Cíl práce: Cílem předkládaného projektu bylo zmapovat situaci stran invazivních kvasinkových infekcí na vybraných hematoonkologických odděleních České a Slovenské republiky a porovnat citlivost získaných izolátů k vybraným antimykotikům. Materiál a metody: V období 1. 3. 2009–31. 10. 2010 byly sbírány kmeny z potenciálně závažných klinických materiálů od pacientů s hematologickou malignitou. Každý izolát byl biochemicky určen a byla stanovena jeho in vitro citlivost k echinokandinům, amfotericinu B a vybraným azolům metodou Etest. Současně byla shromažďována relevantní klinická data. Výsledky: Do studie bylo zařazeno 63 izolátů od 61 pacientů. Mezi izolovanými druhy kvasinek převládala C. albicans a C. glabrata (28, resp. 19 %), což odpovídá světově publikovaným datům. Nicméně při vyloučení izolátů z bronchoalveolární tekutiny (BAT) se procentuální zastoupení změnilo ve prospěch C. albicans a C. parapsilosis (25, resp. 17 %). Získaná data o minimální inhibiční koncentraci svědčí o dobré citlivosti kvasinek k echinokandinům a amfotericinu B, 10 (16 %) kmenů vykazovalo zkříženou rezistenci k azolům (ve většině případů se jednalo o C. glabrata). Závěr: Invazivní kvasinkové infekce nejsou častou infekční komplikací u pacientů s hematologickou malignitou v České a Slovenské republice a druhové spektrum původců je u nás podobné, jako je ve světě. Léčbu je zejména u těchto nemocných výhodné opřít o in vitro citlivost kandid k antimykotikům.

Background: The aim of our study was to analyze the spectrum and characteristic of invasive candidiasis in selected haematological departments in the Czech and Slovak Republics, and to compare minimum inhibitory concentrations (MIC) of some antifungal agents for isolates obtained. Material and methods: Between 1 March 2009 and 31 October 2010, Candida strains from clinically important material obtained from patients with haematological malignancies were collected. Each isolate was biochemically identified and tested for in vitro susceptibility to three known echinocandins and amphotericin B and selected azoles using the E-test. Relevant clinical data were collected. Results: The study included 63 isolates from 61 patients. The most frequently isolated species were C. albicans and C. glabrata (28 % and 19 %, respectively). However, after exclusion of isolates from bronchoalveolar lavage fluid, the percentage changed in favour of C. albicans and C. parapsilosis (25 % and 17 %, respectively). The MIC data showed a high susceptibility of yeasts to echinocandins and amphotericin B. Ten (16 %) strains were cross-resistant to azoles (mostly C. glabrata). Conclusion: Invasive candidiasis is not frequent infection complication in patients with haematological malignancies in the Czech Republic and Slovakia. Moreover, the spectrum of pathogens was similar to that described in recent international studies. However, identification of susceptible and resistant strains according to MIC could be beneficial for choice of antifungal treatment.

• Klíčová slova
• hematoonkologičtí pacienti, minimální inhibiční koncentrace,
• MeSH
• antifungální látky terapeutické užití   MeSH
• Candida účinky léků   MeSH
• hematologické nádory mikrobiologie   MeSH
• kandidóza farmakoterapie   komplikace   MeSH
• lidé MeSH
• mikrobiální testy citlivosti MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Předmětem výzkumu je zhodnocení využití nekultivačních diagnostických metod (sérologických a molekulárně biologických) v tekutině získané bronchoalveolární laváží pro časnou diagnostiku invazivní aspergilózy a zygomykózy u hematoonkologických nemocných srozvojem plicních infiltrátů na zobrazovacích metodách. Pro diagnostiku invazivní aspergilózy bude využita detekce galaktomananu, 1,3-ß-D glukanu a PCR. Pro diagnostiku invazivní zygomykózy pak specifické polymerázové řetězové reakce. Výsledky výzkumu umožní zpřesnění a zkrácení doby do podání specifické antimykotické léčby.; This study is focused on the assessment of contribution of non-culture (serological and molecular biological) diagnostic methods for early diagnostics of invasive aspergillosis and zygomycosis from bronchoalveolar lavage fluid in hematooncological patients with progression of lung infiltrates. Detection of galactomannan, 1,3-ß-D glucan and specific PCR assay will be used for diagnostics of invasive aspergillosis. Zygomycetes will be detected by PCR. Results of the study should lead to the earlier startof effective antifungal therapy.

• MeSH
• aspergilóza diagnóza   farmakoterapie   MeSH
• beta-glukany analýza   MeSH
• bronchoalveolární laváž MeSH
• hematologické nádory komplikace   MeSH
• mannany analýza   MeSH
• oportunní infekce diagnóza   terapie   MeSH
• počítačová rentgenová tomografie MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• sérologické testy MeSH
• zygomykóza diagnóza   farmakoterapie   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• hematologie a transfuzní lékařství
• mikrobiologie, lékařská mikrobiologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Voriconazole and posaconazole are azole broadspectrum pharmaceuticals used in treatment and prophylaxis of invasive fungal infections. Determination of both the antifungals in blood plasma in the course of treatment makes it possible to achieve optimal dosing. Our aim was to integrate voriconazole and posaconazole monitoring in the treatment of fungal infections in hematooncological patients. At present the simple and rapid ultra performance liquid chromatography (UPLC) monitoring of both the antifungal is a part of daily routine.

• MeSH
• antifungální látky terapeutické užití   MeSH
• autoimunitní nemoci MeSH
• financování organizované MeSH
• lidé MeSH
• monitorování léčiv metody   MeSH
• triazoly analýza   krev   MeSH
• vysokoúčinná kapalinová chromatografie MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Klíčová slova
• mikrobiologická diagnostika,
• MeSH
• aspergilóza diagnóza   MeSH
• financování organizované MeSH
• Fusarium izolace a purifikace   patogenita   MeSH
• invazivní mykotické infekce MeSH
• lidé MeSH
• mykologické určovací techniky metody   MeSH
• mykózy diagnóza   MeSH
• oportunní infekce diagnóza   MeSH
• Scedosporium izolace a purifikace   patogenita   MeSH
• zygomykóza diagnóza   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

We have evaluated the contribution of the 1,3-beta-d-glucan (BG) assay for the screening of invasive fungal infections (IFIs) in patients with haematological malignancies. Serum samples from patients at risk of IFI were collected twice a week and retrospectively tested using the BG assay. BG screening was performed on 1143 samples from 91 patients during 104 anticancer treatment cycles. Proven and probable cases of IFI occurred in 9 (8.7 %) treatment cycles. Depending on the criterion of positivity used (1x >60 pg ml(-1), 1x >80 pg ml(-1), 2x >60 pg ml(-1) or 2x >80 pg ml(-1)) the sensitivity and specificity were 89, 89, 67 and 44 %, and 20, 48, 33 and 56 %, respectively. Although the test was marked as positive in 82, 68, 54 and 45 % of all the treatment cycles, in the majority of cases, these positivities were probably false. The major limit of the BG test was an extremely low positive predictive value (10 to 12 %). We have analysed mucositis, candida colonization, bacteraemia, use of antimicrobials, erythrocyte and thrombocyte filtered blood products, collecting tubes or sampling via venous catheters. Even though no factor is a major source of BG, it could at least partially influence BG assay performance. Thus, BG detection has a limited usefulness as a screening method for IFIs in patients with haematological malignancies.

• MeSH
• beta-glukany krev   MeSH
• hematologické nádory komplikace   farmakoterapie   MeSH
• imunoanalýza MeSH
• imunokompromitovaný pacient MeSH
• lidé MeSH
• mykózy krev   diagnóza   imunologie   MeSH
• oportunní infekce chemicky indukované   diagnóza   MeSH
• prediktivní hodnota testů MeSH
• protinádorové látky škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

• MeSH
• financování organizované MeSH
• lidé MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   MeSH
• Rhizopus patogenita   MeSH
• zygomykóza diagnóza   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

We developed and assessed the diagnostic value of a novel quantitative nested real-time (QNRT) PCR assay targeting the internal transcribed spacer region of ribosomal DNA (rDNA) in a guinea pig model of invasive pulmonary aspergillosis. Groups of 5 immunosuppressed animals that were infected using an aerosol chamber with Aspergillus fumigatus conidia were humanely terminated 1 h postinoculation and at days 3, 5, 7, and 11 postchallenge, and lung tissue, bronchoalveolar lavage (BAL) fluid, whole blood, and serum samples were collected. The QNRT PCR results obtained with the serum and BAL fluid were compared to those achieved with galactomannan and (1→3)-β-d-glucan assays. High fungal burden levels were detected by QNRT PCR in both lung tissue and BAL fluid in all infected animals at each time point, and the sensitivity of each assay in BAL fluid was 100% by day 3 and remained so through the remainder of the study. The sensitivity of detection of fungi in whole blood and serum samples was significantly lower, and some samples remained negative by all three assays despite the advanced stage of the infection. From these data, we can conclude that this novel QNRT PCR method was highly sensitive for the detection of A. fumigatus from different types of samples in this model. In addition, BAL fluid samples appeared to be the most suitable for the early diagnosis of invasive pulmonary aspergillosis. When testing serum, the use of a combination of available assays may increase the possibility of early detection of this opportunistic mycosis.

• MeSH
• Aspergillus fumigatus izolace a purifikace   MeSH
• beta-glukany analýza   MeSH
• bronchoalveolární lavážní tekutina mikrobiologie   MeSH
• DNA fungální genetika   MeSH
• invazivní plicní aspergilóza mikrobiologie   patologie   MeSH
• kvantitativní polymerázová řetězová reakce metody   MeSH
• mannany analýza   MeSH
• mezerníky ribozomální DNA genetika   MeSH
• modely nemocí na zvířatech MeSH
• morčata MeSH
• mykologie metody   MeSH
• plíce mikrobiologie   MeSH
• počet mikrobiálních kolonií metody   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• morčata MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• hodnotící studie MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• Research Support, N.I.H., Extramural MeSH
• srovnávací studie MeSH

The objective of this retrospective study was to evaluate results from voriconazole therapeutic drug monitoring (TDM) in haematological patients in routine clinical practice. Between 2005 and 2010, 1228 blood samples were obtained from 264 haematological patients (median 3 samples/patient; range 1-27) receiving voriconazole for targeted/preemptive treatment of invasive aspergillosis (IA) (46.3% of samples), empirical therapy (12.9%) or prophylaxis (40.8%). A high-pressure liquid chromatography assay was used to analyse voriconazole concentrations. Clinical and laboratory data were analysed retrospectively. The median of the detected voriconazole plasma concentration was 1.00 μg ml(-1) (range <0.20-13.47 μg ml(-1)). Significant inter- and intra-patients variability of measured concentrations (81.9% and 50.5%) were identified. With the exception of omeprazole administration, there was no relevant relationship between measured voriconazole concentrations and drug dose, route administration, age, gender, CYP2C19*2 genotype, gastrointestinal tract abnormality, administration via nasogastric tube, serum creatinine, and liver enzymes. However, per patient analysis identified significant role of individual voriconazole dose and drug form change on measured plasma concentration. Measured voriconazole concentrations did not correlate with the treatment outcome of patients with IA. We only identified a limited number of adverse events related to voriconazole therapy; however, the median plasma concentration was not different from concentrations measured in samples without reported toxicity. Our retrospective study has suggested that routine monitoring of voriconazole plasma concentrations has probably only a limited role in daily haematological practice.

• MeSH
• antifungální látky aplikace a dávkování   škodlivé účinky   krev   MeSH
• aromatické hydroxylasy genetika   MeSH
• aspergilóza komplikace   farmakoterapie   genetika   MeSH
• dospělí MeSH
• jednonukleotidový polymorfismus MeSH
• krevní nemoci komplikace   farmakoterapie   genetika   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mladý dospělý MeSH
• monitorování léčiv * MeSH
• pyrimidiny aplikace a dávkování   škodlivé účinky   krev   MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• senioři MeSH
• triazoly aplikace a dávkování   škodlivé účinky   krev   MeSH
• výsledek terapie MeSH
• vztah mezi dávkou a účinkem léčiva MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mladý dospělý MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

BACKGROUND: We evaluated the performance of a galactomannan (GM) assay in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid compared to serum samples for the diagnosis of invasive pulmonary aspergillosis (IPA) in patients with hematological diseases. METHODS: Two hundred and fifty-five bronchoscopies were performed on 230 patients. Bronchial and alveolar samples from BAL fluid as well as serum samples were analyzed in the GM assay. RESULTS: Twenty-eight cases of IPA (11%) were diagnosed. The sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value of the GM assay using a cut-off of 0.5 were 57.1%, 99.3%, 94.1%, and 92.5%, respectively, for the alveolar sample; 44.0%, 99.3%, 91.7%, and 91.4%, respectively, for the bronchial sample; and 60.7%, 100%, 100%, and 92.9%, respectively, for serum. The highest sensitivity (78.6%) with good specificity (98.6%) was obtained with a 'triple detection' of GM in bronchial, alveolar, and serum samples. Neutropenia and antifungal therapy for only 24h increased the sensitivity, while antifungal treatment for ≥ 2 days decreased assay performance. Moreover, a trend towards a higher volume of aspirated fluid in GM-negative BAL (p=0.092) was observed. CONCLUSIONS: In contrast to recently published data, we found only moderate sensitivity, but high specificity and high positive predictive value of the detection of GM in BAL fluid. In addition, neutropenia, antifungal therapy, and BAL standardization affected GM assay performance.

• MeSH
• antifungální látky škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• Aspergillus chemie   izolace a purifikace   MeSH
• bronchoalveolární lavážní tekutina chemie   MeSH
• bronchoskopie MeSH
• dospělí MeSH
• hematologické nádory komplikace   MeSH
• invazivní plicní aspergilóza diagnóza   farmakoterapie   mikrobiologie   MeSH
• kohortové studie MeSH
• krevní nemoci komplikace   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mannany analýza   krev   MeSH
• mladiství MeSH
• mladý dospělý MeSH
• neutropenie komplikace   MeSH
• prediktivní hodnota testů MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• senioři MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mladý dospělý MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH