Polymerasová řetězová reakce (PCR) je metoda používaná pro namnožení specifického úseku DNA. Pro své vlastnosti se stala tato technika oblíbenou a v praxi hojně používanou metodou. V současné době rozlišujeme tři generace PCR – tradiční PCR (I. generace), kvantitativní PCR s fluorescenční detekcí v reálném čase – qPCR (II. generace) a digitální PCR – dPCR (III. generace). dPCR je robustní a citlivá metoda, díky čemuž nachází uplatnění v mnoha oblastech jako je mikrobiologie, analýza potravin, onkologie apod. Využívá se především pro absolutní kvantifikaci a/nebo detekci vzácných cílů. Její výhodou je, v porovnání s qPCR, přesnější kvantifikace nezávislá na počtu amplifikačních cyklů a kalibrační křivce.

Polymerase chain reaction (PCR) is a technique used to amplify a specific DNA segment. For its qualities, this technique has become popular and widely used method in practise. Nowaday, we distinguish three generations of PCR – traditional PCR (1st Generation), quantitative PCR with fluorescence detection – qPCR (2nd generation) and digital PCR – dPCR (3rd generation). dPCR is robust and sensitive method, which is applied in many fields such as microbiology, food analysis, oncology, etc. It is mainly used for absolute quantification and / or detection of rare targets. Its advantage, in comparison to qPCR, is more precise quantification independent of the number of amplification cycles and the calibration curve.

• Klíčová slova
• digitální PCR,
• MeSH
• DNA MeSH
• kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
• multiplexová polymerázová řetězová reakce metody   MeSH
• polymerázová řetězová reakce klasifikace   metody   MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• techniky amplifikace nukleových kyselin MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

• MeSH
• amplifikace genu MeSH
• DNA izolace a purifikace   MeSH
• rekombinantní DNA MeSH

• MeSH
• amplifikace genu MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   trendy   MeSH
• Publikační typ
• monografie MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie

Multiplex PCR is one of the many variants routinely performed by polymerase chain reaction (PCR). Its advantage is especially rapid detection of a large number of products in one reaction using multiple primer sets. Optimization of the multiplex PCR protocol is important also for genes of metallothionein isoforms, so that we can carry out the amplification of more than one DNA sequence. Necessary part of this proces is the adjustments in temperature during the reaction steps and also intervention with the changes in the concentration of individual reagents and different combinations or the amount of each primer.

• MeSH
• DNA primery MeSH
• metalothionein genetika   MeSH
• multiplexová polymerázová řetězová reakce * metody   MeSH
• polymerázová řetězová reakce dějiny   metody   MeSH
• protein - isoformy genetika   MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

• MeSH
• klinické laboratorní techniky MeSH
• molekulární biologie MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• Publikační typ
• monografie MeSH

• Konspekt
• Biologické vědy
• NLK Obory
• biologie

• MeSH
• alely MeSH
• amplifikace genu normy   MeSH
• lidé MeSH
• mitochondriální DNA analýza   genetika   MeSH
• mutační analýza DNA metody   normy   MeSH
• prediktivní hodnota testů MeSH
• techniky amplifikace nukleových kyselin MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Klíčová slova
• PCR,
• MeSH
• amplifikace genu MeSH
• klinické laboratorní techniky MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie

• MeSH
• amplifikace genu MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   využití   MeSH
• Publikační typ
• periodika MeSH

• Konspekt
• Obecná genetika. Obecná cytogenetika. Evoluce
• NLK Obory
• genetika, lékařská genetika
• biologie

Enzymatic synthesis of short (10-22 nt) base-modified oligonucleotides (ONs) was developed by nicking enzyme amplification reaction (NEAR) using Vent(exo-) polymerase, Nt.BstNBI nicking endonuclease, and a modified deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) derivative. The scope and limitations of the methodology in terms of different nucleobases, length, sequences, and modifications has been thoroughly studied. The methodology including isolation of the modified ONs was scaled up to nanomolar amounts and the modified ONs were successfully used as primers in primer extension and PCR. Two simple and efficient methods for fluorescent labeling of the PCR products were developed, based either on direct fluorescent labeling of primers or on NEAR synthesis of ethynylated primers, PCR, and final click labeling with fluorescent azides.

• MeSH
• azidy chemie   MeSH
• click chemie MeSH
• deoxyribonukleotidy chemická syntéza   chemie   metabolismus   MeSH
• DNA primery biosyntéza   genetika   MeSH
• endonukleasy metabolismus   MeSH
• fluorescenční barviva chemie   MeSH
• molekulární struktura MeSH
• oligonukleotidy biosyntéza   MeSH
• polymerázová řetězová reakce * MeSH
• techniky amplifikace nukleových kyselin * MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

• MeSH
• amplifikace genu MeSH
• antrax diagnóza   imunologie   MeSH
• DNA bakterií genetika   MeSH
• dospělí MeSH
• fluorescence MeSH
• lidé MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   přístrojové vybavení   MeSH
• zdroje nemoci MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH
• přehledy MeSH
• Geografické názvy
• Slovenská republika MeSH