Based on analysis of global profiles of expression of serum miRNA, we want to create a new prognostic panel allowing for stratification of patients with monoclonal gammopathies according to individual risk of disease progression to multiple myeloma. The created prognostic panel of miRNA will be identifiable in easily accessible biological material (blood serum) that can be sampled repeatedly and its sampling is minimally invasive for the patient. The next step will be identification of a similar panel of circulating miRNA in other biological materials. Using the diagnostic panel of miRNA will be connected to a higher degree of individualisation of MM patients treatment and will lead to better therapeutic results of these patients as well as increase of quality of life.

Na základě analýzy globálních profilů exprese sérových miRNA chceme vytvořit nový prognostický panel umožňující stratifikaci pacientů s monoklonální gamapatií podle individuální míry rizika progrese onemocnění až do mnohočetného myelomu. Vytvořený prognostický panel miRNA bude identifikovatelný ve snadno dostupném biologickém materiálu (krevní sérum), který lze odebírat opakovaně, a jehož odběr je spojen s minimální mírou invazivity pro pacienta. Dalším krokem bude identifikace podobného panelu cirkulujících miRNA v jiných biologických materiálech. Použití diagnostického panelu miRNA bude spojeno s vyšší mírou individualizace léčby pacientů s MM a v důsledku povede nejen k lepším léčebným výsledkům u těchto pacientů, ale také ke zvýšení kvality jejich života.

• MeSH
• biologické markery MeSH
• individualizovaná medicína MeSH
• mikro RNA analýza   krev   MeSH
• mnohočetný myelom MeSH
• monoklonální gamapatie nejasného významu diagnóza   MeSH
• prognóza MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• molekulární biologie, molekulární medicína
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

BACKGROUND: Extramedullary disease in multiple myeloma patients is an uncommon event occurring either at the time of diagnosis, or during disease progression/relapse. This manifestation is frequently associated with poor outcome and resistance to treatment. We evaluated chromosomal alterations of plasma cells of multiple myeloma patients with extramedullary relapse, either in the bone marrow (BM) or at extramedullary sites, and in previous BM collection by interphase fluorescence in situ hybridization. MATERIAL AND METHODS: Thirty-one patients [25 BM plasma cells (BMPCs), 18 extramedullary tumor plasma cells], of which 12 had paired samples of BM and extramedullary plasma cells and 14 had previous collection of BM, were investigated for the presence of chromosomal aberrations (CHAs): del(17)(p13), del(13)(q14), 14q32 disruption, t(4;14)(p16;q32), t(14;16)(q32;q23), gain(1)(q21), and hyperdiploidy status. RESULTS: Overall, in unrelated samples, t(4;14) was more prevalent in extramedullary plasma cells, and hyperdiploidy was more frequent in BMPCs. In paired samples, there was a higher frequency of del(13)(q14) and 14q32 disruption in BMPCs. Frequency of all studied CHAs was higher in BMPCs of extramedullary patients than in their previous sample collection. CONCLUSION: These data show that plasma cells harbor more aberrations during their transformation into extramedullary form.

• MeSH
• chromozomální aberace * MeSH
• dospělí MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční MeSH
• kostní dřeň patologie   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• metastázy nádorů MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• progrese nemoci MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• staging nádorů MeSH
• translokace genetická MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

BACKGROUND: In this study, we aimed to identify microRNA from urine of multiple myeloma patients that could serve as a biomarker for the disease. RESULTS: Analysis of urine samples was performed using Serum/Plasma Focus PCR MicroRNA Panel (Exiqon) and verified using individual TaqMan miRNA assays for qPCR. We found 20 deregulated microRNA (p < 0.05); for further validation, we chose 8 of them. Nevertheless, only differences in expression levels of miR-22-3p remained close to statistical significance. CONCLUSIONS: Our preliminary results did not confirm urine microRNA as a potential biomarker for multiple myeloma.

• MeSH
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mikro RNA genetika   moč   MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   genetika   moč   MeSH
• nádorové biomarkery moč   MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• stanovení celkové genové exprese metody   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Poor outcome of extramedullary disease in multiple myeloma patients and lack of outcome predictors prompt continued search for new markers of the disease. In this report, we show circulating microRNA distinguishing multiple myeloma patients with extramedullary disease from myeloma patients without such manifestation and from healthy donors. MicroRNA-130a was identified by TaqMan Low Density Arrays and verified by quantitative PCR on 144 serum samples (59 multiple myeloma, 55 myeloma with extramedullary disease, 30 healthy donors) in test and validation cohorts as being down-regulated in myeloma patients with extramedullary disease. Circulating microRNA-130a distinguished myeloma patients with extramedullary disease from healthy donors with specificity of 90.0% and sensitivity of 77.1%, patients with extramedullary disease from newly diagnosed multiple myeloma patients with specificity of 77.1% and sensitivity of 34.3% in the test cohort and with specificity of 91.7% and sensitivity of 30.0% in the validation cohort of patients. Circulating microRNA-130a in patients with extramedullary myeloma was associated with bone marrow plasma cells infiltration. Further, microRNA-130a was decreased in bone marrow plasma cells obtained from patients with extramedullary myeloma in comparison to bone marrow plasma cells of myeloma patients without such manifestation, but it was increased in tumor site plasma cells of patients with extramedullary disease compared to bone marrow plasma cells of such patients (p<0.0001). Together, our data suggest connection between lower level of microRNA-130a and extramedullary disease and prompt further work to evaluate this miRNA as a marker of extramedullary disease in multiple myeloma.

• MeSH
• dospělí MeSH
• kostní dřeň patologie   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mikro RNA analýza   krev   genetika   MeSH
• mnohočetný myelom krev   diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• nádorové biomarkery analýza   krev   genetika   MeSH
• plazmatické buňky patologie   MeSH
• prognóza MeSH
• regulace genové exprese u nádorů * MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Volná cirkulující DNA (cf‑DNA) je charakterizována jako extracelulární DNA, která může být přítomna v nízkých koncentracích v krvi zdravých jedinců. Cf‑DNA je do krevního řečiště uvolňována apoptózou, ale i nekrózou. Zvýšené hladiny se vyskytují u patologických stavů, jako je zánět, stres či autoimunitní onemocnění. Výrazně zvýšené hodnoty cf‑DNA jsou patrné zejména u pacientů s malignitami, a to především v pokročilých stadiích nemoci. V takovémto případě je nádorově specifická cf‑DNA uvolňována nekrózou z buněk primárního nádoru a metastáz. V poslední době se hodně studií zabývá tzv. liquid biopsy (tekutou biopsií), která umožňuje poměrně snadnou detekci cirkulujících nádorových buněk i cirkulujících molekul nukleových kyselin z periferní krve k diagnostice nádorových onemocnění. Kvantitativní stanovení a detekce genetických a epigenetických změn v cf‑DNA u pacientů s různými malignitami má potenciální využití v molekulární diagnostice, prognóze, monitorování průběhu nemoci a odpovědi na léčbu. Tento článek je zaměřen na potenciální využití cf‑DNA jako krevního biomarkeru u vybraných solidních nádorů a hematologických malignit.

Circulating cell‑free DNA (cf‑DNA) is characterized as extracellular DNA that may be present in the blood of healthy individuals in low concentrations. Cf‑DNA is released by apoptosis or necrosis into the bloodstream. Increased levels are found in pathological conditions, such as inflammation, autoimmune diseases, or stress. Significant increase of cf‑DNA is particularly evident in patients with malignancies, especially in the advanced stages of the disease. In this case, the tumor specific cf‑DNA is released by necrosis from the cells of primary tumor and metastases. Recently, many studies concentrate on the so‑called ‘liquid biopsies’ that allow detection of circulating tumor cells and circulating nucleic acids from peripheral blood for tumor diagnostics. Quantitative methods and detection of genetic and epigenetic alternations of cf‑DNA in patients with different malignancies have potential applications in molecular diagnosis, prognosis, monitoring of disease progression and response to treatment. This review focuses on potential utility of cf‑DNA as a blood biomarker in selected solid tumors and hematologic malignancies. Key words: circulating cell‑free DNA – tumor marker – solid tumors – hematological malignancies This study was supported by grant of Internal Grant Agency of the Czech Ministry of Health NT14575. The authors declare they have no potential conflicts of interest concerning drugs, products, or services used in the study. The Editorial Board declares that the manuscript met the ICMJE “uniform requirements” for biomedical papers. Submitted: 13. 3. 2015 Accepted: 18. 5. 2015

• MeSH
• biopsie metody   MeSH
• DNA * diagnostické užití   genetika   krev   MeSH
• hematologické nádory genetika   krev   MeSH
• kolorektální nádory krev   MeSH
• lidé MeSH
• metylace DNA MeSH
• mutace MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• nádory plic genetika   krev   MeSH
• nádory prsu genetika   krev   MeSH
• nádory * genetika   krev   MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

• MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• imunoglobulin M krev   MeSH
• lidé MeSH
• mikro RNA krev   genetika   MeSH
• monoklonální gamapatie nejasného významu krev   diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• nádorové biomarkery krev   genetika   MeSH
• regulace genové exprese MeSH
• ROC křivka MeSH
• Waldenströmova makroglobulinemie krev   diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• dopisy MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

BACKGROUND: MicroRNAs are short non-coding regulators of gene expression. The human miR-29 family consists of three members: miR-29a, miR-29b and miR-29c. Members of this family were found to be aberrantly expressed in various types of tumors, including hematological malignancies. This family was described to have both oncogenic and tumor suppressor features influencing various pathological processes, such as tumor growth and apoptosis. This review summarizes current knowledge about the miR-29 family in selected hematological malignancies. CONCLUSION: Recent research of miR-29 family in hematological malignancies has proven its oncogenic as well as tumor suppressive potential. Nevertheless, the level of current evidence is not sufficient, and data remain inconclusive.

• MeSH
• apoptóza genetika   MeSH
• extracelulární matrix genetika   MeSH
• hematologické nádory genetika   MeSH
• lidé MeSH
• mikro RNA genetika   fyziologie   MeSH
• nádorová transformace buněk genetika   MeSH
• proliferace buněk genetika   MeSH
• stárnutí buněk genetika   MeSH
• tumor supresorové geny fyziologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

AIMS: Multiple myeloma (MM), the second most common hematological cancer, is a lymphoproliferative disease of terminally differentiated B lymphocytes characterized by expansion of monoclonal plasma cells. With the introduction of new drugs, MM has become a hard-to-treat disease. TheAIM of treatment is clinical remission and eradication of clinical manifestations but most MM patients eventually relapse. For this reason, more accurate monitoring of remission and relapse using molecular biology techniques is at the center of attention. METHODS: For monitoring, we used allele-specific PCR and quantitative real-time PCR based on specific detection of VDJ immunoglobulin heavy chain gene rearrangement of clonal cells for monitoring. The hypervariable region of IgH rearrangement is used for detection of minimal residual disease (MRD) in MM as this sequence is used for allele-specific primers and probe design. This technique is a complementary tool for flow cytometry in MRD detection; however, it has not been established in the Czech Republic so far. RESULTS: Qualitative and quantitative MRD detection was performed in 50% (5/10) patients and qualitative MRD detection in another 3 oligoclonal patients. CONCLUSIONS: Next to flow cytometry, detection of MRD by qPCR is a viable option and has been introduced in the Czech Republic.

• MeSH
• genová přestavba MeSH
• imunoglobuliny - gama-řetězce metabolismus   MeSH
• kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
• leukocyty mononukleární metabolismus   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   MeSH
• nádorové biomarkery metabolismus   MeSH
• reziduální nádor diagnóza   MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• těžké řetězce imunoglobulinů metabolismus   MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

BACKGROUND: Multiple myeloma (MM) is characterized by malignant proliferation of plasma cells (PC) which accumulate in the bone marrow (BM). The advent of new drugs has changed the course of the disease from incurable to treatable, but most patients eventually relapse. One group of MM patients (10-15%) is considered high-risk because they relapse within 24 months. Recently, extramedullary relapse of MM (EM) has been observed more frequently. Due to its aggressivity and shorter survival, EM is also considered high-risk. AIMS: The goal of this study was to determine if the so-called high-risk genes published by the University of Arkansas group (UAMS) are even more deregulated in EM patients than in high-risk MM patients and if these patients may be considered high-risk. METHODS: Nine samples of bone marrow plasma cells from MM patients as well as 9 tumors and 9 bone marrow plasma cells from EM patients were used. Quantitative real-time PCR was used for evaluation of expression of 15 genes connected to the high-risk signature of MM patients. RESULTS: Comparison of high-risk plasma cells vs extramedullary plasma cells revealed 4 significantly deregulated genes (CKS1B, CTBS, NADK, YWHAZ); moreover, comparison of extramedullary plasma cells vs extramedullary tumors revealed significant differences in 9 out of 15 genes. Of these, 6 showed significant changes as described by the UAMS group (ASPM, SLC19A1, NADK, TBRG4, TMPO and LARS2). CONCLUSIONS: Our data suggest that increasing genetic abnormalities as described by the gene expression data are associated with increased risk for EM relapse.

• MeSH
• buněčné klony MeSH
• exprese genu MeSH
• geny nádorové genetika   MeSH
• kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom genetika   MeSH
• plazmatické buňky fyziologie   MeSH
• recidiva MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Liečba mnohopočetného myelómu (multiple myeloma – MM), v súčasnosti nevyliečiteľného ochorenia, sa zameriava na dosiahnutie kompletnej remisie. Jednou skupinou liekov, ktorá je v tomto ohľade pomerne efektívna, sú imunomodulačné lieky (immunomodulatory drugs – IMiDs) ako napr. talidomid. Mechanizmus ich účinku však nie je doposiaľ úplne jasný. Posledné výskumy naznačujú, že dôležitú úlohu v sprostredkovaní protinádorových účinkov IMiDs zohráva proteín cereblon (CRBN), na ktorý sa v tomto prehľadovom článku zameriavame. Tento proteín má funkciu substrátového receptoru v Cul4-E3 ubikvitín-proteín ligázovom komplexe, a teda rozpoznáva proteíny určené k degradácií. Väzbou CRBN a IMiDs sa inhibuje funkcia celého ubikvitín-proteazómového komplexu, čo vysvetľuje ich protinádorové účinky. Okrem toho bola potvrdená aj korelácia medzi expresiou génu CRBN a efektivitou liečby u MM pacientov liečených IMiDs. Tieto poznatky naznačujú, že expresia CRBN by mohla slúžiť ako bio­marker pre predikciu odpovedi na liečbu pomocou IMiDs u pacientov s MM. Kľúčové slová: cereblon – mnohopočetný myelóm – imunomodulačné lieky

Treatment of multiple myeloma (MM), currently an incurable disease, aims to achieve complete remission. Immunomodulatory drugs (IMiDs), represented by thalidomide, are one class of very effective drugs. However, the mechanism of IMiDs action is not yet completely understood. Recent research suggests that cereblon (CRBN) plays an important role in mediating anti-tumor effects of IMiDs; therefore, our review focuses on this protein. CRBN is a substrate receptor of Cul4-E3 ubiquitin ligase complex, and thus recognizes proteins destined for degradation. Bind­ing of CRBN and IMiDs inhibits function of the entire ubiquitin proteasome complex which partly explains their anti-tumor effects. In addition, a correlation between CRBN gene expres­sion and effectiveness of treatment in MM patients treated with IMiDs was confirmed. These findings suggest that CRBN expression could possibly serve as a bio­marker to predict response to IMiD in MM patients. Key words: cereblon – multiple myeloma – immunomodulatory drugs This study was supported by grants IGA MZ CR NT14575 and NT12130. The authors declare they have no potential conflicts of interest concerning drugs, products, or services used in the study. The Editorial Board declares that the manuscript met the ICMJE “uniform requirements” for biomedical papers. Submitted: 12. 5. 2014 Accepted: 19. 5. 2014

• MeSH
• imunologické faktory * genetika   MeSH
• komplexy ubikvitinligas fyziologie   MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom * farmakoterapie   genetika   MeSH
• nádorové biomarkery genetika   MeSH
• nádorové proteiny MeSH
• prognóza MeSH
• proteasy * fyziologie   genetika   MeSH
• regulace genové exprese u nádorů MeSH
• thalidomid farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH