Chronická lymfatická leukemie z B-lymfocytů (B-CLL) je nejčastějším hematologickým onemocněním dospělého věku. Onkogenní stimuly vyvolávající toto onemocnění, nejsou zatím známy. Včasná diagnostika onemocnění je velmi důležitá. Již v počátečních stadiích je možno předpovědět pravděpodobý průběh onemocnění (indolentní nebo agresivní), a tak volit správný léčebný postup. V letech 2000 až 2005 bylo na našem pracovišti zachyceno 31 pacientů s podezřením na chronickou lymfatickou leukemii. Pacienti byli diagnostikováni během rutinní imunofenotypizace lymfocytů na průtokovém cytometru. B-lymfocyty byly detekovány pomocí znaku CD20. Fakt, že maligní populace B-lymfocytů fenotypu CLL má nižší expresi znaku CD20 a normální expresi CD19, nám umožnil tyto pacienty odhalit. Pro detekci B-lymfocytů je lépe využívat znaku CD20 než CD19, neboť již v počátku některých hematologických onemocnění dochází ke změnám hustoty exprese, a to především znaku CD20, a pak teprve následují změny v počtu B-lymfocytů.

Chronic lymphocytic leukemia from B lymphocytes (B-CLL) is the most common hematological disease of adult. The oncogenic stimul i producing this disease have not been identified as yet. Early diagnosis of the disease is most important. The course of the disease (indo lent and aggressive) can be predicted already in the initial stages of disease and, consequently, the optimal therapeutic procedure selected. In the 2000–2005 period, a total of 31 individuals with suspected CLL were identified in our laboratory. Patients were diagnose d during routine lymphocyte immunophenotyping using a flow cytometer. B lymphocytes were detected using marker CD20. We were able to identify th ese patients based on the fact malignant populations of B lymphocytes (phenotype CLL) show lower expression of CD20 and normal expression of CD19. The CD20 antigen is more suitable than the CD19 antigen for B lymphocyte detection. The initial stage of some hematological dis eases is asso- ciated with changes in density of expression, particularly in CD20, to be followed by changes in B-lymphocyte count.

• MeSH
• antigeny CD20 imunologie   krev   MeSH
• časná diagnóza MeSH
• chronická lymfatická leukemie diagnóza   imunologie   MeSH
• imunologické testy MeSH
• lidé MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Klíčová slova
• CLL, FISH, rekurentní chromozomové aberace,
• MeSH
• chromozomální aberace klasifikace   MeSH
• chronická lymfatická leukemie genetika   patologie   MeSH
• financování organizované MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční metody   využití   MeSH
• lidé MeSH
• nádorové biomarkery genetika   MeSH
• prognóza MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• MeSH
• chronická lymfatická leukemie diagnóza   terapie   MeSH
• monoklonální protilátky terapeutické užití   MeSH
• protokoly protinádorové kombinované chemoterapie MeSH
• výběr pacientů MeSH
• výsledek terapie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• NLK Publikační typ
• studie

• MeSH
• chronická lymfatická leukemie MeSH
• hematologické nádory MeSH
• leukemie MeSH
• lymfatické nemoci MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie

• Klíčová slova
• Bcl-2, microRNA (miRNA), p53,
• MeSH
• chronická lymfatická leukemie genetika   MeSH
• financování organizované MeSH
• geny bcl-2 genetika   účinky léků   MeSH
• geny p53 genetika   imunologie   účinky léků   MeSH
• mikro RNA diagnostické užití   MeSH
• prognóza MeSH

• MeSH
• chronická lymfatická leukemie MeSH
• chronická nemoc MeSH
• krevní nemoci MeSH
• Publikační typ
• sborníky MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie

Chronická lymfocytární leukemie (CLL) je klonální onemocnění B lymfocytů s extrémně variabilním průběhem a prognózou. Biologicky jde tedy o heterogenní onemocnění z nerovnováhy proliferace a apoptózy maligních lymfocytů. Základní staging a indikace k zahájení terapie se řadu let nemění, avšak stanovení prognostických faktorů může být dobrou orientací pro sledování pacienta a léčebnou strategii. Pomocí nových léčebných postupů založených na kombinaci chemoterapie a imunoterapie je možné ve velké míře navodit dlouhotrvající kompletní remisi, ovlivnit celkové přežití a kvalitu života. Tyto úspěchy jsou spojeny s ekonomickou náročností, proto by léčebná strategie u pacientů s CLL měla být řízena zkušenými hematoonkologickými centry.

Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is a clonal disease of B lymphocyte with extremly variable course and prognosis. From biological point of view it is a heterogenneic disorder resulting from the imbalance between proliferation activity of the clone and apoptosis. Clinical staging and indication for the therapy initiation is stable for years, however, prognostic factors assessment is useful during the management and follow up of patients with CLL. New therapeutic approaches were developed during past years. A combination of chemotherapy and immunotherapy represents the most used strategy in the treatment of CLL having influence on major variables in CLL, including quality of life. This success is associated with certain economical burden, therefore the intensive treatment should be guided by an experienced haematooncology center.

• MeSH
• chronická lymfatická leukemie diagnóza   etiologie   farmakoterapie   MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• imunoterapie metody   trendy   využití   MeSH
• kombinovaná farmakoterapie MeSH
• lidé MeSH
• monoklonální protilátky aplikace a dávkování   škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• prognóza MeSH
• puriny aplikace a dávkování   škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• staging nádorů metody   trendy   využití   MeSH
• transplantace hematopoetických kmenových buněk metody   trendy   využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

AIMS: Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is the most common adult leukemia with a very heterogeneous course. Progress in molecular genetic characterization of CLL has confirmed the prognostic role of unbalanced chromosomal abnormalities currently defined by molecular cytogenetic methods: conventional karyotyping and FISH. However, a significant percentage of genomic abnormalities escapes routine investigation due to the limitations of these methods. It is presently clear that some of these aberrations have impact on prognosis and disease progression. METHODS: We examined copy number changes in the tumor genomes of 50 CLL patients using bacterial artificial chromosome (BAC) and/or oligonucleotide array platforms. We compared the results of arrayCGH with those obtained by FISH and conventional cytogenetics and evaluated their clinical importance. RESULTS: A total of 111 copy number changes were detected in 43 patients (86%) with clonal abnormalities present in at least 23% of the cells. Moreover, 14 patients (28%) were found to have 39 genomic changes that had not been detected by standard cytogenetic and/or FISH analyses. These included possibly prognostically important recurrent 2p and 8q24 gains. The most frequent unbalanced changes involved chromosomes 18, 7, 3, 9 and 17. We also determined the minimal deleted region on chromosome 6q in 7 cases by chromosome 6/7 specific array. CONCLUSIONS: The results showed that a subset of potentially significant genomic aberrations in CLL is being missed by the current routine techniques. Further, we clearly demonstrated the robustness, high sensitivity and specificity of the arrayCGH analysis as well as its potential for use in routine screening of CLL.

• MeSH
• chromozomální aberace * MeSH
• chronická lymfatická leukemie genetika   MeSH
• dospělí MeSH
• genová dávka * MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční MeSH
• karyotypizace metody   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• sekvenční analýza hybridizací s uspořádaným souborem oligonukleotidů MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

• Klíčová slova
• chronická lymfocytární leukemie, léčba,
• MeSH
• chlorambucil aplikace a dávkování   MeSH
• chronická lymfatická leukemie epidemiologie   farmakoterapie   MeSH
• epidemiologie MeSH
• financování organizované MeSH
• imunofenotypizace normy   MeSH
• incidence MeSH
• lidé MeSH
• monoklonální protilátky aplikace a dávkování   MeSH
• prevalence MeSH
• protokoly protinádorové kombinované chemoterapie aplikace a dávkování   MeSH
• stupeň závažnosti nemoci MeSH
• věk při počátku nemoci MeSH
• vidarabin analogy a deriváty   aplikace a dávkování   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Východisko. Klasickým cytogenetickým vyšetřením buněk kostní dřeně nebo periferních B-lymfocytů bylo zjištěno, že nejčastější změnou chromozómů u chronické lymfatické leukémie je trizómie 12. Molekulárně cytoge- netická metoda tzv. interfázická in situ hybridizace, kterou je možné vyšetřovat i nedělící se buňky, však dokázala, že chromozómových změn u CLL je daleko víc a že mají přímý vztah ke vzniku a průběhu onemocnění. Metody a výsledky. Během posledních dvou let vyšetřujeme buňky kostní dřeně nemocných s CLL kromě klasickou cytogenetickou metodou G-pruhováním také fluorescenční in situ hybridizací. Pomocí centromerické a-satelitní sondy pro chromozóm 12 sledujeme početní odchylky v dělících i nedělících se buňkách, dále kosmido- vými sondami hledáme drobné delece v oblasti 13q14 (Rb gen) a 17p13 (p53 protein). Tyto geny jsou zodpovědné za buněčné dělení a jsou dávány do přímé souvislosti se vznikem nádorových procesů. U CLL řešíme v současnosti otázku, zda početní (trizómie 12) a strukturní (delece) chromozómové změny jsou primární či sekundární změnou a jaký je jejich vztah k průběhu onemocnění. Sondou CEP12 jsme vyšetřili 93 nemocných, u 24 z nich (tj. 25,8 %) jsme zjistili existenci buněčného klonu s trizómií 12. Zastoupení klonu bylo 2,5-75,5 % buněk a klasickou cytogenetikou byla jeho existence prokázána jen u 2 nemocných. Delece v oblasti 13q14 byla prokázána sondou LSI D13S319 u 24 nemocných ze 73 (32,8 %), rozsah klonu 2,5-80,0 % buněk, klasickou cytogenetikou s potvrzením FISH byla delece 13q14 nalezena jen u 1 nemocného. Deleci 17p13 jsme u 61 pacientů vyšetřených sondou LSI p53 zjistili u 14 (22,9 %), a to vždy jen metodou FISH. Rozsah klonu 2,5-34,0 % buněk. Deleci del(11)(q23) jsme nezjistili u žádného z 12 vyšetřených pacientů. Všechny sondy jsou od firmy VYSIS™. Závěry. Interfázická FISH je velmi citlivou metodou, kterou lze u vysokého procenta pacientů s CLL prokázat chromozómové odchylky. Náš soubor nemocných s CLL dále rozšiřujeme a hledáme korelace mezi molekulárně- cytogenetickými, imunologickými, morfologickými a prognostickými ukazateli.

Background. Trisomy 12 was found to be the most frequent chromosomal aberration identified by conventional cytogenetic studies of bone marrow cells and peripheral lymphocytes of patients with CLL. Molecular-cytogenetic techniques which enable examination of dividing and/or non-diving interphase nuclei (I-FISH), proved existence of other chromosomal abnormalities, mainly deletions, which could have in CLL patients relation to the origin, course and prognosis of the disease. Methods and Results. During the last two years bone marrow chromosomes of all patients with CLL were examined by G-banding and by I-FISH. The numerical changes of chromosome 12 were followed by centromeric DNA probe in dividing and non-dividing cells. The small deletions were ascertained by locus specific probes for 13q14 (Rb gene), 17p13 (p53 protein) and 11q23 (MLL gene). These genes are responsible for cell division and their function is probably in connection with neoplastic process. It is of interest whether numerical and structural chromosomal rearrangements are primary or secondary changes and what is their impact on etiology of CLL. 93 patients were examined by DNA prove CEP12 and trisomy 12 was found in 24 of them (25.8 %), the range of the clone was 2.5-75.5 % of the screened cells. Deletion del(13)(q14) was examined by probe D13S319 in 73 patients and proved in 24 of them (32.8 %), pathological clone ranged 2.5-80.0 % of the cells. Deletion del(17)(p13) was found in 14 patients out of 61 examined by probe LSI p53 (22.9 %). The extent of the clone was 2.5-34.0 % of examined cells. Deletion 11q23 was not ascertained in any of 11 patients by means of probe LSI 11q23 (MLL). All probes used for FISH were manufactured by VYSIS™. Conclusions. FISH is very sensitive method, suitable for molecular-cytogenetic examination of leukemic patients. With I-FISH the deletion of 13q14 was ascertained as the most frequent chromosomal aberration in series of 73 patients with CLL. We continue to increase the number of patients screened by I-FISH with all eligible DNA probes and start the prospective study on patients with chromosomal pathology. We will correlate the immunophe- notype, morphology, clinical course and prognosis with karyotypic findings.

• MeSH
• B-lymfocyty genetika   MeSH
• chronická nemoc MeSH
• delece genu MeSH
• DNA sondy diagnostické užití   MeSH
• dospělí MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• lymfoidní leukemie diagnóza   genetika   MeSH
• prognóza MeSH
• senioři MeSH
• trizomie MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH