Defekty imunity se často vyznačují kombinací nedostatečné kontroly infekce a zároveň autoimunitními projevy způsobenými reakcí organismu proti vlastním antigenům. Patogenetickým podkladem mohu být poruchy ve funkci T a B lymfocytů a špatná regulace jejich vzájemné spolupráce. V navrhovaném projektu plánujeme pomocí nejmodernějších technik mnohobarevné průtokové cytometrie (MC-FACS) a molekulární genetiky podrobně charakterizovat složení, aberace a vzájemné systémové vztahy fyziologických i patologických subpopulací lymfocytů u všech primárních imunodeficitů (PID) diagnostikovaných na zúčastněných pracovištích v průběhu řešení projektu a u souboru pacientů s běžným variabilním imunodeficitem (CVID) a selektivním deficitem IgA. Na základě bioinformatické analýzy výsledků MC-FACS od přibližně 150 pacientů bude vypracováno v součinnosti s mezinárodní skupinou EuroFlow-PID diagnostické schéma pro jednotky s již známou genetickou příčinou a budou vytipovány skupiny pacientů s podobným laboratorním a klinickým obrazem k celogenomové analýze a validaci vytipovaných nových variací.; Immune defects are often a combination of inadequate infection control and autoimmune phenomena caused by overreaction to autologous antigens. Underlying cause may be found at impaired function of T and B cells and improper regulation of their cooperation. In the proposed project, we will characterize composition, abnormalities and systemic relationships of normal and abnormal subsets of lymphocytes using cutting edge techniques of multi-color flow cytometry (MC-FACS) and molecular genetics in all primary immunodeficiency (PID) patients in both centers and in patients with Common Variable Immunodeficiency (CVID) and selective IgA deficiency. Bioinformatic analysis of standardized MC-FACS data from 150 patients will serve us to develop a diagnostic scheme together with EuroFlow PID international group for PIDs with established molecular genetic lesion. Furthermore, cases with commonalities in MC-FACS and clinical presentation will be investigated by whole exome sequencing to elucidate new genetic variations leading to PID.

• MeSH
• časná diagnóza MeSH
• genetické testování MeSH
• imunitní systém - jevy MeSH
• lymfocyty MeSH
• molekulární biologie MeSH
• primární imunodeficience diagnóza   MeSH
• průtoková cytometrie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Projekt je zaměřen na sledování aktivace granulocytů u nemocných s poruchami imunity – primární hypogamaglobulinémií - běžným variabilním imunodeficitem (CVID) a poruchou komplementového systému - hereditárním angioedémem (HAE). Budou sledovány znaky aktivace granulocytů na úrovni přítomnosti produktů buněk v plazmě, stejně jako exprese genů asociovaných s aktivací granulocytů na úrovni mRNA. Při využití průtokové cytometrie bude sledováno zastoupení MDCS (myelodid-derived suppressor cells). Pomocí kokultivačních pokusů s T-lymfocyty bude sledována supresorová aktivita MDSC na proliferaci lymfocytů a tvorbu cytokinů. Bude sledován i efekt podání intravenózního imunoglobulinu nemocným s CVID na přítomnost aktivačních produktů v plazmě, stejně jako přítomnost těchto produktů v plazmě nemocných s HAE v době ataky onemocnění. Průkaz aktivace myeloidníích buněk a různé následky této aktivace - vyjádřené aktivací imunitního systému nebo jeho supresí mohou pomoci rozpoznat možné mechanismy vedoucí ke komplikacím uvedených chorob, a to jak autoimunitních, tak i sekundárního imunodeficitu.; The project is focussed on monitoring the activation of granulocytes in patients with common variable immunodeficiency (CVID) and complement deficiency – hereditary angioedema (HAE). We will study the signs of granulocyte activation determined as presence of cell products in plasma, as well as the expression of genes associated with granulocyte activation at the mRNA level. Using flow cytometry, we will enumerate myeloid-derived suppressor cells (MDSC). The suppressor activity of MDSC on T-lymphocyte cytokine production will be determined using co-cultivation experiments. We will also study the effect of intravenous immunoglobulin administration in CVID patients on the levels of activation products in plasma; as well as the presence of these products in the plasma of HAE patients at the time of HAE attacks. Detection of activation of myeloid cells and the consequences of this activation, expressed by activation of the immune system or its suppression, may help to identify possible mechanisms leading to complications of those diseases, both autoimmune and secondary immunodeficiency.

• MeSH
• cytokiny MeSH
• exprese genu imunologie   MeSH
• granulocyty MeSH
• imunitní systém - jevy MeSH
• monocyty MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• syndromy imunologické nedostatečnosti MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

U pacientů s imunodeficiencí vyšetřeným v regionálních centrech (Praha a Brno) zavedeme v mezinárodní spolupráci s EuroFlow-PID jednotnou a optimalizovanou metodiku vyšetření podrobného imunofenotypu lymfocytů metodou mnohobarevné průtokové cytometrie (8-12 parametrů). Projekt povede ke zlepšení diagnostiky a klasifikace imunodeficiencí, především u vzácných typů onemocnění. Povede také k objevení patofysiologických mechanismů a mechanismů jež modifikují klinický průběh onemocnění (u primárních i sekundárních imunodeficiencí). Projekt je koncipován jako multicentrický, což povede jednak k pokrytí většiny imunodeficientních pacientů v ČR, jednak k maximálnímu uplatnění výsledků v praxi. Spolupráce s ÚMG AV ČR umožní odhalení patofysiologických mechanismů na detailní molekulární úrovni.; In international cooperation with EuroFlow PID, we will introduce uniform and optimized methodology for a detailed immunophenotyping of lymphocytes using multicolor flow cytometry (8-12 parameters) in patients with immunodeficiency, which are examinated in regional centers in Prague and Brno. The project will lead to improved diagnostics and classification of immunodeficiencies, particularly the rare types of these diseases, as well as to revealing of patophysiological mechanisms and mechanisms that modify the clinical progress of the primary and secondary immunodeficiencies. The project is designed as multicentric to cover the majority of immunodeficient patients in the Czech Republic and to reach the maximal application of the results in practice. Cooperation with Institute of Molecular Genetics of Academy of Science of the Czech Republic will allow detection of patophysiological mechanisms on detailed molecular level.

• MeSH
• algoritmy MeSH
• B-lymfocyty cytologie   MeSH
• běžná variabilní imunodeficience diagnóza   klasifikace   MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• T-lymfocyty cytologie   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

U pacientů s CVID, IgAD a IgMD budeme s využitím Ig-specifického RT-PCR na úrovni jedné buňky analyzovat somatické hypermutace, známky afinitní maturace, a izotypového přesmyku, schopnost proliferace a aktivace, stav BCR signalizace a diferenciační stadium v jednotlivých B lymfocytárních subpopulací před a po stimulaci IL-4, IL-21 a anti-CD40 v kombinaci s tetanovým toxoidem a pnemokokovým sacharidem. Bude vytvořena banka EBV-transformovaných B-lymfocytárních lini s cílem stanovit podíl B lymfocytů v patogenezi uvedených chorob. Očekávanými výstupy projektu jsou publikace v impaktovaném zahraničním vědeckém časopise, doplnění znalosti etiopatogeneze CVID a IgAD/IgMD, definování diferenciačního stadia studovaných subpopulací a kvality BCR signalizace, definice nových klasifikačních kritérií s cílem zlepšení diagnostiky a terapie ve smyslu nastavení konkrétní individuální imunoterapie pacientů (v souladu s prioritami Resortního programu výzkumu a vývoje MZ ČR).; The Ig-specific single-cell RT-PCR in B cells of patients with CVID, IgAD/IgMD will be used to analyze somatic hypermutation, affinity maturation/isotype switch, proliferation and activation, BCR signalling and differentiation stadium of B cell subsets before and after stimulation with IL-4, IL-21 and anti-CD40 together with tetanus toxoid/pneumococcal saccharide. The bank of EBV-transformed B-lymphocyte lines will be generated to address their contribution to the pathogenesis of mentioned diseases. Thepublication in peer-reviewed scientific journals, extension of knowledge on pathogenesis of these diseases, determination of differentiation stadium and BCR signalling in B cell subsets and new classification diagnostic criteria represent anticipated outputs. The improvement of diagnosis/ therapy leading to the selection of particular individual immunotherapy is the main focus of the study in accordance the priorites of declared ?Programme of Research and Development of the Czech Ministry of Health?.

• MeSH
• B-lymfocyty imunologie   MeSH
• běžná variabilní imunodeficience MeSH
• deficience IgA MeSH
• imunoglobulin M nedostatek   MeSH
• individualizovaná medicína MeSH
• průtoková cytometrie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

1. Vyšetření, kvantifikace a přesnější imunofenotypizace přechodových a nezralých (CD21-)B lymfocytů u nemocných s CVID a srovnání tohoto zastoupení s hodnotami zjištěnými u kontrolní skupiny. 2. Zjištění výskytu SHM v přestavěných Ig genech, respektiveprodukované Ig mRNA ve vztahu k jejímu izotypu, u transitorních a nezralých (CD21-)B buněk periferní krve pacientů s CVID a kontrol. Korelace stupně HSM ke klinickým parametrům a průběhu onemocnění. 3. Vyšetření zastoupení naivních, efektorových, efektorových paměťových a paměťových CD4+ a CD8+ T lymfocytů a jejich korelace s výše uvedenými B lymfocytárními subpopulacemi. 4. Korelace těchto údajů s relevantními klinickými parametry; 1. Examination, quantification and more precise immunophenotypization of transitional and immature (CD21-) B cells in patients with CVID and comparison of the found proportions with the control group. 2. Evaluation of SHM frequency in rearranged Ig genes, respectively in produced Ig mRNA with respect to its isotype, in peripheral blood transitional and immature (CD21-)B cells of CVID patients and controls. Correlation between the level of SHM and clinical parameters and the course of the disease. 3. Examination of the number of naive, effector and memory CD4+ and CD8+ T cells and its correlation with the above stated B cell subpopulations. 4. Correlation of these data with relevant clinical parameters.

• MeSH
• B-lymfocyty MeSH
• běžná variabilní imunodeficience MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• somatická hypermutace imunoglobulinových genů MeSH
• T-lymfocyty MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Projekt je zaměřen na zjištění klinické a laboratorní efektivity inosiplexu (Isoprisinu) jako imunostimulátoru u dětí s častými respiračními infekcemi. Metodikou je dvojitý slepý, placebem kontrolovaný pokus.

• MeSH
• adjuvancia imunologická terapeutické užití   MeSH
• infekce MeSH
• nemoci dýchací soustavy terapie   MeSH

• Konspekt
• Lékařské vědy. Lékařství
• NLK Obory
• pneumologie a ftizeologie
• pediatrie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Common variable immunodeficiency disorder (CVID) is the most common form of primary antibody immunodeficiency. Due to low antibody levels, CVID patients receive intravenous or subcutaneous immunoglobulin replacement therapy as treatment. CVID is associated with the chronic activation of granulocytes, including an increased percentage of low-density neutrophils (LDNs). In this study, we examined changes in the percentage of LDNs and the expression of their surface markers in 25 patients with CVID and 27 healthy donors (HD) after in vitro stimulation of whole blood using IVIg. An oxidative burst assay was used to assess the functionality of LDNs. CVID patients had increased both relative and absolute LDN counts with a higher proportion of mLDNs compared to iLDNs, distinguished based on the expression of CD10 and CD16. Immature LDNs in the CVID and HD groups had significantly reduced oxidative burst capacity compared to mature LDNs. Interestingly we observed reduced oxidative burst capacity, reduced expression of CD10 after stimulation of WB, and higher expression of PD-L1 in mature LDNs in CVID patients compared to HD cells. Our data indicate that that the functional characteristics of LDNs are closely linked to their developmental stage. The observed reduction in oxidative burst capacity in mLDNs in CVID patients could contribute to an increased susceptibility to recurrent bacterial infections among CVID patients.

• MeSH
• běžná variabilní imunodeficience * MeSH
• fenotyp MeSH
• lidé MeSH
• neutrofily * MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• respirační vzplanutí MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Severe combined immunodeficiency (SCID) screening je souhrnný název pro nástroj časné detekce řady závažných vrozených poruch imunity. Současná kvantifikace excizních DNA molekul TREC a KREC umožňuje časně diagnostikovat závažné buněčné i protilátkové vrozené defekty imunity. Do dvouletého pilotního programu screeningu se v letech 2022–2023 v České republice zapojilo > 90 % novorozenců (vyšetřeno bylo 198 675 vzorků). Diagnostikováni byli 2 pacienti se SCID na podkladě CD3 epsilon deficience a atypického kompletního DiGeorgova syndromu a dalších 17 pacientů s jinými vrozenými poruchami imunity, z toho 9 s agamaglobulinemií. U dvou pacientů se SCID umožnil screening časnou kauzální terapii, tj. transplantaci hematopoetických buněk / thymu, u non-SCID pacientů vedla časná znalost jejich diagnózy k zavedení adekvátních režimových a profylaktických opatření za účelem snížení jejich následné morbidity. Od 1. ledna 2024 byl screening závažných vrozených poruch imunity spolu se spinální muskulární atrofií integrován do celoplošného novorozeneckého laboratorního screeningu.

Severe Combined Immunodeficiency (SCID) screening is a collective term for an early detection tool for a range of serious inborn errors of immunity. The quantification of excision DNA molecules TREC and KREC allows for early diagnosis of severe cellular and antibody immune defects. The recently concluded Czech pilot screening program (2022-2023) included over 90% of newborns (with 198,675 samples examined). Two patients with SCID were diagnosed based on CD3 epsilon deficiency and atypical complete DiGeorge syndrome, and another 17 patients were found to have other inborn errors of immunity, including 9 agammaglobulinemia. Screening enabled early causal therapy, i.e., hematopoietic cell/thymus transplantation, for two SCID patients, while early diagnosis in non-SCID patients led to the implementation of appropriate regimen and prophylactic measures to reduce subsequent morbidity. As of January 1, 2024, screening for severe inborn errors of immunity, along with screening for spinal muscular atrophy, becomes integral part of the national laboratory newborn screening program.

• MeSH
• agamaglobulinemie diagnóza   farmakoterapie   genetika   MeSH
• kojenec MeSH
• kombinovaná protilátková terapie terapeutické užití   MeSH
• lidé MeSH
• novorozenecký screening MeSH
• předškolní dítě MeSH
• primární imunodeficience * diagnóza   genetika   terapie   MeSH
• těžká kombinovaná imunodeficience diagnóza   genetika   terapie   MeSH
• thymus abnormality   patologie   MeSH
• transplantace hematopoetických kmenových buněk metody   MeSH
• transplantace orgánů MeSH
• Check Tag
• kojenec MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• předškolní dítě MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

BACKGROUND: RTX, an anti-CD20 monoclonal antibody, added to chemotherapy has proven to be effective in children and adolescents with high-grade, high-risk and matured non-Hodgkin lymphoma. RTX leads to prompt CD19+ B lymphocyte depletion. However, despite preserved immunoglobulin production by long-lived plasmablasts after treatment, patients remain at risk of prolonged hypogammaglobulinemia. Further, there are few general guidelines for immunology laboratories and clinical feature monitoring after B cell-targeted therapies. The aim of this paper is to describe B cell reconstitution and immunoglobulin levels after pediatric B-NHL protocols, that included a single RTX dose and to review the literature. METHODS: A retrospective single-center study on the impact of a single RTX dose included in a chemotherapeutic pediatric B Non-Hodgkin Lymphoma (B-NHL) treatment protocols. Immunology laboratory and clinical features were evaluated over an eight hundred days follow-up (FU) period, after completing B-NHL treatment. RESULTS: Nineteen patients (fifteen Burkitt lymphoma, three Diffuse large B cell lymphoma, and one Marginal zone B cell lymphoma) fulfilled the inclusion criteria. Initiation of B cell subset reconstitution occurred a median of three months after B-NHL treatment. Naïve and transitional B cells declined over the FU in contrast to the marginal zone and the switched memory B cell increase. The percentage of patients with IgG, IgA, and IgM hypogammaglobulinemia declined consistently over the FU. Prolonged IgG hypogammaglobulinemia was detectable in 9%, IgM in 13%, and IgA in 25%. All revaccinated patients responded to protein-based vaccines by specific IgG antibody production increase. Following antibiotic prophylaxes, none of the patients with hypogammaglobulinemia manifested with either a severe or opportunistic infection course. CONCLUSION: The addition of a single RTX dose to the chemotherapeutic treatment protocols was not shown to increase the risk of developing secondary antibody deficiency in B-NHL pediatric patients. Observed prolonged hypogammaglobulinemia remained clinically silent. However interdisciplinary agreement on regular long-term immunology FU after anti-CD20 agent treatment is required.

• MeSH
• B-buněčný lymfom farmakoterapie   imunologie   MeSH
• dítě MeSH
• imunoglobuliny aplikace a dávkování   MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• nehodgkinský lymfom farmakoterapie   imunologie   MeSH
• podskupiny B-lymfocytů imunologie   účinky léků   MeSH
• předškolní dítě MeSH
• protinádorové látky imunologicky aktivní aplikace a dávkování   terapeutické užití   MeSH
• protokoly antitumorózní kombinované chemoterapie terapeutické užití   MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• rituximab * terapeutické užití   aplikace a dávkování   MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• předškolní dítě MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• přehledy MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH