V diagnostice lymeské boreliózy (LB) existuje i v současnosti řada problémů. Naše pracoviště vyvinulo vlastní metodiku přímého průkazu boreliové nukleové kyseliny PCR reakcí, která byla testována v prospektivní studii. Bylo vyšetřováno 32 pacientů s ověřenou diagnózou lymeské neuroboreliózy. Í^NA spirochét byla prokazována v moči a mozkomíšním moku. Moč byla odebírána před léčbou, po léčbě, 3 a 6 měsíců po ukončení hospitalizace, lumbální punkce byla provedena na začátku terapie. PCR reakce probíhala jako dvoustupňová amplifikace(„nesteď' PCR). Byly použity dvě sady primerů: pro chromozomální gen kódující 16S rDNA a pro plazmidový gen kódující protein OspC. Intratékální syntéza protilátek byla stanovována pomocí specifického protilátkového indexu (Alsb). 94 % pacientů mělo prokázanou autochtónni produkci specifických antiboreliových IgG protilátek v mozkoi ^míšním moku. Průkaz DNA spirochét u sledované skupiny v moči byl poměrně vysoký (72 % pozitivních alespoň v jednom vyšetření). Na začátku i na konci léčby byla boreliová nukleová kyselina v moči nalezena u poloviny nemocných, při tříměsíční kontrole byli PCR pozitivní pouze 4 (13 %) a při šestiměsíční již žádný pacient neměl toto vyšetření pozitivní. Z výsledků je zřejmý významný pokles pozitivity PCR během sledování, což může dokládat účinnost antibiotické léčby. Na začátku terapie byla DNA spirochét prokázána v mozkomíšním moku u 44 % pacientů a v moči u 50 %. Tyto výsledky naznačují, že u neuroboreliózy může být moč vhodným materiálem pro diagnostiku i vzhledem k její snadné dostupnosti.

In the diagnosis of Lymeborreliosis (LB) still some problems exist. The authors' department developed their own method of direct evidence of borrelia nucleic acid by the PCR reaction which was tested in a prospective study. 32 patients with a confirmed diagnosis of Lyme neuroborreliosis were examined. Spirochaetale DNA was proved in urine and cerebrospinal fiuid. Urine was collected before and after treatment, 3 and 6 months after termination of hospitalization, lumbar puncture was performed at the onset of therapy. The PCR reaction was implemented as a two-grade amplification („nested" PCR). Two sets of primers were used: For the chromosomal gene coding 16S rDN AN and for the plasmid gene coding protein OspC. Intrathecal synthesis of antibodies was assessed by means of a specific antibody index (Alsb). 94% patients had a confirmed autochthonous production of specific antiborrelia IgG antibodies in the cerebrospinal fluid. Evidence of spirochaetale DNA in the investigated group in urine was relatively high (72% positive in at least one examination). At the onset and at the end of treatment borrelia nuclear acid was found in the urine of half the patients, during the he 3-month check-up only 4 (13%) were PCR positive and during the 6-month check-up no patient was PCR positive. From the results a significant decline of PCR positivity during the investigation is apparent which may be evidence of the effectiveness of antibiotic treatment. At the onset of treatment spirochaetale DNA was detected in the cerebrospinal fluid in 44% patients and in the urine in 50%. These results indicate that in neuroborreliosis urine may be suitable material for the diagnosis, among others, also because it is readily available.

• MeSH
• analýza moči MeSH
• Borrelia burgdorferi patogenita   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• lidé MeSH
• lymská neuroborelióza diagnóza   etiologie   farmakoterapie   MeSH
• nukleové kyseliny krev   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   MeSH
• protilátky krev   MeSH
• stupeň závažnosti nemoci MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH
• srovnávací studie MeSH

Inaccessible hygiene water sources and sanitation are one of the sustainability issues that need to be solved. An attempt to solve this problem is to change the conventional system used in the water supply and sewage treatment to sustainable water and waste management. To transform the system, companies initially need to map their business value chain. However, this process is often not receiving a full attention by the organisation. In an academic perspective, there are limited studies that map the value chains of water and waste systems. To overcome this limitation, the present study aims to map the value chain processes of the water and wastewater utility companies towards a sustainability solution. A review of related studies is used to conduct this study. Khuzestan Urban Water and Sewage company in Iran has been selected as case studies. The mapping results indicate a lack of sustainability integration in a water management system that leads to ineffective and inefficient water management. Value chain mapping process is significant for practitioners, particularly in the water and sewage companies, as a starting point for transforming their conventional water management systems towards sustainability. Experts at the company stated that value chain mapping as part of value chain analysis enables organisations to increase operational efficiency and eliminate waste by 57%.

• MeSH
• odpad tekutý - odstraňování * MeSH
• odpadní voda MeSH
• odpadní vody * MeSH
• voda MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• Geografické názvy
• Írán MeSH

Cíl práce: Význam polymerázové řetězové reakce v diagnostice lymeské neuroboreliózy a srovnání s průkazem specifických antiboreliových protilátek. Metodika: Na izolaci DNA z moče a mozkomíšního moku byla použita suspenze pryskyřice Chelex 100. DNA z plazmy byla izolována pomocí komerčního setu QlAamp DNA Mini Kit. PCR probíhala jako dvoustupňová amplifikace („nested“ PCR). Byly použity tři sady primerů: pro plazmidový gen kódující OspC protein a pro chromozomální geny kódující 16S rDNA a flagelin. Výsledky: V prospektivní studii bylo vyšetřeno 25 pacientů s diagnózou lymeské neuroboreliózy. DNA spirochéty byla prokázána V mozkomíšním moku u 12 pacientů (48 %), v moči u 13 (52 %) nemocných a v plazmě u 6 (24 %). Specifické antiboreliové protilátky v séru byly detekovány u 20 (80 %) pacientů a autochtonní produkce antiboreliových IgG protilátek v mozkomíšním moku byla zjištěna u 22 vyšetřovaných. Závěr: Na základě získaných výsledků se domníváme, že PCR na průkaz borelií může vhodně doplňovat diagnostiku lymeské neuroboreliózy, ale nemůže nahradit „klasickou“ sérologii.

Aim: The signifikance of polymerase chain reaction in diagnostics of lyme's neuroborreliosis and comparison with the detection of specific anti-borrelia antibodies. Methods: The suspension of resin Chelex 100 was used for the DNA isolation from urine and cerebrospinal fluid. DNA from plasma was isolated by the QlAamp DNA Mini Kit. The nested PCR was used for DNA amplification. All together free sets of primers were used, one set for plasmid gene coding OspC protein, and two other sets for chromosomal genes coding 16S rDNA and flagelin. Results: Twenty-five patiens with the diagnosis of Lyme neuroborreliosis were evaluated in a prospective study. Spirochetal DNA was found in the CSF of 12 patients (48 %), in the urine of 13 pts. (53 %) and in six pts. In blood plasma (24 %). Specific anti-borrelia antibodies were detected in the serum of 20 pts (80 %) and 22 patients showed autochtonous production of antiborrelia IgG antibodies in thein CSF. Conclusion: Our results have shown that PCR detection of borrelia can serve as a useful addendum to diagnostics of lyme neuroborreliosis but cannot replace the „classic“ serology.

• MeSH
• Borrelia burgdorferi izolace a purifikace   MeSH
• lidé MeSH
• lymská neuroborelióza krev   moč   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Depozita lehkých řetězců ve formě amorfních hmot (light chain deposition disease) poškozují nejčastěji ledviny, méně často poškozují jiné orgány. Onemocnění je podstatně vzácnější než AL- amyloidóza. Prvními příznaky light chain deposition disease u našeho nemocného byly symetrické otoky dolních končetin, otoky víček, erytrocyturie a nefrotická proteinurie. Nemoc byla diagnostikována z biopsie ledviny, provedené až ve fázi rozvinutého nefrotického syndromu se snížením filtrace. V aspirátu kostní dřeně bylo 0,8 % plazmocytů, v séru byl přítomen monoklonální imunoglobulin IgG- k a v moči byly přítomny volné řetězce ?. Krevní obraz byl v normě a nebyly osteolytické změny skeletu. Diagnóza byla tedy uzavřena jako monoklonální gamapatie nejistého významu (MGUS). Pacient byl léčen 10 cykly chemoterapie obsahující vinkristin, adriamycin a vysoké dávky dexametazonu (VAD). Po 10. cyklu poklesla koncentrace monoklonálního IgG pod hranici kvantitativního denzitometrického stanovení, citlivější imunofixační elektroforéza byla však ještě pozitivní. Nicméně za 2 měsíce od ukončení chemoterapie byla i imunofixační elektroforéza negativní, takže bylo dosaženo kompletní hematologické léčebné odpovědi (remise). Reparační změny v ledvinách probíhaly velmi pozvolna. Po 4 letech od ukončení léčby klesla proteinurie pod 1 g/ l a již nebyla přítomna erytrocyturie. Po 9 letech od ukončení léčby klesla proteinurie na 0,19 g/ l, tedy na normální hodnoty. U pacientů s MGUS je při opakovaných kontrolách nutno hledat nejen odpověď na otázku, zda nedochází ke transformaci MGUS do maligního onemocnění, ale také na otázku, zda se nerozvíjí poškození organizmu monoklonálním imunoglobulinem. Pokud monoklonální imunoglobulin poškozuje pacienta, je nutno léčbu zahájit včas, protože obnova funkce postižených orgánů (orgánová léčebná odpověď) probíhá po dosažení kompletní hematologické remise velmi zvolna. Léčebné režimy obsahující vysoké dávky dexametazonu jsou v současnosti doporučovány pro pacienty s primární systémovou AL- amyloidózou. Domníváme se, že pro léčbu light chain deposition disease při MGUS jsou vhodné stejné postupy.

Light chain deposits in the form of amorphous material (light chain deposition disease) damage most frequently kidneys and, less frequently, they affect other organs. The incidence of light chain deposition disease is much lower than that of AL-amyloidosis. Symmetrical swelling of both legs, swelling of the eye lids, erythrocyturia and nephrotic proteinuria were the first signs of light chain deposition disease in our patient. The disease was diagnosed from kidney biopsy performed at the stage of advanced nephrotic syndrome with reduced filtration. The bone marrow aspirate contained 0.8% of plasma cells, serum contained monoclonal immunoglobulin IgG-kappa and urine contained free kappa chains. Blood count was normal and no osteolytic changes to the skeleton were identified. The patient was, therefore, diagnosed with monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS) and was treated with 10 cycles ofchemotherapy consisting of vincristine, adriamycin and high/dose dexamethasone (VAD). Following the 10th cycle, the concentration of monoclonal IgG declined below the threshold for quantitative densitometric identification, while the more sensitive immunofixation electrophoresis remained positive. However, 2 months after the completion of chemotherapy, the immunofixation electrophoresis had become negative and thus complete haematological treatment response (remission) was achieved. Restoration of the kidney function was only gradual. Proteinuria declined below 1 g/l and no erythrocyturia was present 4 years post-treatment. Proteinuria declined to 0.19 g/I, i.e., normal values, 9 years post-treatment completion. Regular follow-ups in patients with MGUS should seek to identify not only whether MGUS is transforming into malignant disease but also whether monoclonal immunoglobulin is damaging the organism. Treatment of patients with monoclonal immunoglobulin-associated damage should be initiated early as the restoration of the affected organs function (organ treatment response) after complete haematological remission is only gradual. At present, treatment regimes with high-dose dexamethasone are recommended for patients with primary systemic AL-amyloidosis. We believe that the same approach is suitable for the treatment of light chain deposition disease in MGUS patients.

• MeSH
• dexamethason aplikace a dávkování   MeSH
• doxorubicin aplikace a dávkování   MeSH
• indukce remise MeSH
• kombinovaná farmakoterapie MeSH
• lehké řetězce imunoglobulinů analýza   MeSH
• lidé MeSH
• nefrotický syndrom imunologie   komplikace   MeSH
• paraproteinemie farmakoterapie   komplikace   MeSH
• senioři MeSH
• vinkristin aplikace a dávkování   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

Úvod a cíl studie: Pacienti s chronickým onemocněním ledvin (CKD) často vykazují zvýšenou koncentraci volných lehkých řetězců (FLC) v séru, provázenou změnami v zastoupení obou jejich forem, tj. kappa i lambda řetězců, a v jejich důsledku pak změnou jejich vzájemného poměru (FLC ratio). Cílem této studie bylo ověření referenčních mezí tohoto poměru u pacientů s chronickým selháním ledvin, přičemž ke stanovení koncentrací FLC kappa a FLC lambda byly použity diagnostické prostředky firmy Binding Site. Typ studie: Metodická studie. Název a sídlo pracoviště: Ústav laboratorní diagnostiky, Oddělení klinické biochemie, Fakultní nemocnice Ostrava. Materiál a metody: Do studie bylo zařazeno 150 pacientů s CKD a 17 kontrol. U všech byla stanovena koncentrace kreatininu, FLC kappa, FLC lambda v séru a z výsledků měření pak byly vypočteny odhad glomerulární filtrace dle CKD EPI (GF) a FLC ratio. Podle vypočtené hodnoty GF byli pacienti s CKD, v souladu s klasifikací KDIGO, rozdělení do skupin G2 až G5. K vyloučení monoklonální povahy FLC byla použita standardní elektroforéza sérových proteinů, imunofixační elektroforéza a izoelektrická fokusace v agarózovém gelu s následným afinitním imunoblottingem s protilátkami proti volným lehkým řetězcům kappa a lambda (IEF/AIB). Ke statistickému zpracování dat byly použity software Excel, MedCalc a Project R. Výsledky: S rostoucím stupněm CKD byly pozorovány statisticky významné rozdíly mezi koncentracemi FLC kappa, FLC lambda i FLC ratio v jednotlivých skupinách (P ≤ 0,0001). Tyto parametry také statisticky významně korelovaly s koncentrací kreatininu i s odhadem glomerulární filtrace dle CKD EPI (P < 0,0001). V souladu s pokynem CLSI EP28-A3C byly pro poměr FLC u pacientů s CKD určeny tyto referenční meze: dolní mez 1,01 a horní mez 3,65. Závěr: Praktická aplikace referenčních mezí pro FLC ratio může zvýšit specificitu FLC testu pro detekci monoklonální produkce FLC u pacientů s CKD. Odhad mezí v této studii byl proveden s využitím diagnostických prostředků firmy Binding Site a nemusí být shodný v případě použití jiných diagnostik.

Objective: Patients with chronic kidney disease (CKD) often show an increased serum free light chains concentration (FLC) accompanied by changes in the representation of both forms, i.e., kappa and lambda chains, and consequently by changing their ratio (FLC ratio). The aim of this study was to verify the reference limits of this ratio in patients with chronic renal failure, determined by commercial IVD of Binding Site. Design: Methodological study. Settings: Institute of Laboratory Diagnostics, Department of Clinical Biochemistry, University Hospital Ostrava. Material and methods: The study included 150 patients with CKD and 17 controls. The concentration of creatinine, FLC kappa, FLC lambda was determined, the estimate of glomerular filtration according to CKD-EPI and serum FLC ratio were calculated according to the KDIGO classification, divided into groups G2 to G5. To exclude the presence of monoclonal FLC, serum protein electrophoresis, immunofixation electrophoresis and isoelectric focusing in agarose gel followed by affinity immunoblotting with antibodies against free kappa and lambda light chains (IEF / AIB) were used. Excel, MedCalc and Project R software were used for statistical data processing. Results: Statistically significant differences were observed between concentrations of FLC kappa, FLC lambda and FLC ratio in individual groups (P < 0.0001). These parameters also statistically significantly correlated with creatinine concentration and with the estimate of glomerular filtration according to CKD EPI (P < 0.0001). In accordance with CLSI guideline EP28-A3C, the following reference limits were established for the FLC ratio in patients with CKD: a lower limit of 1.01 and an upper limit of 3.65. Conclusion: Practical application of reference limits for the FLC ratio may increase the specificity of the FLC test for the detection of monoclonal FLC production in patients with CKD. The limits in this study were estimated using Binding Site diagnostics and may not be the same for other diagnostics.

• Klíčová slova
• enzymatické stanovení,
• MeSH
• chronická renální insuficience * diagnóza   patofyziologie   MeSH
• hodnoty glomerulární filtrace MeSH
• imunoturbidimetrie MeSH
• klinická studie jako téma MeSH
• kreatinin analýza   MeSH
• lehké řetězce imunoglobulinů * analýza   MeSH
• lidé MeSH
• referenční hodnoty MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

• MeSH
• mastné kyseliny MeSH
• metabolismus MeSH
• Publikační typ
• příručky MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• vnitřní lékařství

Úvod: Mnohočetný myelom (MM) je – kromě plazmocelulární proliferace a souvisejícího orgánového postižení – charakterizovaný rovněž produkcí monoklonálního imunoglobulinu (MIG), detekovatelného v séru a/nebo v moči. Kromě kompletních molekul imunoglobulinu produkují plazmocyty také volné lehké řetězce, které nejsou vázány v molekule MIG. Cíl studie: Srovnání sérových hladin volných lehkých řetězců (VLŘ) a jejich poměru (index ?/?) u jedinců s monoklonální gamapatií nejistého významu (MGNV) a nemocných s MM, rovněž i srovnání hladin VLŘ mezi aktivní a stabilní formou MM. Materiál a metody: Sledovaný soubor tvořilo 130 nemocných s MM vyšetřených v době diagnózy (n = 31) i v průběhu onemocnění (n = 99), z toho bylo 72 nemocných s aktivní formou nemoci a 58 nemocných ve stabilní fázi. Dále bylo vyšetřeno 52 jedinců s MGNV. Sérové hladiny VLŘ byly stanovovány systémem FreeLiteTM, ke statistickému vyhodnocení bylo užito U-testu podle Manna-Whitneye, sekrece kappa, respektive lambda byla hodnocena samostatně. Výsledky: Při srovnání sérových hladin VLŘ u nemocných s MM a jedinců s MGNV byly ve skupině kappa zjištěny statisticky významně vyšší hladiny dominantního řetězce kappa (p = 0,001), nižší hodnoty alternativního řetězce lambda (p = 0,033) a vyšší hodnoty indexu ?/? (p = 0,0004). Ve skupině lambda byly rovněž zjištěny významné rozdíly v hladinách dominantního řetězce lambda (p = 0,029), indexu ?/? (p = 0,003) i v míře suprese alternativního řetězce (p = 0,032) u nemocných s MM. Při srovnání nemocných s MM v aktivní a stabilní fázi onemocnění byly ve skupině kappa zjištěny signifikantní rozdíly v hladinách dominantního řetězce kappa (p = 0,0001), indexu ?/? (p = 0,001) i v míře suprese řetězce lambda (p = 0,001). Ve skupině lambda byly zjištěny rozdíly v hladinách řetězce lambda (p = 0,011) i indexu ?/? (p = 0,004). Závěr: Studie potvrdila významné rozdíly nejen v sérových hladinách VLŘ i indexu ?/? při srovnání souboru nemocných s MM a MGNV, ale i nemocných s MM vyšetřených v rozdílných fázích aktivity onemocnění. Index ?/? se jeví jako citlivější ukazatel než samotné hladiny VLŘ.

Introduction: Multiple myeloma (MM) is characterized by plasmacelullar proliferation and accumulation, organ impairment and production of monoclonal immunoglobulin. Plasma cells also produce free light chains, not bound in immunoglobulin molecule. Aims: The aim of the study is the evaluation of serum free light chain (FLC) levels and their ratio (?/? ratio) between individuals with monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS) and MM patients, and also between active and stable stage of multiple myeloma. Methods: 130 MM patients were enrolled in the study, 31 patients were examined in time of diagnosis, 99 during the course of the disease, 72 patients were in active stage of the disease, and 58 patients had stable disease. 52 MGUS individuals were examined also. Serum FLC levels were assessed by FreeLiteTM Immunotech system, U-test according to Mann-Whitney was used for statistical evaluation. Kappa or lambda secretion was evaluated separately. Results: Comparing serum FLC levels in MM patients and individuals with MGUS, in kappa group were assessed significantly higher levels of dominant kappa chain (p = 0.001), lower values of alternative chain lambda (p = 0.033) and higher ?/? ratio (p = 0.0004) in patients with MM. Also in lambda group there were detected differences in levels of dominant light chain lambda (p = 0.029), ?/? ratio (p = 0,003) and in suppression of alternative light chain kappa (p = 0.032). Matching active and stable phase of MM were detected significant higher levels of dominant chain kappa (p = 0.0001), ?/? ratio (p = 0.001) and suppressed values of alternative chain lambda (p = 0.001) in patients with active disease in kappa group. In lambda active MM group were assessed differences in dominant chain lambda (p = 0.011) and also in ?/? ratio values (p = 0.004). Conclusions: The above study confirmed differences in serum FLC levels and ?/? ratio between MGUS individuals and MM patients, but also among active and stable stage of multiple myeloma. ?/? ratio seems to be more sensitive indicator than serum FLC levels themselves.

• MeSH
• algoritmy MeSH
• financování organizované MeSH
• imunoglobuliny - kappa-řetězce diagnostické užití   krev   MeSH
• imunoglobuliny - lambda-řetězce diagnostické užití   krev   MeSH
• lehké řetězce imunoglobulinů diagnostické užití   MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom krev   MeSH
• monoklonální gamapatie nejasného významu diagnóza   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Metoda polymerázové řetězové reakce v reálném čase (RQ-PCR) představuje v současnosti jednu z nejcitlivějších kvantitativních metod stanovení chimérismu po alogenní transplantaci krvetvorných buněk. Tato metoda je minimálně desetkrát citlivější než běžně používaná metoda fragmentační analýzy (FA) s fluorescenční detekcí. Aplikace metody umožňující stanovení mikrochimérismu, tj. smíšeného chimérismu (SC) na hladině menší než 1 %, dovoluje zachycení relapsu onemocnění signifikantně dříve a ve větším počtu případů, než je tomu u méně senzitivních metod. U pacientů s náhlým znovuobjevením autologní krvetvorby, odhalilo použití RQ-PCR SC také u předchozích odběrů, pomocí FAjiž klasifikovaných jako chimérismus kompletní (KC). Rovněž retrospektivní RQ-PCR analýza vzorků s pozitivní minimální zbytkovou chorobou, dle FA klasifikovaných jako KC, opakovaně potvrdila přítomnost autologní krvetvorby na hladině menší než 1 %. Použití metody stanovení chimérismu s lepší mezí detekce tedy umožňuje dřívější klinickou intervenci, avšak absolutní význam chimérismu i mikrochimérismu musí být dále hodnocen.

Real time polymerase chain reaction (RQ-PCR) represents one of the most sensitive methods for quantitative analysis of chimerism. This method is at least ten times more sensitive than commonly performed method of fragment analysis (FA) with fluorescence detection. Application of method that enables detection of microchimerism (mixed chimerism under 1%), can recognize relaps significantly sooner and in more cases than by using less sensitive methods. Performance of RQ-PCR within patients with sudden recurrence of autologous haematopoiesis showed microchimerism also in previous samples, formerly judged according to FA as complete donor chimerism (CDC). Furthermore, retrospective analysis of CDC samples from patient with positive residual disease repeatedly revealed microchimerism. Performance of more sensitive method can significantly contribute to early clinical intervention, nevertheless the predictable value of mixed chimerism and especially microchimerism must be further investigated.

• MeSH
• chimérismus MeSH
• homologní transplantace patologie   MeSH
• lidé MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí využití   MeSH
• sekvenční analýza metody   trendy   využití   MeSH
• transplantace hematopoetických kmenových buněk využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Úvod. Systémová AL amyloidóza je vzácné onemocnění patřící do skupiny monoklonálních gamapatií, přičemž podkladem choroby je extracelulární depozice insolubilních fibril tvořených fragmenty nebo kompletními molekulami monoklonálních lehkých řetězců imunoglobulinů produkovaných klonálními plazmocyty. Identifikace plazmocytového klonu, resp. jeho bílkovinného produktu – monoklonálního imunoglobulinu (MIg), představuje jeden ze stěžejních aspektů v diagnostice a sledování nemocných s AL amyloidózou. V posledních letech je již zcela běžně prováděno stanovení sérových hladin volných lehkých řetězců imunoglobulinu (VLŘ), což významně rozšířilo možnosti analýzy MIg u monoklonálních gamapatií. Náplní předloženého sdělení jsou vlastní zkušenosti se stanovením sérových hladin volných lehkých řetězců u pacientů s AL amyloidózou. Soubor a metody. Soubor čítal 19 nemocných s biopticky verifikovanou systémovou AL amyloidózou, věkový medián činil 62 let (48–92 let), poměr mužů a žen činil 16 : 3, zastoupení sekrece kappa : lambda bylo 3 : 16. Sérové hladiny volných lehkých řetězců byly stanovovány systémem FreeLiteTM. Normální rozmezí sérových hladin bylo 3,3–19,4 mg/l v případě lehkého řetězce kappa (κ), v případě lambda (λ) pak 5,7–26,3 mg/l. Vzájemný poměr lehkých řetězců kappa/lambda (index κ/λ) byl určen výpočtem s normálním rozmezím 0,26–1,65, v případě renální nedostatečnosti pak 0,37–3,1. Výsledky. Hladiny MIg byly prokázány v séru u 12/18 (63 %) nemocných, přičemž medián hladin činil 1,69 g/l (0–9,8 g/l). Typizačně se jednalo ve 4 případech o kompletní molekuly izotypu IgG (2x IgG-κ, 2x IgG-λ), ve 3 případech IgA-λ a u jednoho nemocného byl zjištěn izotyp IgD-λ. U 4 nemocných byla v séru zjištěna přítomnost pouze lehkých řetězců λ. Při proteinové analýze moči byla exkrece Bence-Jonesovy bílkoviny zjištěna u 11 nemocných, ve všech případech v kvantitě nad 200 mg/24 hodin, přičemž u 2 nemocných byla navíc prokázána přítomnost kompletních molekul MIg v moči (1x IgA-λ, 1x IgG-λ). Analýza sérových hladin volných lehkých řetězců prokázala u všech nemocných abnormální hodnoty s mediánem 399 mg/l (54,4 – 2385 mg/l), přičemž patologie indexu κ/λ byla zjištěna u 17 nemocných (90 %). Ze 17 nemocných s abnormálními hladinami VLŘ a současně s patologií indexu κ/λ mělo 16 nemocných hladiny dVLŘ (dVLŘ – rozdíl hladin dominantního a alternativního VLŘ) > 50 mg/l. U 16 z 19 nemocných (84 %) tedy stanovení VLŘ umožňuje pravidelné sledování průběhu onemocnění. Závěr. Stanovení sérových hladin volných lehkých řetězců v současnosti představuje klíčový laboratorní parametr nejen v diagnostice a sledování průběhu onemocnění, ale zejména v hodnocení účinnosti podávané terapie. Kombinace standardních technik detekce MIg spolu se stanovením hladin VLŘ umožňuje monitorování naprosté většiny nemocných s AL amyloidózou.

Introduction. Systemic AL amyloidosis is a rare illness in the group of monoclonal gammopathies. The disease is based on extracellular deposition of insoluble fibrils formed by complete monoclonal light immunoglobulin chains or their fragments, produced by clonal plasmocytes. Identification of the plasmocyte clone, or of its protein product – the monoclonal immunoglobulin (MIg) – represents a key aspect of diagnostics and monitoring of AL amyloidosis patients. Serum immunoglobulin free light chain (FLC) assay, routinely performed in the recent years, significantly widened the options for MIg analysis in monoclonal gammopathies. The subject of this report is practical experience with serum immunoglobulin free light chains assay in AL amyloidosis patients. Patients and Methods. The patient set comprised 19 patients with biopsy-verified systemic AL amyloidosis. Age median was 62 years of age (48–92 years of age), male to female ratio was 16 : 3, representation of secretion kappa : lambda was 3 : 16. Free light chains serum levels were determined by the FreeLiteTM system. Normal range of serum levels was 3.3–19.4 mg/l for light chain kappa (κ), and 5.7–26.3 mg/l for light chain lambda (λ). Mutual ratio of light chains kappa/lambda (the κ/λ index) was determined by a calculation with normal range 0.26–1.65, in case of renal insufficiency 0.37–3.1. Results. MIg serum levels were determined in 12 out of 18 (68%) patients, where the median level was 1.69 g/l (0–9.8 g/l). As for isotypes, there were 4 cases of complete isotype IgG (2x IgG-κ, 2x IgG-λ), 3 cases of IgA-λ, and one patient presented the isotype IgD-λ. Light chains λ only were found in the serum of 4 patients. Protein analysis of urine found excretion of Bence-Jones protein in 11 patients, in all cases in quantity over 200 mg/24 hours, while the presence of complete MIg molecules in the urine (1x IgA-λ, 1x IgG-λ) was additionally determined in 2 patients. Serum immunoglobulin free light chain assay determined abnormal levels in all patients with median value 399 mg/l (54.4–2 385 mg/l), while κ/λ index pathology was determined in 17 (90%) patients. Out of the 17 patients with abnormal FLC levels and concomitant κ/λ index pathology, 16 patients had dFLC levels > 50 mg/l (dFLC = difference between dominant and alternative FLC levels). Therefore, FLC assay enables regular monitoring of the disease in 16 out of 19 (84%) patients. Conclusion. Serum immunoglobulin free light chain assay currently represents a key laboratory parameter not only for dia-gnostics and monitoring of the course of the disease, but namely for treatment efficacy evaluation. A combination of standard MIg detection techniques with FLC level assay enables monitoring of a vast majority of AL amyloidosis patients.

• MeSH
• amyloidóza * diagnóza   krev   terapie   MeSH
• biochemická analýza krve MeSH
• klinické laboratorní techniky MeSH
• lehké řetězce imunoglobulinů * diagnostické užití   fyziologie   MeSH
• lidé MeSH
• výsledek terapie MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

Náplní sdělení je aktuální informace o přínosu nové, vysoce senzitivní metody analýzy imunoglobulinů séra (Hevylite™), umožňující separátní kvantitativní vyšetřování párů těžkých/lehkých řetězců imunoglobulinu (HLC), tj. monoklonálního (involved) a polyklonálního (noninvolved) izotypu včetně jejich poměru (HLC-r) u monoklonálních gamapatií. Hlubší pozornost je věnována východiskům a charakteristice této analytické metody, srovnání jejího klinického přínosu se standardními technikami používanými v diagnostice, sledování průběhu, časné detekce relapsu a progrese nemoci, stratifikace, hodnocení léčebné odezvy a prognózy monoklonální gamapatie nejistého významu, mnohočetného myelomu, Waldenströmovy makroglobulinemie, systémové AL-amyloidózy a některých nehodgkinských lymfomů. Z dosavadních výsledků vyplývá, že ve srovnání s dosavadními standardně používanými metodami obohacuje metoda Hevylite™ klinickou praxi o vyšetření hladiny noninvolved Ig s možností vyhodnocení hloubky imunoparézy, stanovení indexu HLC-r uplatňujícího se při stratifikaci MM do rizikových skupin a přispívajícího k odhadu prognózy a zlepšení hodnocení hloubky léčebné odezvy, zatímco v případě MGUS poskytuje informaci o riziku maligní evoluce. Ke zpřesnění indikací metody Hevylite™ u MG v běžné klinické praxi zřejmě přispěje zveřejnění výsledků aktuálně probíhajících validačních studií.

The aim of the paper is to inform about the contribution of novel, highly sensitive analytic technique for the assessment of serum immunoglobulins (Hevylite™), enabling separate quantitative assessment of heavy/light chain pairs of immunoglobulin (HLC), i. e. the monoclonal („involved“) and polyclonal („noninvolved“) isotype including their ratio (HLC-r) in monoclonal gammopathies. We particularly target the characteristics of this technique, the compari­son of its clinical contribution with standard methods used in the diagnostics, course and the detection of relapse and progression of the disease, as well as the stratification, assessment of therapeutic outcome and prognosis in monoclonal gammopathy of undetermined significance, multiple myeloma, Waldenström´s macroglobulinemia, systemic AL-amyloidosis and some non-Hodgkin lymphomas. Present results show that in comparison with existing routinely used techniques the Hevylite™ method enriches clinical practice with the assessment of serum levels of „uninvolved“ Ig. It enables the evaluation of the depth of „immunoparesis“, and the determination of HLC-r index that is needful for the stratification of MM into „risk cohorts“. It also contributes to prognostic assessment and improvement of the evaluation of the depth of therapeutic response. In MGUS individuals the HLC-r index provides information about the risk of malignant transformation. We await the results of ongoing validation studies that are expected to provide specific indications for Hevylite™ technique for MG in routine practice.

• Klíčová slova
• monoklonální imunoglobulin, systémová AL-amyloidóza,
• MeSH
• amyloidóza diagnóza   imunologie   krev   MeSH
• imunoglobulinové izotypy krev   MeSH
• imunoglobuliny - kappa-řetězce krev   MeSH
• imunoglobuliny - lambda-řetězce krev   MeSH
• imunologické techniky metody   MeSH
• lehké řetězce imunoglobulinů * krev   MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   imunologie   krev   MeSH
• monoklonální gamapatie nejasného významu diagnóza   imunologie   krev   MeSH
• nehodgkinský lymfom diagnóza   imunologie   krev   MeSH
• paraproteinemie * diagnóza   imunologie   krev   MeSH
• prognóza MeSH
• progrese nemoci MeSH
• recidiva MeSH
• referenční hodnoty MeSH
• těžké řetězce imunoglobulinů * krev   MeSH
• Waldenströmova makroglobulinemie diagnóza   imunologie   krev   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH