Cíle: Zhodnocení exprese c-kit onkoproteinu u karcinomů slinných žláz a její korelace s prognózou. Metody: Imunohistochemická analýza c-kit proteinu byla provedena u 33 karcinomů za užití formalinem fixovaných parafinových bločků. Pro hodnocení reaktivity nádoru byla použita kombinace cytoplazmatického a/nebo membranózního barvení s procentem pozitivních buněk. Za negativní byly považovány jen případy bez jakékokoliv imunoreakce. Prognostické korelace byly provedeny univariátní analýzou nádorově specifických přežívacích křivek dle Kaplan-Meiera a porováním pomocí log-rank testu. Výsledky: Ze 33 hodnocených bylo jen 7 nádorů c-kit negativních, a to 3 low-grade karcinomy mukoepidermoidní, 2 karcinomy z pleomorfního adenomu, jeden karcinom sekretorický a jeden low-grade kribriformní cystadenokarcinom. Ve skupině 26 (tj. 79 %) pozitivních tumorů převládalo 9 karcinomů adenoidně cystických (všechny až na jeden silně imunoreaktivní), následovaných 5 karcinomy acinocelulárními, 3 karcinomy mukoepidermoidními a 3 salivárními duktálními, 2 karcinomy z pleomorfního adenomu a 4 dalšími karcinomy, u kterých se pozitivita pohybovala od 50 do 100 % při slabé až silné imunoreakci. Chí-kvadrátem nebyl zjištěn rozdíl v nádorově specifickém přežívání u c-kit negativních (n=7) a pozitivních (n=26) karcinomů. Závěry: Ze všech typů salivárních karcinomů jevil pravidelnou silnou reaktivitu jen karcinom adenoidně cystický. Imunoreaktivita ostatních typů v souladu s publikovanými daty silně kolísala. Stanovení c-kit exprese nemá prognostický význam.

Background: To investigate the expression of c-kit protein in salivary gland carcinomas and to correlate it to prognosis. Methods: Immunohistochemistry for c-kit protein was performed in 33 carcinomas, using formalin-fixed paraffin-embedded sections. For the evaluation of reactivity of tumor cells, a combination of the cytoplasmic and/or membranous staining and the percentage of positive cells were applied. Only cases without any staining pattern were considered negative. For prognostic correlation, univariate disease-specific survival curves were calculated by the Kaplan-Meier method and distributions were compared using the log-rank test. Results: Of all 33 cases, only 7 were c-kit negative, including 3 low-grade mucoepidermoid carcinomas, 2 carcinomas ex pleomorphic adenoma and 1 secretory carcinoma and 1 low-grade cribriform cystadenocarcinoma. The group of 26 (i.e. 79 %) positive tumors was dominated by 9 adenoid cystic carcinomas (all but one revealing strong reaction), followed by 5 acinic cell, 3 each mucoepidermoid and salivary duct carcinoma, 2 carcinomas ex pleomorphic adenoma and 4 other tumors, in which positive staining ranged from 50-100 %, with the immunoreaction varying from weak to strong. Disease specific survival in c-kit negative (n=7) carcinomas did not differ from that in positive (n=26) cases. Conclusions: Of all salivary gland carcinomas, only adenoid cystic carcinoma was regularly associated with strong c-kit expression. Immunoreactivity in other subtypes, considering our as well as published data, greatly varies. C-kit expression harbors no significant prognostic information.

• MeSH
• financování organizované MeSH
• imunohistochemie metody   MeSH
• nádorové biomarkery analýza   MeSH
• nádory slinných žláz patologie   MeSH
• prediktivní hodnota testů MeSH
• prognóza MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit analýza   MeSH

Inoperabilní c‑kit negativní gastrointestinální stromální tumor (GIST) je považován za onemocnění rezistentní ke konvenční cytostatické systémové léčbě. Prezentujeme případ ženy, u které byl ve věku 26 let dia­gnostikován v dutině břišní maligní tumor charakteru sarkomu. Pacientka prodělala několik chirurgických zákroků a aplikací chemoterapie, nicméně vše bez efektu. Později byl tumor reklasifikován jako c‑kit negativní GIST a byla u něj prokázána mutace v exonu 12 genu pro PDGFRA. Na základě tohoto nálezu byla zahájena cílená léčba imatinib mesylátem, která vedla k parciální remisi nádoru, dle CT vyšetření. Uvedenou léčbou bylo do dnešní doby dosaženo již pět let trvající stabilizace nemoci. Imatinib mesylát je použitelný jako cílená léčba i v případě c‑kit negativního GIST, nesoucího mutaci v genu PDGFRA. Klíčová slova: gastrointestinální stromální tumory – c‑kit receptor – PDGF alfa receptor – imatinib mesylát Práce byla podpořena výzkumným záměrem MZ ČR – RVO (MOÚ, 00209805). Autoři deklarují, že v souvislosti s předmětem studie nemají žádné komerční zájmy. Redakční rada potvrzuje, že rukopis práce splnil ICMJE kritéria pro publikace zasílané do biomedicínských časopisů. Obdrženo: 24. 10. 2013 Přijato: 2. 11. 2013

Inoperable c‑kit negative gastrointestinal stromal tumor (GIST) is commonly considered to be highly resistant to systemic therapy. We present a case of a woman with an abdominal sarcoma‑like tumor dia­gnosed at the age of 26. The patient underwent several surgical procedures and courses of cytostatic therapy without any substantial effect. Later, the tumor was reclassified as c‑kit negative GIST harbouring the mutation in exon 12 of PDGFRA gene. Hence, the therapy with imatinib mesylate was initiated, resulting in partial remission of metastatic lesions and further stabilization of the disease for five yeas to date. We therefore consider imatinib mesylate an appropriate therapy for c‑kit negative GIST bearing PDGFRA mutations.

• MeSH
• biopsie MeSH
• dospělí MeSH
• gastrointestinální stromální tumory * diagnóza   patofyziologie   terapie   MeSH
• histologie MeSH
• indukce remise MeSH
• inhibitory proteinkinas * terapeutické užití   MeSH
• Karnofského skóre MeSH
• léková rezistence MeSH
• lidé MeSH
• mutace MeSH
• počítačová rentgenová tomografie MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit * genetika   MeSH
• retroperitoneální prostor patofyziologie   MeSH
• růstový faktor odvozený z trombocytů - receptor alfa genetika   MeSH
• sarkom * diagnóza   patofyziologie   terapie   MeSH
• výsledek terapie MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Gastrointestinálne stromálne tumory (GISTy) predstavujú najčastejšie mezenchýmové nádory tráviaceho traktu. Ich súčasná liečba dnes, v závislosti od viacerých parametrov ochorenia, zahŕňa najmä chirurgickú resekciu a biologickú liečbu inhibítormi tyrozínových kináz (TKIs). Tu prezentujeme raritný prípad 53-ročného pacienta s mutáciou p.W557_558Kdel exónu 11 c-KIT génu v primárnom GISTe žalúdka diagnostikovanom v gastroskopickej biopsii, ktorý bol liečený neoadjuvantnou cielenou liečbou imatinibom. Po počiatočnej fáze stabilizácie ochorenia vznikla u pacienta rezistencia na túto terapiu. Napriek liečbe TKI inhibítormi druhej a tretej línie a totálnej chirurgickej extirpácii v ďalšom priebehu dochádzalo k opakovaným remisiám a relapsom. V resekčnom materiáli sme identifikovali viacpočetné mutácie v rôznych exónoch c-KIT génu, kde pri perzistencii primárnej delečnej mutácie v exóne 11 vznikli ďalšie sekundárne zriedkavé mutácie v exónoch 13 (p.V654A) a 17 (p.Y823D). Opakované úseky remisií a relapsov tak po liečbe TKIs, ako aj po chirurgickej resekcii tumoru, poukazujú na nepriaznivý vplyv týchto genetických zmien a otvárajú otázku potreby modifikácie terapeutického prístupu imatinib-rezistentných GISTov striedaním jednotlivých TKIs namiesto doteraz zaužívanej monoterapie.

Gastrointestinal stromal tumours (GISTs) represent the most common mesenchymal tumours of the digestive tract. Based on various parameters, the recent GIST treatment includes surgical and/or targeted therapy using tyrosine kinase inhibitors (TKIs). In this paper we present a case of 53-year-old patient with c-KIT exon 11 (p.W557_558Kdel) mutated primary GIST of stomach diagnosed by a gastroscopic biopsy and treated by neoadjuvant TKI therapy using imatinib. After incipient disease stabilization, the patient developed therapy resistance. In spite of the second and third-line TKI treatment and radical surgery, the following disease course consisted of repeated remissions and relapses. The resection material showed multiple c-KIT mutations in various exons, including persisting primary exon 11 deletion mutation and two secondary infrequent c-KIT mutations in exon 13 (p.V654A) and exon 17 (p.Y823D). Repeating cycles of remissions and relapses after TKI treatments and surgical resection show the adverse effects of these genetic mutations on GIST behaviour and might advocate therapy management modification allowing therapeutic combinations of TKIs instead of conventional monotherapies in imatinib resistent GISTs.

• MeSH
• axony patologie   MeSH
• biologická terapie metody   MeSH
• chemorezistence MeSH
• cílená molekulární terapie metody   MeSH
• gastrointestinální stromální tumory * chirurgie   farmakoterapie   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mezenchymom chirurgie   farmakoterapie   MeSH
• mutace MeSH
• neoadjuvantní terapie metody   MeSH
• protinádorové látky terapeutické užití   MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit * genetika   MeSH
• stomatochirurgické výkony MeSH
• tyrosinkinasy antagonisté a inhibitory   MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

The aims of project is to study in retrospective histological and immunohistochemical analysis expression of selected biological markers (c-kit, EGFR, and HER-2/neu) in the series of high grade salivary gland carcinomas. It is supposed to find genetic/epigenetic correlations and to associate them with clinical outcomes in patients. Our study is expected to open the way for targeted therapy of some high grade salivary gland carcinomas.

Cílem projektu je sledovat imunohistochemicky expresi vybraných onkoproteinů (c-kit, EGFR, a HER-2/neu) v různých typech vysoce maligních salivárních karcinomů a korelovat ji s patomorfologií nádorů a jejich prognózou. Dále budeme vyšetřovat somatické mutace a amplifikace genů kodujících tyto onkoproteiny. Cíle projektu jsou ve shodě s celkovou strategií IGA MZ podporovat projekty zaměřené na včasnou diagnostiku umožňující moderní komplexní terapii zhoubných nádorů.

• MeSH
• biologická terapie MeSH
• epidermální růstový faktor agonisté   analýza   MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční metody   využití   MeSH
• imunohistochemie metody   využití   MeSH
• nádory slinných žláz diagnóza   terapie   MeSH
• onkogenní proteiny v-erbB analýza   MeSH
• prediktivní hodnota testů MeSH
• prognóza MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit analýza   MeSH
• retrospektivní studie MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• zubní lékařství
• onkologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• MeSH
• chemorezistence MeSH
• dospělí MeSH
• indukce remise MeSH
• lidé MeSH
• nádory plic diagnóza   farmakoterapie   sekundární   MeSH
• piperaziny terapeutické užití   MeSH
• protinádorové látky terapeutické užití   MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit biosyntéza   MeSH
• pyrimidiny terapeutické užití   MeSH
• recidiva MeSH
• seminom diagnóza   farmakoterapie   sekundární   MeSH
• testikulární nádory diagnóza   farmakoterapie   metabolismus   MeSH
• tomografie spirální počítačová MeSH
• upregulace MeSH
• výsledek terapie MeSH
• záchranná terapie MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH

Adenoidně cystický karcinom je druhým až třetím nejčastějším maligním neoplazmatem velkých a převládající nádorovou jednotkou tumorů malých slinných žláz. Podobně jako některé další nádory této onkologické skupiny jej charakterizuje obtížná předpověď klinického průběhu. To je důvodem pro intenzivní hledání nových prognostických a prediktivních molekulárně biologických markerů. Jde především o identifikaci genů, resp. jejich produktů, odpovědných za iniciaci, progresi a metastázování nádorů. Kromě toho se přepokládá, že jejich cílenou biologickou blokádou by bylo možno zlepšit křivky přežití u prognosticky závažných salivárních nádorů vysokého stupně malignity. Práce podává přehled poznatků o dvou v posledních letech intenzivně zkoumaných genetických alterací, týkajících se C-kit a MYB genu a jejich významu pro diagnostiku, prognózu a cílenou terapii adenoidně cystického karcinomu slinných žláz.

Adenoid cystic carcinoma is the second to third most common malignant tumor of major and predominant neoplasm of minor salivary glands. Along with some other salivary carcinomas, ACC is characterized with difficulties in the prediction of its clinical course. Consequently, new prognostic and predictive molecular biomarkers are being sought. This mainly concerns the identification of genes and related products, responsible for the initiation, progression and metastasizings of tumors. Furthermore, it is supposed that the targeted biological blockade could improve survival curves of high grade salivary tumors associated with dismal prognosis. This paper reviews the role of C-kit and MYB genes, in recent years intensively studied genetic alterations in diagnosis, prognosis and targeted treatment of adenoid cystic carcinoma of salivary glands.

• MeSH
• adenoidně cystický karcinom diagnóza   genetika   MeSH
• exprese genu MeSH
• geny myb * genetika   MeSH
• lidé MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• nádory slinných žláz * diagnóza   genetika   MeSH
• prognóza MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit * genetika   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

The 22-mer c-kit promoter sequence folds into a parallel-stranded quadruplex with a unique structure, which has been elucidated by crystallographic and NMR methods and shows a high degree of structural conservation. We have carried out a series of extended (up to 10 μs long, ∼50 μs in total) molecular dynamics simulations to explore conformational stability and loop dynamics of this quadruplex. Unfolding no-salt simulations are consistent with a multi-pathway model of quadruplex folding and identify the single-nucleotide propeller loops as the most fragile part of the quadruplex. Thus, formation of propeller loops represents a peculiar atomistic aspect of quadruplex folding. Unbiased simulations reveal μs-scale transitions in the loops, which emphasizes the need for extended simulations in studies of quadruplex loops. We identify ion binding in the loops which may contribute to quadruplex stability. The long lateral-propeller loop is internally very stable but extensively fluctuates as a rigid entity. It creates a size-adaptable cleft between the loop and the stem, which can facilitate ligand binding. The stability gain by forming the internal network of GA base pairs and stacks of this loop may be dictating which of the many possible quadruplex topologies is observed in the ground state by this promoter quadruplex.

• MeSH
• denaturace nukleových kyselin MeSH
• draslík chemie   MeSH
• G-kvadruplexy * MeSH
• kationty MeSH
• párování bází MeSH
• promotorové oblasti (genetika) * MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit genetika   MeSH
• simulace molekulární dynamiky MeSH
• sodík chemie   MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Transplantation of male germ line cells into sterilized recipients has been used in mammals for conventional breeding as well as for transgenesis. We have previously adapted this approach for the domestic chicken and we present now an improvement of the germ cell transplantation technique by using an enriched subpopulation of c-Kit-positive spermatogonia as donor cells. Dispersed c-Kit positive testicular cells from 16 to 17 week-old pubertal donors were transplanted by injection directly into the testes of recipient males sterilized by repeated gamma irradiation. We describe the repopulation of the recipient's testes with c-Kit positive donor testicular cells, which resulted in the production of functional heterologous spermatozoa. Using manual semen collection, the first sperm production in the recipient males was observed about nine weeks after the transplantation. The full reproduction cycle was accomplished by artificial insemination of hens and hatching of chickens.

• MeSH
• kur domácí genetika   metabolismus   fyziologie   MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit metabolismus   MeSH
• spermatogeneze fyziologie   MeSH
• spermatogonie cytologie   MeSH
• sterilizace reprodukční MeSH
• testis cytologie   účinky záření   MeSH
• transplantace buněk metody   MeSH
• umělá inseminace MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Cutaneous mast cell tumours (MCT) are among the most frequent malignancies in dogs. Their clinical behaviour is highly variable and, with the exception of mutations in the c-kit gene, little is known about their genetic aetiology. The mutational status of the c-kit exons 8, 9 and 11, and exons 5-8 of the TP53 gene was analysed to find markers for molecular stratification of MCTs and predictors of clinical outcome. Mutations in the c-kit gene were detected in 19.5% (n = 8/41) samples and their presence was significantly associated with the high histopathological grade (P = 0.038). Mutations in the DNA binding domain of the TP53 gene were found in 14.6% (n = 6/41) of the analysed MCTs, and their frequency was similar in low and high grade MCTs (P > 0.05). TP53 mutations were not useful prognostic factors in this sample of canine cutaneous MCTs.

• MeSH
• frekvence genu MeSH
• kožní mastocytóza genetika   patologie   veterinární   MeSH
• mutace * MeSH
• nádorový supresorový protein p53 genetika   MeSH
• nádory kůže genetika   patologie   veterinární   MeSH
• nemoci psů genetika   patologie   MeSH
• prognóza MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit genetika   MeSH
• psi MeSH
• stupeň nádoru veterinární   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• psi MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

The c-myb proto-oncogene and its oncogenic derivative v-mybAMV encode transcriptional regulators engaged in the commitment of hematopoietic cells. While the c-Myb protein is important for the formation and differentiation of various progenitors, the v-MybAMV oncoprotein induces in chicks a progression and transformation of the single (monoblastic) cell lineage. Here we present the first evidence of cell fate-directing abilities of c-Myb and v-MybAMV proteins in avian neural crest (NC), where both proteins determine melanocytogenesis. The increased concentration of c-Myb induces progression into dendritic melanocytes and differentiation. The v-myb oncogene converts essentially all NC cells into melanocytes and causes their transformation. Both Myb proteins activate in NC cells expression of the c-kit gene and stem cell factor c-Kit signaling--one of the essential pathways in melanocyte development. These observations suggest that the c-myb-c-kit pathway represents a common regulatory scheme for both hematopoietic and neural progenitors and establishes a novel experimental model for studies of melanocytogenesis and melanocyte transformation.

• MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• crista neuralis cytologie   metabolismus   MeSH
• DNA primery genetika   MeSH
• financování organizované MeSH
• geny myb MeSH
• kuřecí embryo MeSH
• melanocyty cytologie   metabolismus   MeSH
• onkogenní proteiny v-myb genetika   metabolismus   MeSH
• protoonkogenní proteiny c-kit genetika   metabolismus   MeSH
• protoonkogenní proteiny c-myb genetika   metabolismus   MeSH
• růstový faktor kmenových buněk genetika   metabolismus   MeSH
• sekvence nukleotidů MeSH
• signální transdukce MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• kuřecí embryo MeSH
• zvířata MeSH