The expression of the tumour suppressor gene p53 was analysed in 11 human breast cancer cell lines by immunohistochemistry, immunoprecipitation and cDNA sequencing. We used a panel of anti-p53 monoclonal antibodies for cell staining and found abnormalities in every case. Eight of the cell lines produce a form of p53 which can be immunoprecipitated by the monoclonal antibody PAb240 but not by PAb1620. In the murine system PAb240 only immunoprecipitates mutant p53. We sequenced p53 cDNA directly from four of the PAb240 positive cell lines using asymmetric PCR templates. All four contained missense mutations in p53 RNA, with no detectable expression of the wild type sequence. Different residues were affected in each cell line, but all the mutations changed amino acids conserved from man to Xenopus. These results imply that as in the murine system, the PAb240 antibody reliably detects a wide variety of p53 mutations and that these mutations have a common effect on the structure of p53. Immunohistochemical data suggest that p53 mutation is the commonest genetic alteration so far detected in primary breast cancer.

• MeSH
• DNA, Neoplasm genetics   metabolism   MeSH
• Epitopes immunology   MeSH
• Gene Expression MeSH
• Phosphoproteins genetics   immunology   metabolism   MeSH
• Transcription, Genetic MeSH
• Immunohistochemistry MeSH
• Carcinoma, Intraductal, Noninfiltrating genetics   metabolism   pathology   MeSH
• Humans MeSH
• Molecular Sequence Data MeSH
• Mutation * MeSH
• Tumor Cells, Cultured metabolism   pathology   MeSH
• Tumor Suppressor Protein p53 MeSH
• Breast Neoplasms genetics   metabolism   pathology   MeSH
• Oncogene Proteins genetics   immunology   metabolism   MeSH
• Polymerase Chain Reaction MeSH
• Precipitin Tests MeSH
• Antibodies immunology   MeSH
• RNA, Neoplasm genetics   metabolism   MeSH
• Amino Acid Sequence MeSH
• Check Tag
• Humans MeSH
• Publication type
• Journal Article MeSH

Primary lung cancer samples of the major histological types were examined for expression of the tumor suppressor gene p53 by immunohistochemistry. Abnormalities in p53 expression were found in 28 of 40 carcinomas, 14 of 17 squamous tumours showing abnormal p53 expression, whereas no expression of p53 was detectable in 7 carcinoid tumours or in 10 normal lung samples. Direct evidence for homozygous expression of mutant p53 mRNA in representative carcinomas was obtained by means of an asymmetric polymerase chain reaction mRNA sequencing strategy, which allowed sequencing without any cloning step. All the mutations were G to T transversions resulting in mis-sense mutations in aminoacids highly conserved in evolution. Mutation of the p53 gene is the most frequently identified genetic change in human lung cancer; these findings suggest that simple immunohistological methods can provide strong evidence of such mutation.

• MeSH
• Adenocarcinoma analysis   genetics   MeSH
• Alleles MeSH
• Autoradiography MeSH
• DNA, Neoplasm analysis   MeSH
• Phosphoproteins analysis   genetics   MeSH
• Immunohistochemistry MeSH
• Carcinoid Tumor analysis   genetics   MeSH
• Humans MeSH
• Chromosomes, Human, Pair 17 * MeSH
• Carcinoma, Small Cell analysis   genetics   MeSH
• RNA, Messenger analysis   MeSH
• Molecular Sequence Data MeSH
• Mutation * MeSH
• Tumor Suppressor Protein p53 MeSH
• Lung Neoplasms analysis   genetics   MeSH
• Oligonucleotide Probes MeSH
• Oncogene Proteins analysis   genetics   MeSH
• Polymerase Chain Reaction MeSH
• Amino Acid Sequence MeSH
• Carcinoma, Squamous Cell analysis   genetics   MeSH
• Check Tag
• Humans MeSH
• Publication type
• Journal Article MeSH
• Research Support, Non-U.S. Gov't MeSH

• MeSH
• Oncogene Proteins, Fusion MeSH
• Neoplasms genetics   MeSH
• Oligonucleotide Probes MeSH
• RNA isolation & purification   MeSH
• Suppression, Genetic MeSH

On 8 December 2022 the organizing committee of the European Network for Breast Development and Cancer labs (ENBDC) held its fifth annual Think Tank meeting in Amsterdam, the Netherlands. Here, we embraced the opportunity to look back to identify the most prominent breakthroughs of the past ten years and to reflect on the main challenges that lie ahead for our field in the years to come. The outcomes of these discussions are presented in this position paper, in the hope that it will serve as a summary of the current state of affairs in mammary gland biology and breast cancer research for early career researchers and other newcomers in the field, and as inspiration for scientists and clinicians to move the field forward.

• MeSH
• Biology MeSH
• Humans MeSH
• Mammary Glands, Human * MeSH
• Breast Neoplasms * MeSH
• Breast MeSH
• Check Tag
• Humans MeSH
• Female MeSH
• Publication type
• Journal Article MeSH
• Review MeSH

Accurate assessment of TP53 gene status in sporadic tumors and in the germline of individuals at high risk of cancer due to Li-Fraumeni Syndrome (LFS) has important clinical implications for diagnosis, surveillance, and therapy. Genomic data from more than 20,000 cancer genomes provide a wealth of information on cancer gene alterations and have confirmed TP53 as the most commonly mutated gene in human cancer. Analysis of a database of 70,000 TP53 variants reveals that the two newly discovered exons of the gene, exons 9β and 9γ, generated by alternative splicing, are the targets of inactivating mutation events in breast, liver, and head and neck tumors. Furthermore, germline rearrange-ments in intron 1 of TP53 are associated with LFS and are frequently observed in sporadic osteosarcoma. In this context of constantly growing genomic data, we discuss how screening strategies must be improved when assessing TP53 status in clinical samples. Finally, we discuss how TP53 alterations should be described by using accurate nomenclature to avoid confusion in scientific and clinical reports. Cancer Res; 77(6); 1250-60. ©2017 AACR.

• MeSH
• Genetic Variation genetics   MeSH
• Humans MeSH
• Tumor Suppressor Protein p53 genetics   MeSH
• Neoplasms diagnosis   genetics   therapy   MeSH
• Quality Control * MeSH
• Practice Guidelines as Topic standards   MeSH
• Validation Studies as Topic MeSH
• Check Tag
• Humans MeSH
• Publication type
• Journal Article MeSH
• Review MeSH

Cíl práce: Určení a vyšetření potenciálních rizikových skupin populace ohrožených HHV 8 infekcí. Materiál a metodika: Nepřímý imunofluorescenční test (NIF) k detekci IgG protilátek proti pozdnímu (lytickému) antigenu HHV 8. Výsledky: Byl vyšetřen 101 pacient STD centra Kožní kliniky, 129 HIV negativních homosexuálních mužů – pacientů – zájemců o dobrovolné HW testováni a 37 pacientů s opakovanými transfuzemi krve. Nejvyšší počet 13 (10 %) pacientů s IgG protilátkami proti lytickému antigenu HHV 8 bylo nalezeno ve skupině HW negativních homosexuálních mužů. Závěr. HHV 8 infekcí jsou kromě HW pozitivních osob nejvíce ohroženi v České republice HW negativní homosexuální muži.

Objective: To identify and to examine the population groups at highest risk of acquiring HHV8 infection. Material and methods: Indirect immunofluorescence test (IIP) for detection of IgG antibodies to the lytic antigen of HHV 8. Results: In total 101 STD patients of a dermatovenerological clinic, 129 HIV - negative homosexual men - who have asked for voluntary HW testing and 37 patients with repeated blood transfusions were tested. The highest number of patients - 13 (10 %) with IgG antibodies to the lytic antigen of HHV 8 was found in the group of HIV - negative homosexual men. Conclusions: In the Czech Republic are at highest risk of HHV 8 infection (except HW positive persons), HTV negative men.

• MeSH
• Adult MeSH
• Research Support as Topic MeSH
• Fluorescent Antibody Technique methods   MeSH
• HIV Seropositivity MeSH
• Homosexuality MeSH
• Blood Transfusion MeSH
• Humans MeSH
• Herpesvirus 8, Human MeSH
• Transfusion Reaction MeSH
• Risk Factors MeSH
• Check Tag
• Adult MeSH
• Humans MeSH
• Male MeSH
• Female MeSH
• Geographicals
• Czech Republic MeSH

Na konci roku 2019 došlo po třech letech k odeznění spalničkové epidemie v ČR a k nástupu nového patogenu. Pandemie covid-19 silně ovlivnila činnost pracoviště, neboť se laboratoř aktivně zapojila do PCR diagnostiky SARS-CoV-2, která pokračovala i v roce 2021. V rámci grantového projektu bylo provedeno speciální testování klinických vzorků z proběhlé epidemie spalniček, která v České republice vyvrcholila v roce 2019. Jednalo se o genotypizaci všech pozitivních vzorků, čímž byla zahájena molekulární surveillance v ČR. Byla testována avidita IgG protilátek proti viru spalniček, která nepatří mezi rutinní sérologické metody a umožní rozlišit mezi primárním a sekundárním selháním vakcinace. Byla zahájena standardizace neutralizačního testu, který je jako jediný schopen detekovat neutralizační, tedy protektivní, protilátky proti viru spalniček. NRL se podílela na projektu sledujícím séroprevalenci protilátek proti vybraným nákazám, kdy byly testovány IgG protilátky proti parvoviru B19 v kohortě žen, které podstupují císařský řez, s cílem získat alespoň orientační informaci o promořenosti žen fertilního věku v ČR. Neboť ačkoli je známo, že anamnestické IgG protilátky poskytují celoživotní ochranu a že nákaza parvovirem B19 u gravidních žen může vést až k fatálnímu poškození plodu, v rámci těhotenského screeningu se testování těchto protilátek neprovádí.

At the end of 2019, the measles epidemic subsided and a new pathogen appeared. The covid-19 pandemic greatly affected the work of the NRL because the laboratory was actively involved in PCR diagnostics of SARS-CoV-2 through to 2021. As part of the grant project, special testing of clinical samples from the recent measles epidemic, which had culminated in the Czech Republic, was carried out in 2019. This involved the genotyping of all positive samples and initiated molecular surveillance in the Czech Republic. The avidity of IgG antibodies against the measles virus was tested; this is not a part routine serological methodology and enables distinguishing between primary and secondary vaccination failure. The standardisation of the neutralisation test, which is the only test capable of detecting neutralising or protective antibodies against the measles virus was initiated. The NRL participated in a project monitoring the seroprevalence of antibodies against selected infections. This involved testing IgG antibodies against parvovirus B19 in a cohort of women undergoing caesarean section, with the aim of obtaining at least indicative information on prevalence among women of childbearing age in the Czech Republic. Although it is known that anamnestic IgG antibodies provide lifelong protection and that parvovirus B19 infection in pregnant women can lead to fatal damage to the foetus, testing for these antibodies is not performed as part of pregnancy screening.

• MeSH
• Clinical Laboratory Techniques MeSH
• Humans MeSH
• Measles * diagnosis   epidemiology   MeSH
• Check Tag
• Humans MeSH
• Geographicals
• Czech Republic MeSH

Autoři přináší kazuistiku 42 1etého muže, který trávil 14 dní v srpnu 2003 v egyptském přímořském letovisku Hurghada a který byl přijat na infekční kliniku pro 4 dny trvající horečku. Hlavními obtížemi byla silná bolest hlavy a neproduktivní kašel, 7. a 8. den nemoci přechodný makulopapulózní exantém, laboratorně bylo zjištěno mírné zvýšení C reaktivního proteinu a elevace aminotransferáz do 5násobku normy, na skiagramu plic zastiženy hypoventilační změny bazálně, ostatní nálezy byly nespecificky změněné nebo normální. Horečka klesla po 15 dnech, aniž by reagovala na použitá antibiotika - co-amoxicillin, clarithromycin a ofloxacin. Sérologické vyšetření prokázalo vysoký titr Weilovy-Felixovy reakce s antigenem Proteus 0X19 (1 ; 5 120) a pozitivní protilátky IgG a IgM proti Rickettsia typhi. Dodatečně byl podán doxycyklin, obtíže zcela odezněly, laboratorní hodnoty se normalizovaly do 6 týdnů od začátku nemoci. Diagnóza byla uzavřena jako murinní (endemický) skvrnitý tyfus. Pacient negoval poštípání členovci, autoři připouští možnost inhalace kontaminovaného prachu při návštěvě přístavu. Uvedený případ krysí skvrnivky je první popsaný a patrně zatím jediný v České republice.

Authors present a case report of 42-year male who spent 14 days in August of 2003 in Egyptian seaside summer town Hurghada and later he was admitted to the Infectious Disease Department Prague with the fever lasting 4 days. His symptoms were as follows: strong headache and dry cough. On the 7th and 8th day appeared transient maculopapular rash, laboratory test revealed a slightly elevated C reactive protein and elevation of amino transferases up to 5 times higher than range values, chest X-ray showed hypoventilation opacities on the lower lung fields, other findings were non-specifically changed or normal. The fever dropped after 15 days without any response to administered antibiotics - amoxicillin/clavulanate, clarithromycin a ofloxacin. Weil-Felix reaction with antigen Proteus OX19 (1 -. 5120) was highly positive and positive antibodies IgG and IgM against Rickettsia typhi were positive. Later doxycycilne was given, problems fully subsided, laboratory values were normalised up to six weeks from the beginning of the disease. Diagnosis was completed as murine typhus. The patient excluded arthropode bit. The authors considered the possibility of inhaled contaminated dust during his visit of the port. The above given case was firstly referred in the Czech Republic and still it is the only case.

• MeSH
• Anti-Infective Agents classification   therapeutic use   MeSH
• Humans MeSH
• Rickettsia typhi pathogenicity   MeSH
• Typhus, Endemic Flea-Borne diagnosis   MeSH
• Rare Diseases diagnosis   therapy   MeSH
• Check Tag
• Humans MeSH
• Publication type
• Case Reports MeSH
• Geographicals
• Egypt MeSH

Cíl studie: Porovnání nálezů pozitivních intra-akrosomálních proteinů a seminálních spermaglutinačníchprotilátek u pacientů, u párů s poruchou plodnosti a dárců.Typ studie: Prospektivní studie.Název a sídlo pracoviště: Gynekologicko-porodnická klinika LF UK a FN, Plzeň, Ústav molekulárnígenetiky AV ČR, Praha.Metodika: Použili jsme monoklonální protilátky (Hs-8 a Hs-14) proti intra-akrosomálním proteinůmlidských spermií (připraveny v Ústavu molekulární genetiky, AV ČR) k detekci akrosomálníchproteinů pomocí imunofl uorescenční metody. Mikroskopicky jsme hodnotili přítomnost,charakter a procento spermií s označenými intra-akrosomálními proteiny. Protilátky proti spermiímjsme určili přímým MAR-testem pro IgG, IgA, IgM a IgE. Vyšetřili jsme celkem 315 mužůz Poradny pro imunologii reprodukce a pacientů z IVF programu (od ledna 2002 do března 2003).Kontrolní skupinu tvořili dobrovolní dárci spermatu.Výsledky: U dárců jsme prokázali pozitivní intra-akrosomální proteiny i po rozmrazení ejakulátu,protilátky proti spermiím v seminální plazmě nebyly přítomny. Ve skupině normospermatikůjsme zjistili přítomnost seminálních spermaglutinačních protilátek a to v izotypu IgG u 11 %,v IgA ve 14,5 %, v IgM v 3,6 %, v IgE v 5,2 %. Silnou pozitivitu intra-akrosomálních proteinů značenýchmonoklonální protilátkou Hs8 jsme nalezli u 68,4 %, a značených monoklonální protilátkouHs14 dokonce u 81,3 % pacientů. Naproti tomu u oligostenospermatiků jsme prokázali výraznýnárůst spermaglutinačních protilátek (pro IgG ve 40,5 %, pro IgA u 28,6 %, pro IgM u 9,5 % a proIgE u 11,9 %). Intra-akrosomální proteiny byly nalezeny v dominantní podobě u 15,5 % (značenýchHs8) a u 20,2 % (značených Hs14).Závěr: Kvantitativní hodnocení intra-akrosomálních proteinů a sledování spermaglutinačníchprotilátek patří mezi významné ukazatele stavu lidských spermií a plodnosti muže.

Objective: Comparison of the positive intra-acrosomal proteins and spermagglutinating antibodiesin human semen samples from various groups of patients.Design: Prospective study.Setting: Department of Gynecology and Obstetrics and Faculty Hospital, Charles University, Pilsen,Institute of Molecular Genetics, Czech Academy of Science, Prague.Methods: Monoclonal antibodies Hs-8 and Hs-14 (prepared in the Institute of Molecular Genetics,Prague) were used for detection of intra-acrosomal sperm proteins. Microscopic immunofl uores cent methods detected the incidence, the character and the percentage of the spermatozoa specified by above-mentioned monoclonal antibodies. Direct mixed anti-immunoglobulin reactionstest (MAR-test) for IgG, IgM, IgA, IgE was used for detection of spermagglutinating antibody. Weexamined 315 infertile patients from Special Consultation for Immunology of Reproduction andfrom the IVF programme, and sperm healthy donors (January 2002 – March 2003).Results: Native donor‘s sperm cells had excellent positive intra-acrosomal proteins stained withmonoclonal antibodies Hs8 and Hs14 and after thawing as well as. No spermagglutinating antibodieswere found. In the group with normal sperm count and light microscopic morphology wefound the presence of seminal spermagglutinating antibodies in 11% (IgG), in 14.5% (IgA), in 3.6%(IgM), in 5.2% (IgE). Signifi cant positivity of intra-acrosomal protein stained with Hs8 monoclonalantibody was reached in 68.4%, and with Hs14 monoclonal antibody in even 81.3% of men. Onthe other hand, in oligoasthenospermatic patients we found signifi cant increasing of spermagglutinatingantibodies (for IgG 40.5%, for IgA 28.6%, for IgM 9.5%, for IgE 11.9%). Dominant goodstaining of intra-acrosomal proteins were seen only in 15.5% of men (for Hs8) and in 20.2% (forHs14).Conclusion: The quantitative detection of intra-acrosomal sperm proteins and spermagglutinatingantibodies are used as important properties of human semen and serve for evaluation ofacrosomal state, and male fertility together.

• MeSH
• Acrosome cytology   chemistry   MeSH
• Adult MeSH
• Fertilization in Vitro MeSH
• Research Support as Topic MeSH
• Immunologic Tests methods   MeSH
• Humans MeSH
• Infertility, Male diagnosis   etiology   therapy   MeSH
• Proteins MeSH
• Antibodies MeSH
• Spermatozoa pathology   MeSH
• Check Tag
• Adult MeSH
• Humans MeSH
• Male MeSH
• Publication type
• Review MeSH
• Comparative Study MeSH

Typ studie: Systematický přehledový článek. Název a sídlo pracoviště: Porodnicko-gynekologická klinika, Lékařská fakulta Univerzity Palackého v Olomouci, Fakultní nemocnice Olomouc. Metodika, výsledky: Každý člověk, je-li vystaven cizímu antigenu červené krevní buňky (erytrocytární antigen), který sám nevlastní, si vytváří protilátku. Dojde-li ke kontaktu s cizím erytrocytárním antigenem v průběhu těhotenství, rozvíjí se erytrocytární aloimunizace těhotné ženy a vlivem pronikání vytvořených protilátek přes placentu i hemolytická nemoc plodu a novorozence (hemolytic disease of the fetus and newborn, HDFN). Protilátky jsou vytvářeny imunitním systémem těhotné ženy a jejich množství a kvalita závisí na mnoha faktorech. Jejich funkcí je eliminace fetálních „cizích“ erytrocytů. Způsoby eliminace protilátkami označených fetálních erytrocytů jsou v krevním oběhu těhotné ženy i plodu/novorozence stejné a jejich principem je imunopatologická reakce II. typu, podle klasifikace Coombse a Gella, neboli též cytotoxická. Závažné formy HDFN mohou vést k zvýšené perinatální morbiditě i mortalitě. Prevence rozvoje RhD aloimunizace a rozvoje závažné formy HDFN je založena na podávání polyklonálního imunoglobulinu (Ig) G anti-D při všech potenciálně senzibilizujících událostech. Předpokládaný mechanismus účinku IgG anti-D je založen na rychlém odstranění antigenu přebytkem protilátky a na protilátkami zprostředkované imunitní supresi (antibody mediated immune suppression, AMIS). Přesný imunologický princip, ale zatím není zcela znám. Závěr: Tento článek popisuje tvorbu nepravidelných protilátek, způsoby eliminace fetálních erytrocytů a princip prevence podáváním antiD imunoglobulinu z imunologického pohledu.

Design: Review article. Setting: Department of Obstetrics and Gynecology, Palacky University Olomouc, Faculty of Medicine and Dentistry, University Hospital Olomouc. Methods, results: Every person exposed to a foreign red blood cell antigen (erythrocyte antigen) develops an antibody. If the contact with a foreign erythrocyte antigen occurs during pregnancy, the erythrocyte alloimmunization of the pregnant woman develops and, due to antibodies crossing through the placenta also Haemolytic disease of the foetus and newborn (HDFN) can occur. Antibodies are made by pregnant woman's immune system and their quantity and quality depend on many factors. Their function is to eliminate foetal "foreign" erythrocytes. Ways of elimination of antibody-labelled foetal erythrocytes are the same in the bloodstream of pregnant women and foetuses/newborns and their principle is type II hypersensitivity (cytotoxic), according to the Coombs and Gell classification. Severe forms of HDFN can lead to increased perinatal morbidity and mortality. Prevention of the development of RhD alloimmunization and severe forms of HDFN is based on the administration of polyclonal immunoglobulin (Ig) G anti-D in all potentially sensitizing events. It is assumed that the mechanism of anti-D IgG action is based on the rapid removal of the antigen by antibody overflow, and on antibody mediated immune suppression (AMIS). However, the exact immunological principle is not fully known yet. Conclusion: This article describes the development of irregular antibodies, methods of foetal erythrocytes destruction and the mechanism of prevention of anti-D immunoglobulin from the immunological point of view.

• MeSH
• Erythrocytes MeSH
• Erythroblastosis, Fetal * prevention & control   MeSH
• Isoantibodies * MeSH
• Rh-Hr Blood-Group System MeSH
• Humans MeSH
• Infant, Newborn MeSH
• Placenta MeSH
• Fetus MeSH
• Rho(D) Immune Globulin MeSH
• Pregnancy MeSH
• Check Tag
• Humans MeSH
• Infant, Newborn MeSH
• Pregnancy MeSH
• Female MeSH
• Publication type
• Review MeSH