light detection
Dotaz
Zobrazit nápovědu
Východisko. Při diagnostice monoklálních gamapatií – jedním z nejčastějších hematologických onemocnění – se využívá imunochemických testů, kdy v biologickém materiálu pátráme po produkci paraproteinu. Metody a výsledky. Běžně používanými laboratorními testy jsou elektroforéza sérových bílkovin (SPE – serum protein electrophoresis) a imunofixační elektroforézou (IFE). Novou metodou je detekce volných lehkých řetězců v séru. Ve studii porovnáváme tyto tři metody z hlediska citlivosti záchytu paraproteinu. Ke stanovení detekce volných lehkých řetězců byl použit analyzátor využívající systému Freelite (Immunotech Beckman Coulter). Vyšetřeno bylo 51 pacientů s mnohočetným myelomem, nízce maligními ne-hodgkinskými lymfomy, primární amyloidózou a monoklonální gamapatií nejasného významu. Závěry. Detekce FLC může sloužit jako cenná diagnostická metoda, která zpřesňuje diagnostiku i hodnocení odpovědi na léčbu v indikovaných případech.
Background. To diagnose monoclonal gamopathy, one of the most frequent haematological diseases, we use immunochemical assays, which are based on the detection of paraprotein in serum and/or urine. Methods and Results. The most common laboratory assays we use are SPE (serum protein electrophoresis) and IFE (immunofixation electrophoresis). New method represents the detection of free light chain (FLC) in serum. In our study we compared those three methods (SPE, IFE and FLC) from the point of sensitivity of paraprotein detection. For FLC detection was used Freelite system analyzer (Immunotech Beckman Coulter). We examined 51 patients with diagnosis of multiple myeloma, nonHodgkin’s lymphoma, primary amyloidosis and monoclonal gammopathy of undetermined significance. Conclusions. Detection of FLC is a valuable method which sometimes could specify diagnosis of MG and make the treatment more accurate.
- MeSH
- diagnostické techniky a postupy statistika a číselné údaje trendy MeSH
- imunoelektroforéza metody trendy MeSH
- krevní nemoci diagnóza etiologie MeSH
- lehké řetězce imunoglobulinů chemie imunologie krev MeSH
- lidé MeSH
- mnohočetný myelom diagnóza krev moč MeSH
- paraproteiny chemie imunologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Práce podává základní informace o lehkých řetězcích imunoglobulinů. V přehledu uvádí vývoj metod používaných v klinické biochemii na jejich stanovení. Upozorňuje na četné limity a problémy stanovení volných lehkých řetězců a na jejich možné klinické využití.
The publication contains basic information about free light chains of immunoglobulins. In a short review it shows evaluation methods used in clinical biochemistry for the determination of free light chains of immunoglobulins. Authors summarize methodical limitation of determination of free light chains and discuss their clinical utilization.
After 20 years of development, evaporative light-scattering detection (ELSD) has become the mainstream choice for the detection of various classes of natural products. ELSD continues to grow in popularity as a "quasi-universal" technique because of the specificity of the detection method, which is based on the scattering of laser light from nonvolatile analyte particles. It represents an attractive alternative compared to other types of detection, such as refractive index detection and/or ultraviolet detection. This review presents issues concerned with the separation of carbohydrates in plant materials by HPLC and ELSD, as well as the advantages and limitations relating to the ELSD method. Additionally, an overview of possible ELSD applications in the analysis of carbohydrates in natural products is presented.
Plausible calf-thymus DNA molecular weight distribution can be obtained by size-exclusion chromatography with dual low-angle light scattering/refractometric detection at sufficiently low flow rate. The distribution extends over three decades of molecular weight and is characterized by weight average molecular weight M(w) = 8418000 and polydispersity index M(w)/M(n) = 5.2. After strongly scattering impurities had been removed from the sample using adsorption properties of the 3 mum mixed-cellulose-ester filter membranes, static light-scattering measurement in flow injection mode was feasible and gave M(w) = 8580000, corroborating the veracity of SEC results.
- MeSH
- DNA analýza chemie MeSH
- gelová chromatografie metody MeSH
- molekulová hmotnost MeSH
- radiační rozptyl MeSH
- skot MeSH
- světlo MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- skot MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- srovnávací studie MeSH
A comparison of the s- and w-detections of molecular weight, a necessary condition for precise determination of interdetector volume in size exclusion chromatography of polymers with the dual light scattering--concentration detection, is examined. From the theoretical analysis for a polymer with the log-normal molecular weight distribution it follows that the error in determination of the local calibration, i.e., of a logarithmic dependence of molecular weight on elution volume obtained by the s-detection, from the known dependence of radius of gyration on elution volume and of molecular weight on the radius of gyration, remains linear and is slightly shifted with respect to that obtained by the w-detection (dual detection giving the weight-average molecular weight) towards higher molecular weights, the difference being below the experimental error. It also follows that the error in the slope of local calibration found by the w-detection is given by the ratio of the error in interdetector volume and the variance of the elution curve. This is demonstrated on several polymer samples with symmetric elution curves of polymer samples differing in polydispersity indices. The range of this rule depends on the broadness and symmetry of elution curves. The precision of the interdetector volume determination depends therefore strongly on the Mw/Mn ratio of the sample.
Depozita lehkých řetězců ve formě amorfních hmot (light chain deposition disease) poškozují nejčastěji ledviny, méně často jiné orgány. Onemocnění je podstatně vzácnější než AL- amyloidóza. První příznaky light chain deposition disease u naší nemocné byly symetrické otoky dolních končetin. Nemoc byla diagnostikována z biopsie ledvin, provedené až ve fázi rozvinutého nefrotického syndromu s retencí dusíkatých látek. V kostní dřeni bylo 40 % plazmocytů, nebyly však přítomny osteolytické změny skeletu, takže šlo o mnohočetný myelom klinického stadia IB dle Durieho a Salmona. Pacientka byla léčena iniciálně 4 cykly chemoterapie VAD (vinkristin, adriamycin a dexametazon). Po 4 cyklech však nebyla zřetelná žádné léčebná odpověď. Následoval sběr kmenových buněk krvetvorby z periferní krve a vysokodávkovaná chemoterapie, melfalan v redukované dávce 140 mg/ m2 při renální insuficienci (sérový kreatinin 290 ?mol/ l). Průběh vysokodávkované chemoterapie komplikovalo prudké zhoršení funkce ledvin, vzestup kreatininu na 600 ?mol/ l. Zhoršení funkcí ledvin bylo nejspíše způsobeno nefrotoxicitou použité dávky melfalanu. Tento jev byl popsán u pacientů s AL- amyloidózou s nefrotickým syndromem, kteří byli léčeni vysokými dávkami melfalanu. Byl pojmenován ?postconditioning renal insuficiency?. Na nefrotoxicitě vysoké dávky melfalanu se zřejmě podílejí hypoalbuminemie, hypoproteinemie, snížený intravaskulární objem a poškození ledvin depozity monoklonálního imunoglobulinu ve formě amyloidu, ale zřejmě i ve formě amorfních neamyloidových depozit. Na prohloubení renální insuficience se však spolupodílel i septický stav při mukositidě. Při kontrolním vyšetření 1. měsíc po transplantaci byla zjištěna kompletní remise, které byla potvrzena dalšími vyšetřeními. V průběhu 1. roku po transplantaci se postupně zlepšovala funkce ledvin, vymizel nefrotický syndrom, odpad bílkoviny se snížil na 2? 3 g/ 24 hod, glomerulární filtrace se postupně zlepšovala. Pacientka je nyní tři roky od stanovení diagnózy v kompletní remisi mnohočetného myelomu, bez nefrotického syndromu, s mírně zvýšeným kreatininem (160 ?mol/ l), který však má v průběhu posledních tří let klesající tendenci. Uvedený popis dokumentuje dosažení kompletní hematologické remise vysokodávkovanou chemoterapií s autologní transplantací u pacientky s light chain deposition disease i při úplné rezistenci nemoci na klasickou chemoterapii VAD. Upozorňujeme na možnost nefrotoxicity vysoké dávky melfalanu (postconditioning renal insuficiency) u pacientů s nefrotickým syndromem způsobeným depozity lehkých řetězců, ať již ve formě AL- amyloidu, nebo ve formě amorfních lehkých řetězců, a dokumentujeme důležitost vyšetřování volných lehkých řetězců v plazmě.
Light chain deposition disease (LCDD) damages most frequently kidneys, and less frequently other organs. The incidence of LCDD is lower than the incidence of AL-amyloidosis. Symmetric swelling of both legs was the fi rst sign of nephrotic syndrome with renal insu ffi ciency in our female patient. Renal biopsy specimen revealed the diagnosis of LCDD. Bone marrow biopsy contained 40% of plasma cells. Bone survey showed no osteolytic changes. These fi ndings confi rmed the diagnosis of multiple myeloma (MM) Durie Salmon stage IB with LCDD. The patient was initially treated with 4 cycles of VAD (vinkristine, adriamycine, dexamethasone) chemotherapy with no response. Followed collection of peripheral haematopoietic stem cells and later high dose chemotherapy with reduced dose of melphalan 140 mg/sqm and autologous peripheral haematopoietic stem cells transplantation. Melphalan dose was reduced because of renal insuffi - ciency (serum creatinine 290 μmol/l) before application of conditioning regimen. High dose therapy was complicated by with deterioration of renal function, creatinine increased to 600 μmol/l. Worsening of renal function was most likely caused by nephrotoxicity of melphalan in nephrotic syndrome. This has been previously described in patients with AL-amyloidosis, and nephrotic syndrome who were treated with high dose melphalan. This phenomenon was entitled “post conditioning renal insuffi ciency”. Hypoalbuminemia hypoproteinemia and reduced intravascular volume and renal damage caused by amyloid deposits as well as probably, amorphous non-amyloid deposits of monoclonal immunoglobulin are likely to have contributed to nephrotoxicity of the high dose of melphalan. However, worsening of renal insuffi ciency was facilitated by the mucositis-associated sepsis. Follow-up examination one month after high dose chemotherapy showed complete remission, that was confi rmed by further examinations. In the course of the fi rst year after high dose chemotherapy renal function gradually improved and nephrotic syndrome completely disappeared (complete kidney remission). Proteinuria declined to 2–3 g/24 hours and glomerular fi ltration slowly improved. Three years after high dose chemotherapy the patient is still in complete remission of multiple myeloma and free of nephrotic syndrome, with slightly increased creatinine (160 μmol/l) that, nevertheless, has had an improving tendency over last 3 years. The present case study illustrates accomplishment of complete haematological remission with high dose chemotherapy followed by autologous haematopoietic stem cells transplantation despite complete resistance of the disease to the standard chemotherapy VAD in a patient with MM and LCDD. We draw the reader’s attention to the possibility of nephrotoxic effects of high dose melphalan (post conditioning renal insuffi ciency) in patients with nephrotic syndrome caused by light chain deposits as AL-amyloid or amorphous light chains deposits (LCDD)and we document the importance of plasma free light chain detection.
- MeSH
- alkylační protinádorové látky aplikace a dávkování škodlivé účinky MeSH
- autologní transplantace MeSH
- chemorezistence MeSH
- dospělí MeSH
- financování organizované MeSH
- indukce remise MeSH
- kombinovaná terapie MeSH
- ledviny patologie MeSH
- lehké řetězce imunoglobulinů imunologie MeSH
- lidé MeSH
- melfalan aplikace a dávkování škodlivé účinky MeSH
- mnohočetný myelom imunologie komplikace terapie MeSH
- nefrotický syndrom komplikace patofyziologie patologie MeSH
- protokoly protinádorové kombinované chemoterapie terapeutické užití MeSH
- transplantace hematopoetických kmenových buněk MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- přehledy MeSH
A novel method for the non-derivatization liquid chromatographic determination of metals (potassium, aluminium, calcium and magnesium) and organic compounds (ascorbate and aspartate) was developed and validated based on evaporative light scattering detection (ELSD). Separation of calcium, magnesium and aluminium was achieved by the cation exchange column Dionex CS-14 and an aqueous TFA mobile phase according to the following time program: 0-6 min TFA 0.96 mL L(-1), 6-7 min linear gradient from TFA 0.96-6.4 mL L(-1). Separation of potassium, magnesium and aspartate was achieved by the lipophilic C18 Waters Spherisorb column and isocratic aqueous 0.2 mL L(-1) TFA mobile phase. Separation of sodium, magnesium, ascorbate and citrate was also achieved by the C18 analytical column, according to the following elution program: 0-2.5 min aqueous nonafluoropentanoic acid (NFPA) 0.5 mL L(-1); 2.5-3.5 min linear gradient from 0.5 mL L(-1) NFPA to 1.0 mL L(-1) TFA. In all cases, evaporation temperature was 70 degrees C, pressure of the nebulizing gas (nitrogen) 3.5 bar, gain 11 and the flow rate 1.0 mL min(-1). Resolution among calcium and magnesium was 1.8, while for all other separations was > or = 3.2. Double logarithmic calibration curves were obtained within various ranges from 3-24 to 34-132 microg mL(-1), and with good correlation (r>0.996). Asymmetry factor ranged from 0.9 to 1.9 and limit of detection from 1.3 (magnesium) to 17 microg mL(-1) (ascorbate). The developed method was applied for the assay of potassium, magnesium, calcium, aluminium, aspartate and ascorbate in pharmaceuticals and food-supplements. The accuracy of the method was evaluated using spiked samples (%recovery 95-105%, %R.S.D. < 2) and the absence of constant or proportional errors was confirmed by dilution experiments.
