Na HPLC separáciu enantiomérov 1-metoxymetyl, 1-etoxymetyl, 1-propoxymetyl-2-(1-pyrolidíno), (1-piperidíno), (1-perhydroazepíno)-etylesterov kyseliny 2-alkoxyfenylkarbámovej bola použitá chirálnastacionárna fáza na báze β-cyklodextrínu a mobilná fáza acetonitril/0,1 mol/l octan sodnýpH=5,2 (88/12 v/v). Študoval sa vplyv štruktúry látok a vplyv teploty kolóny na separáciu enantiomérov.Výrazný vplyv na rozlíšenie enantiomérov má dĺžka alkoxysubstituenta a jeho polohavzhľadomk stereogénnemucentru. Znižovanie teploty kolóny spôsobuje predĺženie retenčných časovštudovaných látok a zvýšenie hodnôt rozlíšenia enantiomérov.
The chiral stationary phase on the base of β-cyclodextrin and the mobile phase acetonitrile/0.1 mol/lacetate buffer pH=5.2 (88/12 w/w) were used for the separation of the enantiomers of 1-methoxymethyl,1-ethoxymethyl, 1-propoxymethyl-2-(1-pyrrolidinyl), (1-piperidino), (1-perhydroazepinyl)-ethyl esters of 2-alkoxyphenylcarbamic acid. The influence of the structure of these compounds andthe influence of temperature on enantioseparation were studied. The dominant effect on theresolution of enantiomers is exerted by the length of the alkoxysubstituent on the aromatic ring andits position with regard to the stereogenic centre. A decrease in temperature caused an increase inthe retention factors of the compounds under study and the resolution values of enantiomers.
12 sv.
- MeSH
- Chemistry Techniques, Analytical methods MeSH
- Publication type
- Periodical MeSH
- Conspectus
- Chemie. Mineralogické vědy
- NML Fields
- chemie, klinická chemie
sv.
- MeSH
- Chemistry Techniques, Analytical methods MeSH
- Publication type
- Periodical MeSH
- Conspectus
- Chemie. Mineralogické vědy
- NML Fields
- chemie, klinická chemie
Teicoplanínová a vancomycínová kolóna sa použila na separáciu niektorých dansyl derivátov α-aminokyselín. Navrhli sa separačné mechanizmy separácie chirálnych látok na základe nameraných chromatografických údajov použitím rôznych kolón. Skúmali sa interakcie medzi molekulami separovaných látok a stacionárnou fázou.
Teicoplanin and vancomycin columns were used for the separation of some dansyl derivates of α-amino acids. By comparison of chromatographic data which were measured in various column it is possible to propose the separation mechanisms of chiral compounds. The interaction between molecules of compound of interest and the stationary phase was investigated.
Témou práce je enantioselektívna separácia vybraných aminokyselín metódou vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie. Separácia enantiomérnych foriem bola testovaná pomocou chirálnych stacionárnych fáz na základe β-cyklodextrínu, izopropylkarbamát cyklofruktánu 6 a makrocyklického antibiotika teikoplanínu. Najúčinnejšia enantioseparácia sa dosiahla na teikoplanínovej chirálnej stacionárnej fáze v separačnom systéme s obrátenými fázami. UV spektrofotometrická detekcia pri vlnovej dĺžke 210 nm bola použitá na detekciu aminokyselín. Na hodnotenie vhodnosti HPLC metódy sa použili linearita, medza detekcie, medza stanovenia, presnosť a výťažnosť. Medze stanoviteľnosti pre enantioméry fenylalanínu a metionínu boli 0,3 a 0,2 ?g.ml–1. HPLC metóda s použitím chirálnej stacionárnej fázy na základe teikolanínu bola aplikovaná na analýzu doplnkov výživy.
The paper deals with enantioselective separation of amino acids by the high performance liquid chromatography method. Separations of enantiomeric forms were tested on the chiral stationary phases based on β-cyclodextrine, isopropyl carbamate cyclofructan 6, and the macrocyclic antibiotic teicoplanin. The best enantioseparation was obtained on the teicoplanin-based chiral stationary phase in the reversed-phase mode. UV spectrophotometric detection at 210 nm was used for detection of amino acids. The method was validated with respect to linearity, precision, limit of detection, limit of quantitation, and recovery. Limits of quantitation for phenylalanine and methionine enantiomers were 0.3 and 0.2 ?g.ml–1, respectively. The HPLC method with teicoplanin-based chiral stationary phase was applied for analysis of dietary supplements.
- MeSH
- Amino Acids analysis MeSH
- Phenylalanine * physiology isolation & purification MeSH
- Methionine * physiology isolation & purification MeSH
- Teicoplanin isolation & purification MeSH
- Chromatography, High Pressure Liquid * methods utilization MeSH
- Publication type
- Research Support, Non-U.S. Gov't MeSH
Kapilárna izotachoforéza bola využitá na separáciu a stanovenie enantiomérov dimetindenu v rôznych liekových formách. Bolo preskúšaných niekoľko typov chirálnych selektorov vo viacerých elektrolytových systémoch s rôznym zložením a rôznym pH. Optimálny vodiaci elektrolyt bol tvorený 10 mmol/l octanom draselným a kyselinou octovou do výslednej hodnoty pH 4,8 s prídavkom 4 mmol/l karboxyetyl-β-cyklodextrínu ako chirálneho selektora a 0,2% metylhydroxyetylcelulózy (m–HEC) na potlačenie elektroosmotického toku. Ako zakončujúci elektrolyt sa použil β-alanín s koncentráciou 5 mmol/l. Bola hodnotená presnosť, správnosť, linearita, robustnosť a selektivita vypracovanej ITP metódy. Predúprava vzorky pred analýzou spočívala v rozpustení a nariedení príslušnej liekovej formy s obsahom dimetindenu demineralizovanou vodou na požadovanú koncentráciu. Takto upravená vzorka bola priamo dávkovaná do prístroja.
Capillary isotachophoresis was employed to separate and determine dimethinden enantiomers in various dosage forms. Several types of chiral selectors were tested in various electrolyte systems of different composition and different pH. The optimal leading electrolyte was composed of 10 mmol/l potassium acetate and acetic acid to achieve pH 4.8 with an addition of 4 mmol/l carboxyethyl-β-cyclodextrin as the chiral selector and 0.2 % of methylhydroxyethylcellulose (m–HEC) to suppress the electroosmotic flow. The terminating electrolyte was β- alanine of a concentration of 5 mmol/l. The evaluation included the precision, correctness, linearity, robustness, and selectivity of the elaborated ITP method. The pretreatment of the sample prior to analysis consisted in the dissolution and dilution of the appropriate dimethinden-containing dosage form with demineralized water to achieve the required concentration. Such a pretreated sample was directly dosed into the apparatus.
Východisko. Hemopoetické progenitorové buňky z periferní krve (PBPC) jsou po transplantaci schopné zajistit jak hemopoetickou a imunologickou rekonstituci, tak stabilní dlouhodobé přihojení štěpu. Autologní PBPC se podávají po předchozí myeloablativní chemoterapii pacientům s hematologickými a nehematologickými malignitami. Cílem uvedené studie bylo zhodnocení výsledků autologních separací PBPC u pacientů s dobrým efektem mobilizační terapie. V koncentrátech PBPC jsme hodnotili obsah buněčných parametrů potřebných pro transplantaci. V další části studie jsou uvedeny doby přihojení štěpů PBPC po jejich autologní transplantaci. Metody a výsledky. Vyhodnocovali jsme parametry 26 separací PBPC u 11 hematoonkologických pacientů s dobrým efektem mobilizační terapie s koncentrací CD 34+ buněk vyšší než 20 . 10 3 v ml periferní krve. Separace PBPC byly prováděny na přístrojích Cobe Spectra a Baxter CS 3000 Plus v standardním režimu se zpracováním 12 l krve, což představuje 2,7 celkových objemů krve pacienta. V uvedené skupině pacientů byla získána již z jedné separace dostatečná množství CD 34+ buněk pro jejich transplantaci. Transplantační dávky byly připraveny v průměru ze dvou separací a činily v obsahu MNC/kg, CD 34+ buněk/kg a CFU-GM/kg 4,3 . 10 8 , 17,1 . 10 6 a 2,5 . 10 4. Získané parametry odpovídají, resp. v některých ukazatelích převyšují, doporučená množství pro jejich transplantaci. Závěry. U účinně mobilizovaných pacientů byly v režimu standardních separací získány dostatečné dávky progenitorových buněk pro jejich autologní transplantaci. Transplantační dávky byly připraveny ze dvou výkonů. Sledování předseparačních koncentrací CD 34+ buněk v periferní krvi je spolehlivým ukazatelem pro zahájení separací PBPC. Časné potransplantační výsledky ukazují přihojení štěpu v průměru za 10 dní s nevelkou spotřebou substituční terapie transfuzními přípravky.
Background. Transplantations of haematopoietic progenitor cells from peripheral blood (PBPC) are able to ensure haematopoietic and immunological reconstitution as well as stable long term engraftment. Autologous PBPC are administered after previous myeloablative chemotherapy to patients with haematological and non-haematological malignancies. The objective of the submitted study was to follow-up the results of autologous separations of PBPC in patients with a good effect of mobilisation therapy. The authors evaluated in PBPC concentrates the content of cell parameters needed for transplantation. In the subsequent part of the trial they mention the times of engraftment after autologous transplantation. Methods and Results. The authors evaluated parameters of 26 separations of PBPC in 11 haematooncological patients with a good effect of mobilisation therapy and with concentration of CD 34+ cells higher than 20 . 10 3 /ml of peripheral blood. The separations of PBPC were implemented on the Cobe Spectra and Baxter CS 3000 Plus equipment under a standard regime with processing of 12 l blood, i.e. 2.7 total blood volumes of the patients. In the mentioned group of patients already from one separation an adequate amount of CD 34+ cells for their transplantation was obtained. Transplantation doses were prepared on average from two separations and amounted as regards MNC/kg, CD 34+ cells/kg and CFU-GM/kg to 4.3 . 10 8 , 17.1 . 10 6 and 2.5 . 10 4 . The assembled parametrs correspond to, or in some parameters exceed, recommended amounts for their transplantation. Conclusions. In well mobilised patients under the regime of standard separations adequate amounts of progenitor cells for their autologous transplantation were obtained. Transplantation doses were prepared from two collections. Investigation of pre-separation concentration of CD 34+ cells in the peripheral blood is a reliable indicator for starting PBPC separation. Early post-transplantation results indicate the time of engraftment 10 days on average and minor need of substitution therapy with blood products.
- MeSH
- Antigens, CD34 immunology blood drug effects MeSH
- Transplantation, Autologous methods statistics & numerical data MeSH
- Adult MeSH
- Hematopoietic Stem Cells immunology MeSH
- Middle Aged MeSH
- Humans MeSH
- Hematopoietic Stem Cell Mobilization methods MeSH
- Blood Component Removal methods instrumentation statistics & numerical data MeSH
- Hematopoietic Stem Cell Transplantation methods statistics & numerical data MeSH
- Check Tag
- Adult MeSH
- Middle Aged MeSH
- Humans MeSH
- Male MeSH
- Female MeSH
