• MeSH
• adenosin * analogy a deriváty   farmakologie   metabolismus   MeSH
• adhezivita trombocytů účinky léků   MeSH
• agregace trombocytů účinky léků   MeSH
• biomedicínský výzkum MeSH
• farmakologie metody   trendy   MeSH
• fosfodiesterasy farmakologie   účinky léků   MeSH
• inhibitory agregace trombocytů * aplikace a dávkování   škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• isochinoliny * aplikace a dávkování   farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• kolagen farmakologie   účinky léků   MeSH
• lidé MeSH
• papaverin analogy a deriváty   aplikace a dávkování   terapeutické užití   MeSH
• statistika jako téma MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• MeSH
• antikoagulancia aplikace a dávkování   MeSH
• hemokoagulace účinky léků   MeSH
• hemostáza účinky léků   MeSH
• hodnocení léčiv MeSH
• lidé MeSH
• propionáty MeSH
• trombocyty účinky léků   ultrastruktura   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• MeSH
• antiflogistika MeSH
• antikoagulancia MeSH
• experimentální nádory MeSH
• experimenty na zvířatech MeSH
• křečci praví MeSH
• metastázy nádorů MeSH
• propionáty MeSH
• Check Tag
• křečci praví MeSH

• MeSH
• adenosindifosfát MeSH
• benzamidiny MeSH
• benzylaminy MeSH
• kolagen MeSH
• krev MeSH
• lidé * MeSH
• trombin MeSH
• trombocyty * MeSH
• Check Tag
• lidé * MeSH

• MeSH
• adenosindifosfát MeSH
• dikumarol * analogy a deriváty   MeSH
• králíci MeSH
• krev MeSH
• trombocyty * MeSH
• trombóza MeSH
• Check Tag
• králíci MeSH

Autorka se zaměřila na destičkové faktory z alfa granulí trombocytů, konkrétně PDGF, IGF 1, TGF a VEGF. Trombocyty byly nejprve destruovány termodestrukcí, aby se faktory vyplavily do plazmy. Plazma byla defibrinovaná tepelně, čímž došlo jak k vysrážení koagulačních faktorů, tak k inaktivaci komplementu. Po centrifugaci byl destičkový lyzát přetlačen plazmaextraktorem do ozařovacího vaku. Byl přidán roztok Riboflavinu a destičkový lyzát byl virově a bakteriálně inaktivován systémem Mirasol. Konečný roztok byl lyofilizován. Autorka validovala každý kritický výrobní krok. Destičkové faktory byly měřeny na začátku procesu, po mikrobiální inaktivaci a po lyofilizaci. Výrobní proces neměl významný vliv na hladinu destičkových faktorů. Toto zjištění je zásadní pro další využití destičkového lyzátu.

The author focused on factors from platelet alpha granules, specifically the PDGF, IGF-1, a VEGF and TGF. Platelets were first broken by deep frozen that had washed factors into the plasma. Plasma was heat-treated, thereby leading to precipitation of coagulation factors, as well as to inactivate the complement. After centrifugation platelet lysate was pushed to the bag. Riboflavin solution was added and platelet lysate was viral and bacterial inactivated by Mirasol system. The final solution was freeze-dried. The author of validated each critical step. Platelet factors were measured at the beginning of the process, following the inactivation of microbial and after freeze-dried. The production process had not a significant impact on the level of platelet factors. This finding is crucial for the other using of platelet lysate.

• MeSH
• dárci krve MeSH
• destičkový růstový faktor * MeSH
• imunoanalýza * metody   MeSH
• imunochemie MeSH
• insulinu podobný růstový faktor I analýza   MeSH
• klinické laboratorní techniky MeSH
• lidé MeSH
• luminiscenční měření metody   MeSH
• lyofilizace * MeSH
• plazma bohatá na destičky * MeSH
• separace krevních složek MeSH
• transformující růstové faktory MeSH
• trombocyty * chemie   metabolismus   MeSH
• vaskulární endoteliální růstové faktory MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

BACKGROUND: A product with well-preserved haemostatic function of platelets is the ultimate goal of platelet concentrate production. However, platelet activation and apoptosis are induced by both collection and storage of platelet concentrates. AIM OF STUDY: Platelet concentrates obtained either by two blood separators with different technology of apheresis (Haemonetics MCS+, Haemonetics Corp. Braintree, USA and Trima Accel, Gambro BCT Inc., Lakewood, USA, respectively) or derived from buffy-coat were compared using evaluation of pH, LDH, lactate, glucose, annexin V, and sP-selectin levels immediately after collecting and at the end of expiration to estimate the differences in the activation and apoptosis of platelets in these products. RESULTS: The lowest degree of platelet activation was found in products obtained by Haemonetics MCS+ apparatus at the time of collection. Platelet concentrates obtained by apheresis revealed higher rise of LDH, annexin V and sP-selectin compared to buffy-coat derived platelets. Products from Haemonetics MCS+ showed higher rise of annexin V in comparison with products from Trima separator. Increase of LDH and sP-selectin in both apheresis products was comparable. CONCLUSIONS: On the basis of changes of sP-selectin and annexin V levels it could be concluded that initial platelet activation, which is induced by apheresis, is very likely without any further impact on quality of platelets during storage. Development of platelet storage lesions is influenced especially by storage conditions and platelet concentration in products.

• MeSH
• aktivace trombocytů fyziologie   MeSH
• apoptóza fyziologie   MeSH
• biologické markery krev   MeSH
• dárci krve MeSH
• dospělí MeSH
• financování organizované MeSH
• konzervace krve MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• počet trombocytů MeSH
• prospektivní studie MeSH
• referenční hodnoty MeSH
• reprodukovatelnost výsledků MeSH
• separace buněk metody   přístrojové vybavení   MeSH
• separace krevních složek metody   přístrojové vybavení   MeSH
• trombocyty fyziologie   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• hodnotící studie MeSH
• srovnávací studie MeSH

Hlavní nevýhodou běžně používaných nativních trombocytů je krátká doba použití, která obvykle nepřesahuje 5 dní. Může tak docházet k jejich omezené dostupnosti. Kryokonzervace trombocytů umožňuje prodloužení doby skladování trombocytových transfuzních přípravků až na 2 roky, pokud jsou uchovávány při teplotě –80 °C. Fakultní nemocnice Brno zavedla metodu kryokonzervace trombocytů při –80 °C v 5–6% roztoku dimethylsulfoxidu. K mražení jsou využívány směsné trombocyty z buffy-coatu krevní skupiny 0, které jsou po rozmražení rekonstituovány pomocí náhradního roztoku SSP+. Autoři předkládají výsledky srovnávací studie kryokonzervovaných a nativních trombocytů, která předcházela uvedení nových produktů do klinické praxe. Byly hodnoceny tyto parametry: obsah a koncentrace trombocytů, pH, objem, ztráta trombocytů během mražení, obsah dimethylsulfoxidu, obsah reziduální plazmy, obsah celkového proteinu, titr AB0 protilátek a swirling. Viskoelastické vlastnosti byly měřeny rotační tromboelastografií a obsah trombocytárních mikropartikulí byl stanoven pomocí průtokového cytometru. Vyrobené kryokonzervované trombocyty dosahují předepsaných kvalitativních parametrů a zachovávají si průměrně 83,6 % původního obsahu trombocytů. Zanedbatelný obsah reziduální plazmy vede k nízkému obsahu celkové bílkoviny (0,3 g/terapeutickou dávku) a k velmi nízkému titru AB0 protilátek (0–2). Kryokonzervované trombocyty krevní skupiny 0 rekonstituované pomocí SSP+ lze proto považovat za AB0 univerzální produkty, a to i pro klinické stavy, při kterých jsou vyžadovány promyté trombocyty. Kryokonzervované trombocyty vykazují zkrácení doby vzniku koagula a 25× vyšší obsah trombocytárních mikropartikulí ve srovnání s nativními krevními destičkami. Tyto vlastnosti spolu s dlouhou dobou použitelnosti předurčují využití kryokonzervovaných trombocytů zejména v urgentních stavech provázených masivním krvácením.

The main disadvantage of fresh platelets is their short shelf life, usually 5 days, which can result in their restricted availability. Platelet cryopreservation extends shelf life up to 2 years when stored at a temperature of –80 °C. University Hospital Brno has implemented a method of platelet freezing at –80 °C in 5–6% dimethyl sulfoxide. Buffy-coat-derived leucodepleted blood group 0 fresh platelets are used for cryopreservation and reconstituted in platelet additive solution SSP+ after thawing. The authors present the results of a comparative study of cryopreserved and fresh buffy-coat-derived leucodepleted platelets going prior to clinical application. The following parameters were determined: platelet count and concentration, pH, volume, platelet loss, dimethyl sulfoxide content, plasma content, total protein content, ABO antibody titre and swirling. Viscoelastic properties were evaluated via rotational thromboelastometry and platelet microparticle numbers were measured by flow cytometry. Cryopreserved platelets met the required quality parameters and maintained an 83.6% pre-freeze platelet count. The very low plasma content resulted in a low total protein content (0.3 g/unit) and very low ABO antibody titre (0–2). Cryopreserved blood group O platelets reconstituted in SSP+ may thus be considered to be universal ABO products, even in clinical situations where washed platelets are required. Cryopreserved platelets showed faster clot initiation and the number of platelets microparticles increased 25 times compared to fresh platelets. These properties and the long shelf life predestine the use of cryopreserved platelets in urgent situations involving massive bleeding.

• Klíčová slova
• kryokonzervované trombocyty, směsné trombocyty, náhradní roztok pro trombocyty,
• MeSH
• dimethylsulfoxid MeSH
• konzervace krve * metody   MeSH
• kryoprezervace metody   MeSH
• lidé MeSH
• trombocyty MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Úvod: Cílem studie bylo porovnat markery buněčného poškození a aktivace trombocytů směsných trombocytových transfuzních přípravků vyrobených z buffy-coatu během skladování ve dvou aditivních roztocích a připravených do dvou různých souprav. Aditivní roztoky snižují riziko potransfuzních reakcí způsobených plazmou a zachovávají plazmu pro klinické použití nebo frakcionaci. Materiál a metoda: Trombocytové transfuzní přípravky byly vyrobeny smísením čtyř buffy-coatů a resuspendovány v jednom ze dvou aditivních roztoků (Composol, Fresenius – Kabi; T-Sol, Baxter Corp.) v poměru 70 % aditivní roztok a 30 % plazma. Pro smísení byly použity dvě různé soupravy (R4R7036, Fenwal; Autostop, Pall Corp.). V den skladování 0 a 5 byly odebírány vzorky pro laboratorní vyšetření a testován počet trombocytů v přípravcích, hodnota pH, obsah glukózy, laktátu a sP-selektinu. K hodnocení jsme použili dvouvýběrový t-test, párový test, Pearsonův korelační koeficient. Statistická významnost byla posouzena na hladině p < 0,05. Výsledky: Počet trombocytů byl vyšší než 2 x 1011/T.U. ve všech přípravcích. Během pětidenního skladování byl prokázán statisticky významný pokles obsahu trombocytů u všech typů směsí. Na konci skladování byla hodnota pH byla vyšší než 6,8 u všech typů přípravků. Konsumpce glukózy a produkce laktátu byla statisticky významná u všech porovnávaných přípravků, přičemž produkce laktátu a konsumpce glukózy byla vyšší u trombocytových transfuzních přípravků v roztoku T-Sol než v roztoku Composol a odpovídala poklesu pH. Byl prokázán i vliv použité soupravy na aktivaci trombocytů. Závěr: Vývoj markerů buněčného poškození trombocytů v transfuzních přípravcích byl ovlivněn zejména použitým skladovacím roztokem, použité soupravy ovlivňovaly stav aktivace trombocytu.

Background: The aim of the study was to compare markers of cell damage and platelet activation of buffy-coat derived platelet concentrates (PCs) during storage in two types of additive solutions (PASs) in two different storage bags. PASs reduce plasma-associated transfusion reactions and conserve plasma for transfusion or fractionation. Materials and Methods: PCs were prepared from leukocyte-depleted pools of four buffy-coats (BCPs) suspended in one of 70% PASs: 30% plasma (Composol, Fresenius - Kabi; T-Sol, Baxter Corp.). Two different storage bags were used (R4R7036, Fenwal; Autostop, Pall Corp.). On the days 0 and 5 of storage samples were tested for PLT concentration, pH, glucose, lactate and sP-Selectin. Data were analyzed by analysis with two-sample t-tests, paired test and Pearson correlation coefficient. Statistical significance was assessed at p <0.05. Results: PLT yields were higher then 2x1011platelets/unit in all of PCs. There was the significant decrease of platelet concentration during storage for 5 days in all bags or media. The pH of all PCs was 6.8 on the 5th day of storage. Glucose consumption and lactate production in all types of bags and media were significantly different during storage. Lactate production and glucose consumption in T-Sol were higher than those items in Composol and they resulted in lower pH values. We showed the influence of storage bags for platelet activation, too. Conclusion: The development of markers of cell damage in PCs was influenced mainly by used platelet storage solution, platelet storage bags affected the status of platelet activation.

• Klíčová slova
• skladování trombocytů, funkce trombocytu,
• MeSH
• aktivace trombocytů MeSH
• klinické laboratorní techniky MeSH
• lidé MeSH
• roztoky chemie   MeSH
• transfuze trombocytů MeSH
• trombocytopatie diagnóza   krev   MeSH
• uchovávání tkání metody   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Platelets play a crucial role in physiological haemostasis. However, in coronary arteries damaged by atherosclerosis, enhanced platelet aggregation, with subsequent thrombus formation, is a precipitating factor in acute myocardial infarction. Current therapeutic approaches are able to reduce approximately one quarter of cardiovascular events, but they are associated with an increased risk of bleeding and in some resistant patients are not efficient. Some coumarins possess antiplatelet activity and, due to their additional antioxidant effects, may be promising drugs for use in combination with the present therapeutic agents. The aim of this study was to analyse a series of simple 4-methylcoumarins for their antiplatelet activity. Human plasma platelet suspensions were treated with different aggregation inducers [arachidonic acid (AA), collagen and ADP] in the presence of the 4-methylcoumarins. Complementary experiments were performed to explain the mechanism of action. 5,7-Dihydroxy-4-methylcoumarins, in particular those containing a lipophilic side chain at C-3, reached the activity of acetylsalicylic acid on AA-induced aggregation. Other tested coumarins were less active. Some of the tested compounds mildly inhibited either collagen- or ADP-induced aggregation. 5,7-Dihydroxy-4-methylcoumarins did not interfere with the function of thromboxane synthase, but were competitive antagonists of thromboxane A(2) receptors and inhibited cyclooxygenase-1 as well. 5,7-Dihydroxy-4-methylcoumarins appear to be promising candidates for the extension of the current spectrum of antiplatelet drugs.

• MeSH
• adenosindifosfát farmakologie   MeSH
• agregace trombocytů účinky léků   MeSH
• antikoagulancia chemie   farmakologie   MeSH
• Aspirin farmakologie   MeSH
• cyklooxygenasa 1 metabolismus   MeSH
• inhibitory agregace trombocytů chemie   farmakologie   MeSH
• inhibitory cyklooxygenasy farmakologie   MeSH
• kolagen farmakologie   MeSH
• kumariny chemie   farmakologie   MeSH
• kyselina arachidonová farmakologie   MeSH
• lidé MeSH
• molekulární struktura MeSH
• preklinické hodnocení léčiv metody   MeSH
• receptory pro thromboxan A2, prostaglandin H2 antagonisté a inhibitory   metabolismus   MeSH
• thromboxan-A-synthasa antagonisté a inhibitory   metabolismus   MeSH
• umbeliferony chemie   farmakologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH