalitě naší populace (v letech 1995–2003 52–56,2 %). Náhlá úmrtí tvoří téměř 2/3 pitev, se kterými se soudní lékaři setkávají, a z nich více než 50 % je způsobeno ICHS. Proto je její diagnostika, a to zejména akutního infarktu myokardu, tak důležitá. Základním diagnostickým kritériem akutního infarktu myokardu je dle společné definice Evropské kardiologické společnosti a American College of Cardiology z roku 2000 pozitivita biochemických ukazatelů nekrózy srdečního svalu. Obecně platí závislost mezi aktivitou enzymů a množstvím poškozených buněk. Již asi 10 let se v odborné literatuře objevují práce, které doporučují využívat stanovení aktivity či koncentrace těchto biochemických ukazatelů i při diagnóze časných fází infarktu myokardu post mortem. Metody: Stanovovali jsme koncentrace myoglobinu, kreatinkinázy a troponinu I v krvi a v perikardiální tekutině zemřelých náhlou a násilnou smrtí. Soubor, který tvořilo 71 zemřelých, byl rozdělen do dvou skupin, první skupina (38 případů) byla tvořena zemřelými na akutní infarkt srdečního svalu (byl makroskopicky patrný nebo byla zjištěna ložiskově snížená aktivita SDH při histoenzymatické makroreakci v Šiklových řezech při výrazném zúžení či uzávěru věnčitých tepen a vyloučení jiné příčiny smrti). Zbylých 33 případů (tzv. non-IM smrti) tvořily 4 případy srdečního selhání, 6 případů intracerebrálního krvácení, 5 případů plicní embolie, 5 případů udušení (čtyřikrát oběšení, jednou traumatická asfyxie), tři případy zhmoždění mozku, dva případy otravy CO, dva případy utonutí, po jednom případu otravy kyanidy, otravy alkoholem, smrti vykrvácením, epilepsie, bronchopneumonie a hyperglykemického komatu. Výsledky: Kreatinkináza a myoglobin v krvi a v perikardiální tekutině a troponin I v perikardiální tekutině byly zvýšeny ve všech případech jak u IM, tak u non- IM smrtí, statisticky se nelišily ani jejich hladiny. Troponin I byl v krvi zvýšen v 87 % u IM a v 91 % u non-IM smrtí, rozdíl není statisticky významný, rovněž koncentrace se statisticky nelišily. Závěr: Nepodařilo se nám prokázat možné využití stanovení koncentrací myoglobinu, kreatinkinázy a troponinu I v krvi a perikardiální tekutině při diagnostice infarktu myokardu.

Introduction: Ischaemic heart disease is the leading cause of death in industrialised countries. Sudden death accounts for approximately 2/3 of autopsies in forensic medicine, which is why the accurate diagnosis of IHD and first of all acute myocardial ischaemia is so important. On certain occasions in forensic medical practice it is difficult to diagnose AMI from morphological observation alone. In such cases, complementary diagnostic techniques, such as the determination of biochemical markers of the necrosis of the heart muscle (myoglobin, troponin I and creatine kinase) in cadaver fluids, take on special importance, so we decided to test the diagnostic evaluation of postmortem cTnI, myoglobin and creatine kinase determination in serum and pericardial fluid. Recently, cardiac troponins have gained attention as very specific markers of myocardial cell injury, and the European Society of Cardiology and the American College of Cardiology have suggested that these proteins should be preferred markers for the diagnosis of the necrosis of heart muscle. Methods: We studied 71 cadavers, which were divided into 2 groups. The first group (38 cases) consisted of people where the acute myocardial infarction was the only cause of death (the myocardial lesion could be easily detected by macroscopic examination or by formazan test, other causes of death were excluded and the constriction or obturation of the coronary arteries was detected). The second group (non-AMI deaths) was formed by 4 cases of cardiac failure, 6 cases of intracerebral haemorrhage, 5 cases of pulmonary embolism, 7 cases of asphyxia (4 hangings, 1 traumatic asphyxia, 2 drownings), 3 cases of brain contusion, 2 cases of carbon monoxide poisoning, 1 case of cyanide poisoning, 1 case of alcohol poisoning, 1 case of epilepsy, 1 case of bronchopneumonia, 1 case of hyperglycaemic coma and 1 case of exsanguination. Results: The values of creatine kinase and myoglobin were increased in all cases (100%) of AMI-deaths and non-AMI deaths in blood and pericardial fluid and there was no statistically significant difference between these groups. Troponin I was increased in all cases of both groups in pericardial fluid, and again there was no significant difference in concentration between both groups. In blood, troponin I was increased by 87% in the group of AMI deaths and in 91% of non-AMI deaths. There was no significant statistical difference between the groups and there was no difference in concentration either. Conclusion: We did not find a statistically significant difference in pericardial fluid or in serum for cTnI, CK-MB and myoglobin between the group of AMI deaths and the group of non-AMI deaths and we cannot confirm the diagnostic efficacy of these biochemical markers in the postmortem diagnosis of acute myocardial infarction.

• Klíčová slova
• ICHS, kreatinkináza,
• MeSH
• časná diagnóza MeSH
• histologické techniky metody   využití   MeSH
• infarkt myokardu diagnóza   etiologie   patologie   MeSH
• ischemická choroba srdeční diagnóza   klasifikace   patologie   MeSH
• kreatinkinasa izolace a purifikace   krev   MeSH
• lidé MeSH
• myoglobin izolace a purifikace   krev   MeSH
• náhlá srdeční smrt etiologie   patologie   MeSH
• pitva metody   MeSH
• tetrazoliová modř diagnostické užití   MeSH
• troponin I izolace a purifikace   krev   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH