BACKGROUND: Angiostrongylus cantonensis (rat lungworm) is recognised as the leading cause of human eosinophilic meningitis, a serious condition observed when nematode larvae migrate through the CNS. Canine Neural Angiostrongyliasis (CNA) is the analogous disease in dogs. Both humans and dogs are accidental hosts, and a rapid diagnosis is warranted. A highly sensitive PCR based assay is available but often not readily accessible in many jurisdictions. An alternative DNA amplification assay that would further improve accessibility is needed. This study aimed to assess the diagnostic utility of a newly designed LAMP assay to detect DNA of globally distributed and invasive A. cantonensis and Angiostrongylus mackerrasae, the other neurotropic Angiostrongylus species, which is native to Australia. METHODOLOGY/PRINCIPAL FINDINGS: Cerebrospinal fluid (CSF) from dogs with a presumptive diagnosis of A. cantonensis infection (2020-2022) were received for confirmatory laboratory testing and processed for DNA isolation and ultrasensitive Angiostrongylus qPCR targeting AcanR3390. A newly designed LAMP assay targeting the same gene target was directly compared to the reference ultrasensitive qPCR in a diagnostic laboratory setting to determine the presence of A. cantonensis DNA to diagnose CNA. The LAMP assay (Angie-LAMP) allowed the sensitive detection of A. cantonensis DNA from archived DNA specimens (Kappa = 0.81, 95%CI 0.69-0.92; n = 93) and rapid single-step lysis of archived CSF samples (Kappa = 0.77, 95%CI 0.59-0.94; n = 52). Only A. cantonensis DNA was detected in canine CSF samples, and co-infection with A. mackerrasae using amplicon deep sequencing (ITS-2 rDNA) was not demonstrated. Both SYD.1 and AC13 haplotypes were detected using sequencing of partial cox1. CONCLUSIONS/SIGNIFICANCE: The Angie-LAMP assay is a useful molecular tool for detecting Angiostrongylus DNA in canine CSF and performs comparably to a laboratory Angiostrongylus qPCR. Adaptation of single-step sample lysis improved potential applicability for diagnosis of angiostrongyliasis in a clinical setting for dogs and by extension, to humans.
- MeSH
- Angiostrongylus cantonensis * genetika MeSH
- Angiostrongylus * genetika MeSH
- hlemýždi genetika MeSH
- infekce hlísticemi řádu Strongylida * diagnóza veterinární MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- lidé MeSH
- meningitida * diagnóza veterinární MeSH
- psi MeSH
- ribozomální DNA MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- lidé MeSH
- psi MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
In last years, the decline of bacterial meningitides can be noticed. However, in the case of viral neuroinfections, the same trend is not observed. Although the most of viral meningitides have a benign course, they rang among severe diseases of childhood age. The reasons are, among others, prolonged hospitalization and the necessity of invasive diagnostic methods. The most frequent viral neuroinfections occurred in the Czech conditions are the tick-borne encephalitis and meningitides caused by enteroviruses and herpesviruses. The herpes simplex virus (HSV) and the varicella-zoster virus are the most important from the last group. There is a benefit of existing causal therapy of herpesviruses, however (especially in the case of HSV1 etiology) the results are unsatisfying and the prognosis remains grave. The standard diagnostic procedure is based on lumbar puncture and cerebrospinal fluid examination. The identification of etiology is recently much more accurate because of the extensive availability of polymerase chain reaction technique.
Současný ústup frekvence bakteriálních meningitid, ke kterému dochází v posledních letech, není patrný u virových neuroinfekcí. I když většina z nich má zpravidla benigní průběh, patří v dětském věku k obávaným onemocněním už proto, že jsou spojeny s poměrně dlouhou hospitalizací a invazivními diagnostickými metodami. V našich podmínkách se nejčastěji setkáváme se středoevropskou klíšťovou encefalitidou (tick-borne encephalitis, TBE), enterovirovými meningitidami a neuroinfekcemi způsobenými herpetickými viry, z nichž se uplatní zejména virus herpes simplex (HSV) a virus varicella-zoster (VZV). U posledně jmenovaných máme výhodu v možnosti kauzální terapie, ale zejména v případě encefalitidy etiologie HSV1 nejsou výsledky uspokojivé a prognóza zůstává velmi závažná. Základním diagnostickým postupem je lumbální punkce s vyšetřením likvoru, etiologická diagnostika se velmi zpřesnila s rozšířením dostupnosti identifikace etiologického agens pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR).
- MeSH
- dítě MeSH
- encefalitida diagnóza terapie MeSH
- infekce centrálního nervového systému * diagnóza etiologie terapie MeSH
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- meningitida diagnóza terapie MeSH
- mladiství MeSH
- předškolní dítě MeSH
- výsledek terapie MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- předškolní dítě MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- MeSH
- konjunktivitida * diagnóza patologie terapie MeSH
- lidé MeSH
- meningitida * diagnóza patologie terapie MeSH
- nekrotizující enterokolitida * diagnóza patologie terapie MeSH
- nemoci novorozenců MeSH
- novorozenec MeSH
- pneumonie * diagnóza patologie terapie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
- MeSH
- hydrocefalus diagnóza etiologie terapie MeSH
- intrakraniální krvácení diagnóza patofyziologie terapie MeSH
- lidé MeSH
- meningitida diagnóza etiologie terapie MeSH
- nemoci mozku patofyziologie terapie MeSH
- nemoci nervového systému * patofyziologie terapie MeSH
- nervový systém - fyziologické jevy MeSH
- nervový systém * patologie MeSH
- novorozenec MeSH
- záchvaty diagnóza etiologie terapie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
Cytologické vyšetření mozkomíšního moku (MM) má určitá specifika. V preanalytické fázi vzhledem k odběru do zkumavky bez fixace a hypoonkotické povaze s rychlou degradací buněk vzniká nutnost zpracování do 2-3 hodin. V analytické fázi je třeba počítat s kvantitativním limitem při pravidelném paralelním zpracování cytologickém a metodami nemorfologickými. Pravidelným vstupním krokem cytologického vyšetření je zjištění celularity. I oligocytární vzorky mohou vykazovat závažné cytologické nálezy. V kategorii zánětlivých procesů má cytologická diagnóza hnisavé meningitis stanovená v řádu několika málo hodin zásadní vliv na prognózu onemocnění. Nehnisavé záněty jsou v širší diferenciální diagnóze specifikovány nejen cytologickým obrazem, nýbrž i paralelními nemorfologickými vyšetřeními cílenými na průkaz infekčního agens nebo autoimunní povahy zánětu. Nádorové procesy v intermeningeálním prostoru vyžadují zpravidla imunocytochemickou verifikaci. Minimální množství MM pro imunocytochemická došetření je 3-5 ml, požadavek na tato vyšetření vzniklý základním zhodnocením může znamenat nutnost odběru dalšího vzorku. Při dodržení odpovídajících postupů a interpretaci v kontextu paralelních nemorfologických vyšetření může cytologické vyšetření MM zásadním způsobem přispět k diagnóze patologických stavů v likvorových prostorech.
Cytological examination of cerebrospinal fluid (CSF) has some specifics. In the pre-analytical phase, due to collection into a tube without fixation and hypooncotic nature with rapid cell degradation, processing is required within 2-3 hours. In the subsequent analytical phase it is necessary to take into account the quantitative limit of the sample due to regular parallel cytological processing and non-morphological methods. A regular entry step of cytological examination is the quantification of cellularity. Even oligocellular samples may exhibit severe cytological findings. In the category of inflammatory processes, the cytological diagnosis of purulent meningitis within a few hours has a fundamental influence on prognosis of the disease. Non-purulent inflammations with a broad differential diagnosis are specified not only by cytological images, but also by parallel non-morphological examinations aimed at detecting an infectious agent or autoimmune nature of inflammation. Neoplastic processes in the intermeningeal space generally require immunocytochemical verification. The minimum amount of CSF for immunocytochemical examinations is 3-5 ml. The requirement for these examinations resulting from the baseline assessment may indicate the need for another sample. If the appropriate procedures and interpretations are followed in the context of parallel non-morphological examinations, the cytological examination of MM can contribute significantly to the diagnosis of pathological conditions in CSF spaces.
- MeSH
- dospělí MeSH
- duktální karcinom diagnóza MeSH
- hematologické nádory diagnóza MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- lymská neuroborelióza diagnóza MeSH
- meningitida diagnóza MeSH
- mladiství MeSH
- mozkomíšní mok * cytologie MeSH
- roztroušená skleróza diagnóza MeSH
- senioři MeSH
- výsledek terapie MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
Diferenciální diagnostika horečky u kojenců je široká. Po vyloučení infekce respirační, močové a gastrointestinální je nutno pomýšlet i na neuroinfekce. Prezentované kazuistické sdělení se věnuje časné diagnostice infekce centrální nervové soustavy a problematice interpretace zánětlivých parametrů v časné fázi bakteriálního infektu. Zdůrazňuje fakt, že časný likvorový nález u bakteriální meningitidy nemusí být zcela rozvinut a upozorňuje na obtíže při interpretaci zánětlivých parametrů ve vztahu k jejich biologickému poločasu.
In infant period, the differential diagnostics of fever is large. After eliminating respiratory, urinary and gastrointestinal infection, neuroinfection should also be taken into account. The presented case report deals with early diagnostics of central nervous system infection and with the issue of interpretation of inflammatory parameters in the early stage of a bacterial infection. It emphasises the fact that the early cerebrospinal fluid findings in the case of bacterial meningitis may not always be developed and calls attention to difficulties in the interpretation of inflammatory parameters with regard to their biological half-time.
- Klíčová slova
- zánětlivé parametry,
- MeSH
- ceftriaxon terapeutické užití MeSH
- diagnostické techniky a postupy MeSH
- infekce centrálního nervového systému * diagnóza terapie MeSH
- Klebsiella pneumoniae účinky léků MeSH
- klinické laboratorní techniky MeSH
- lidé MeSH
- meningitida * diagnóza terapie MeSH
- novorozenec MeSH
- výsledek terapie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- novorozenec MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- MeSH
- arteria carotis interna diagnostické zobrazování patofyziologie MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- meningitida * diagnóza komplikace MeSH
- stenóza arteria carotis * diagnóza farmakoterapie MeSH
- ultrasonografie metody MeSH
- viry klíšťové encefalitidy MeSH
- výsledek terapie MeSH
- Check Tag
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- MeSH
- antibakteriální látky terapeutické užití MeSH
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- meningitida diagnóza MeSH
- mladý dospělý MeSH
- pneumokokové infekce * diagnóza epidemiologie farmakoterapie prevence a kontrola MeSH
- pneumokokové vakcíny MeSH
- sérotypizace MeSH
- Streptococcus pneumoniae izolace a purifikace patogenita účinky léků MeSH
- vakcinace MeSH
- výsledek terapie MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladý dospělý MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- MeSH
- amputace MeSH
- antibakteriální látky terapeutické užití MeSH
- antidepresiva MeSH
- dialýza ledvin MeSH
- dolní končetina chirurgie patologie MeSH
- dospělí MeSH
- epilepsie farmakoterapie MeSH
- katecholaminy terapeutické užití MeSH
- lidé MeSH
- meningitida * diagnóza komplikace terapie MeSH
- mozkomíšní mok chemie mikrobiologie MeSH
- péče o pacienty v kritickém stavu MeSH
- tracheostomie MeSH
- ventilace umělá s přerušovaným přetlakem MeSH
- ventilace umělá s výdechovým přetlakem MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
