Immune checkpoint blockade (ICB) using monoclonal antibodies against programmed cell death protein 1 (PD-1) or programmed death-ligand 1 (PD-L1) is the treatment of choice for cancer immunotherapy. However, low tissue permeability, immunogenicity, immune-related adverse effects, and high cost could be possibly improved using alternative approaches. On the other hand, synthetic low-molecular-weight (LMW) PD-1/PD-L1 blockers have failed to progress beyond in vitro studies, mostly due to low binding affinity or poor pharmacological characteristics resulting from their limited solubility and/or stability. Here, we report the development of polymer-based anti-human PD-L1 antibody mimetics (α-hPD-L1 iBodies) by attaching the macrocyclic peptide WL12 to a N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide copolymer. We characterized the binding properties of iBodies using surface plasmon resonance, enzyme-linked immunosorbent assay, flow cytometry, confocal microscopy, and a cellular ICB model. We found that the α-hPD-L1 iBodies specifically target human PD-L1 (hPD-L1) and block the PD-1/PD-L1 interaction in vitro, comparable to the atezolizumab, durvalumab, and avelumab licensed monoclonal antibodies targeting PD-L1. Our findings suggest that iBodies can be used as experimental tools to target hPD-L1 and could serve as a platform to potentiate the therapeutic effect of hPD-L1-targeting small molecules by improving their affinity and pharmacokinetic properties.

• MeSH
• antigeny CD274 * antagonisté a inhibitory   imunologie   metabolismus   MeSH
• inhibitory kontrolních bodů * farmakologie   chemie   MeSH
• lidé MeSH
• monoklonální protilátky chemie   farmakologie   MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• polymery chemie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Peptide display methods are a powerful tool for discovering new ligands of pharmacologically relevant targets. However, the selected ligands often suffer from low affinity. Using phage display, we identified a new bicyclic peptide binder of prostate-specific membrane antigen (PSMA), a metalloprotease frequently overexpressed in prostate cancer. We show that linking multiple copies of a selected low-affinity peptide to a biocompatible water-soluble N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide copolymer carrier (iBody) improved binding of the conjugate by several orders of magnitude. Furthermore, using ELISA, enzyme kinetics, confocal microscopy, and other approaches, we demonstrate that the resulting iBody can distinguish between different conformations of the target protein. The possibility to develop stable, fully synthetic, conformation-selective antibody mimetics has potential applications for molecular recognition, diagnosis and treatment of many pathologies. This strategy could significantly contribute to more effective drug discovery and design.

• MeSH
• biomimetické materiály chemie   MeSH
• kalikreiny chemie   MeSH
• lidé MeSH
• nosiče léků chemie   MeSH
• peptidová knihovna * MeSH
• prostatický specifický antigen chemie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

The introduction of anti-CD20 monoclonal antibodies such as rituximab, ofatumumab, or obinutuzumab improved the therapy of B-cell malignancies even though the precise physiological role and regulation of CD20 remains unclear. Furthermore, CD20 expression is highly variable between different B-cell malignancies, patients with the same malignancy, and even between intraclonal subpopulations in an individual patient. Several epigenetic (EZH2, HDAC1/2, HDAC1/4, HDAC6, complex Sin3A-HDAC1) and transcription factors (USF, OCT1/2, PU.1, PiP, ELK1, ETS1, SP1, NFκB, FOXO1, CREM, SMAD2/3) regulating CD20 expression (encoded by MS4A1) have been characterized. CD20 is induced in the context of microenvironmental interactions by CXCR4/SDF1 (CXCL12) chemokine signaling and the molecular function of CD20 has been linked to the signaling propensity of B-cell receptor (BCR). CD20 has also been shown to interact with multiple other surface proteins on B cells (such as CD40, MHCII, CD53, CD81, CD82, and CBP). Current efforts to combine anti-CD20 monoclonal antibodies with BCR signaling inhibitors targeting BTK or PI3K (ibrutinib, acalabrutinib, idelalisib, duvelisib) or BH3-mimetics (venetoclax) lead to the necessity to better understand both the mechanisms of regulation and the biological functions of CD20. This is underscored by the observation that CD20 is decreased in response to the "BCR inhibitor" ibrutinib which largely prevents its successful combination with rituximab. Several small molecules (such as histone deacetylase inhibitors, DNA methyl-transferase inhibitors, aurora kinase A/B inhibitors, farnesyltransferase inhibitors, FOXO1 inhibitors, and bryostatin-1) are being tested to upregulate cell-surface CD20 levels and increase the efficacy of anti-CD20 monoclonal antibodies. Herein, we review the current understanding of CD20 function, and the mechanisms of its regulation in normal and malignant B cells, highlighting the therapeutic implications.

• MeSH
• antigeny CD20 * MeSH
• B-lymfocyty MeSH
• chronická lymfatická leukemie * MeSH
• lidé MeSH
• monoklonální protilátky MeSH
• pyrimidiny MeSH
• rituximab MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

The polyhistidine tag (His-tag) is one of the most commonly used epitope tags in protein engineering. While His-tagged proteins can be detected reliably using immunological methods such as ELISA and Western blot, these methods are costly and time-intensive, necessitating more facile solutions for preliminary qualitative determination and concentration estimation. To this end, we present a rapid test strip assay based on iBody antibody mimetics that target the His-tag. We compare this strategy to commercial antibody-based assays and discuss the advantages and caveats of lateral flow assay design. Our test strip detected a panel of His-tagged proteins with different tag attachment strategies with a visual detection limit of 1 μM and densitometric detection limit of 0.5 μM. Due to its chemical nature, the presented assay exhibits wide reagent compatibility in comparison to antibody-based assays.

• MeSH
• histidin chemie   imunologie   MeSH
• limita detekce MeSH
• proteiny analýza   MeSH
• protilátky imunologie   MeSH
• reagenční papírky MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Dyslipidemie představují kategorii onemocnění, která jsou mnoho let známa a léčena více skupinami hypolipidemik. Přes velké množství dostupných přípravků existují pacienti, kteří nedosahují dostatečných výsledků při dosud známé a standardní léčbě nebo tuto léčbu netolerují. Tato práce předkládá aktuální souhrn potenciálně nových léčiv v oblasti farmakoterapie dyslipidemií. Zahrnuty jsou jak naprosto nové, pouze hypotetické možnosti cílových míst, tak jsou charakterizovány léky nacházející se v pokročilých fázích klinického výzkumu, které s velkou pravděpodobností budou brzy uvedeny do praxe.

Dyslipidemia is the category of disease that has been known for many years and treated with more groups ofiipid-lowering drugs. Despite the large amount of products available, there are patients who do not achieve satisfactory results with the previously known and standard treatment or are intolerant. This text presents a summary of the current potential new drugs in pharmacotherapy dyslipidemia. Included are both the completely new, only hypothetical possibilities of target issues, as well as drugs currently being in the advanced stages of clinical research, which is likely to be soon put into practice.

• MeSH
• apolipoprotein A-I MeSH
• biologická terapie MeSH
• biomimetika MeSH
• dyslipidemie * farmakoterapie   MeSH
• genetická terapie MeSH
• kardiovaskulární nemoci MeSH
• klinické zkoušky jako téma MeSH
• lidé MeSH
• modely u zvířat MeSH
• monoklonální protilátky MeSH
• proproteinkonvertasy antagonisté a inhibitory   MeSH
• riziko MeSH
• transportní proteiny pro estery cholesterolu antagonisté a inhibitory   MeSH
• transportní proteiny antagonisté a inhibitory   MeSH
• vakcinace MeSH
• životní styl MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

V článku je podán přehled současných poznatků o problematice imunitní trombocytopenické purpury u dětí. Pro dětský věk je typický výskyt mezi 2.-8. rokem věku, obě pohlaví jsou postižena stejně. Převažuje akutní forma onemocnění, které trvá týdny až měsíce a odezní většinou spontánně bez následků. Závažné krvácení se objevuje u 3-17 % pacientů, krvácení do CNS je popisováno u méně než 1 % dětí s ITP. U 10-20 % pacientů onemocnění přechází do chronicity. Mezi léčbu 1. linie patří observace pacienta bez medikamentózní léčby, kortikoidy, intravenózní imunoglobuliny a anti-D globulin. Léčba chronické formy je individuální a patří do rukou zkušeného hematologa. K léčbě jsou používány všechny léčebné postupy 1. linie podávané periodicky, imunosupresiva, cytostatika, anti CD-20 monoklonální protilátky, TPO-mimetika a splenektomie. Je vždy nutno vyloučit možné vyvolávající onemocnění.

The article gives an overview of current knowledge about the problems of immune thrombocytopenic purpura in children. The typical occurrence for childhood is between the second and eight year of age, both genders are affected equally. The acute form of this illness, which lasts weeks to months and usually subsides spontaneously without sequelae, is predominant. Major bleeding occurs in 3-17 % of patients, bleeding in the CNS is described in less than 1% of children with ITP. In 10-20 % of patients the disease passes into chronicity. Patient without drug therapy, corticosteroids, intravenous immunoglobulins and anti-D globulin belong among first-line treatment. The treatment of chronic forms is individual and should be indicated by an experienced hematologist. All firstline medical procedures, administered periodically, are used in its treatment: immunosuppressants, cytostatics, anti CD-20 monoclonal antibodies, TPO-mimetics and splenectomy. It is always necessary to exclude a causal disease.

• Klíčová slova
• dětský věk, akutní ITP, chronická ITP, riziko krvácení, poruchy imunity,
• MeSH
• akutní nemoc MeSH
• chronická nemoc MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• dítě MeSH
• financování organizované MeSH
• hormony kůry nadledvin aplikace a dávkování   škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• intravenózní imunoglobuliny aplikace a dávkování   škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• klinický obraz nemoci MeSH
• kombinovaná farmakoterapie MeSH
• krevní obraz MeSH
• lidé MeSH
• nemoci imunitního systému diagnóza   terapie   MeSH
• předškolní dítě MeSH
• prognóza MeSH
• splenektomie metody   škodlivé účinky   využití   MeSH
• trombocytopenická purpura diagnóza   etiologie   terapie   MeSH
• věkové faktory MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• lidé MeSH
• předškolní dítě MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

Možnosti ovlivnit metabolismus plazmatických lipoproteinů a snížit tak riziko aterotrombotických komplikací se v poslední době rychle vyvíjejí. Kromě zcela nových přístupů modifikujících hladiny aterogenních lipoproteinových částic získáváme nové farmakologické formy běžných hypolipidemik – nanopartikule obsahující statiny, fibráty v nanočásticích s vysokou biologickou dostupností, fixní kombinace s hypolidemiky. Pokračují testy účinnosti terapií cílících na metabolismus HDL částic. Ani pro inhibitory cholesteryl-ester transferázového proteinu (CETP) nebo mimetika apoliproteinu A1 stále nemáme přesvědčivé důkazy. Zcela nové postupy zahrnující blokádu mirosomálního triglyceridy transferujícího proteinu (MTP), inhibici proprotein konvertázy subtilisin-kexin 9 (PSCK9) nebo terapie využívající anti-sense technologie sbírají důkazy z klinických studií velmi rychle. Zatím víme o jejich příznivých účincích na hladiny aterogenních lipidů, ale i první údaje o jejich vlivu na průběh aterosklerózy a kardiovaskulární riziko naznačují jejich slibnou budoucnost. Navíc výzkumné laboratoře připravují další možnosti, jak lipoproteinový metabolismus modifikovat (analoga lecitincholesterol-acyl transferázy nebo fibroblastového růstového faktoru 21). Ne všechny koncepty se dostanou až do klinického použití, ale naše možnosti se jednoznačně rozšíří.

Options for modification of lipoprotein metabolism and, thus, for reduction of atherothrombotic complication have widened over recent years. Apart from the development of novel approaches new pharmacological formulations of common lipid lowering drugs have been prepared – e. g. statincontaining nanoparticles, fibrate nanoparticles, fixeddose combination with lipid-lowering drugs etc. Clinical trials of therapies targeting HDL particle metabolism are being in progress despite we have not gathered any unambiguous evidence of positive effect of the CETP inhibitors or apoA1 mimetics on the progression of atherosclerosis so far. Brand new approaches in the treatment of dyslipidemia including MTP and PCSK9 inhibition or therapies utilizing antisense technologies rapidly accumulate evidence from clinical studies. We have already learned about their lipid-modifying efficacy, however, first data documenting their impact atherosclerosis progression and cardiovascular risk suggest a promising future for these new drugs. Moreover, research laboratories continue working on novel options for lipoprotein metabolism modification (e. g. LCAT or FDF21 replacement therapies). Not all the novel concepts will make it to clinical use but our therapeutic options in the management of dyslipidemia will definitely expand.

• MeSH
• antisense RNA farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• dyslipidemie * dietoterapie   farmakoterapie   MeSH
• ezetimib farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• hypolipidemika * farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• klinická studie jako téma MeSH
• LDL-cholesterol účinky léků   MeSH
• lidé MeSH
• monoklonální protilátky farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• proproteinkonvertasy farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• statiny farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• transportní proteiny pro estery cholesterolu antagonisté a inhibitory   farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Myastenia gravis je nejčastějším onemocněním nervosvalové ploténky. Projevuje se nebolestivou slabostí postižených svalových skupin, nastupující typicky po jejich námaze. Jde o autoimunitní onemocnění, v jehož důsledku vznikají protilátky, které snižují počet funkčních acetylcholinových receptorů na postsynaptické membráně. Podle přítomnosti anti-ACHR protilátek se rozlišuje forma séropozitivní (80-88 % případů) a séronegativní, podle klinické manifestace forma okulární (ptóza, diplopie), okulobulbární (postižení očí a projevy v ORL oblasti – dysfonie, dysfagie, dysartrie, výjimečně i dyspnoe) a generalizovaná, zasahující navíc i končetiny. Postižení hltanu nebo hrtanu může přivést pacienta do ordinace otolaryngologa, jemuž pro svou nízkou prevalenci a nespecifický, často měnlivý lokální nález může činit diferenciálně diagnostické potíže. V našem sdělení se proto zabýváme klinickou problematikou myastenie gravis s důrazem na ORL projevy. Klíčová slova: myastenia gravis - diagnostika, léčba, dysfagie, dysartrie, dysfonie, inspirační stridor

Myasthenia gravis is the most common disorder of the neuromuscular junction, which manifests with painless, fluctuating muscular weakness and fatigability of affected skeletal muscle groups. Seropositive and seronegative forms are distinguished according to presence of anti-ACHR antibodies. Ocular (double vision, drooping eyelid), oculobulbar (involvement of the eyes and ENT area – hoarseness, dysphagia, dysarthria and rarely shortness of breath) and generalized form, where limbs are also affected, are recognized according to clinical findings. Involvement of the oropharynx or larynx may bring the patient to ENT specialist. The condition is possibly often misdiagnosed because of its low prevalence. Patients with suspected myasthenia gravis should be referred to a neurologist, who should examine, diagnose and treat the condition, cooperating with other specialists including an ENT doctor. Here we describe two myasthenia gravis patients with ENT symptoms who presented with stridor and changing mobility of vocal cords. Keywords: myasthenia gravis - diagnostics, treatment, dysphagia, dysarthria, dysphonia, inspiratory stridor

• MeSH
• cholinesterasové inhibitory MeSH
• chybná diagnóza MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• elektromyografie MeSH
• glottis patofyziologie   MeSH
• klinický obraz nemoci MeSH
• lidé MeSH
• myasthenia gravis * komplikace   patofyziologie   terapie   MeSH
• neurologie MeSH
• obličejové svaly inervace   MeSH
• oftalmologie MeSH
• otorinolaryngologie * MeSH
• příznaky a symptomy * MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• výsledek terapie MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Fibroblast activation protein (FAP) is a non-classical serine protease expressed predominantly in conditions accompanied by tissue remodeling, particularly cancer. Due to its plasma membrane localization, FAP represents a promising molecular target for tumor imaging and treatment. The unique enzymatic activity of FAP facilitates development of diagnostic and therapeutic tools based on molecular recognition of FAP by substrates and small-molecule inhibitors, in addition to conventional antibody-based strategies. In this review, we provide background on the pathophysiological role of FAP and discuss its potential for diagnostic and therapeutic applications. Furthermore, we present a detailed analysis of the structural patterns crucial for substrate and inhibitor recognition by the FAP active site and determinants of selectivity over the related proteases dipeptidyl peptidase IV and prolyl endopeptidase. We also review published data on targeting of the tumor microenvironment with FAP antibodies, FAP-targeted prodrugs, activity-based probes and small-molecule inhibitors. We describe use of a recently developed, selective FAP inhibitor with low-nanomolar potency in inhibitor-based targeting strategies including synthetic antibody mimetics based on hydrophilic polymers and inhibitor conjugates for PET imaging. In conclusion, recent advances in understanding of the molecular structure and function of FAP have significantly contributed to the development of several tools with potential for translation into clinical practice.

• MeSH
• dipeptidylpeptidasa 4 metabolismus   MeSH
• fibroblasty metabolismus   MeSH
• katalytická doména MeSH
• lidé MeSH
• membránové proteiny chemie   účinky léků   metabolismus   MeSH
• molekulární struktura MeSH
• nádorové mikroprostředí MeSH
• nádory diagnóza   metabolismus   terapie   MeSH
• prekurzory léčiv MeSH
• serinové endopeptidasy chemie   účinky léků   metabolismus   MeSH
• substrátová specifita MeSH
• želatinasy chemie   účinky léků   metabolismus   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

CD69 is an earliest lymphocyte activation antigen and a universal leukocyte triggering molecule expressed at sites of active immune response. The binding of GlcNAc to the dimeric human CD69 was followed by equilibrium dialysis, fluorescence titration, and NMR. Clear cooperation was observed in the high-affinity binding (K(d) = 4.0 x 10(-7) M) of the carbohydrate to two subunits of the dimeric CD69 (Hill coefficient 1.94). A control monosaccharide ManNAc was not bound by human CD69, and both monosaccharides had no effects on the structure of the receptor. However, a monomeric CD69 obtained by mutating Q93 and R134 at the dimer interface exhibited a much lower affinity for GlcNAc (K(d) = 1.3 x 10(-5) M) and no cooperativity (Hill coefficient 1.07). Perturbation of the dimer interface resulted in a severe impairment of the signaling ability of cellular CD69 when cross-linked with an antibody or with a bivalent high-affinity N-acetylhexosamine dimer-based ligand. The availability of stable preparations of soluble CD69 receptor with well-documented ligand binding properties will be beneficial for immunological experiments evaluating the role of this antigen in the complex environment of the immune system. Moreover, such preparations in combination with efficient ligand mimetics able to both activate CD69(+) lymphocytes and to block undesired hyperactivation caused by other cellular ligands will also become indispensable tools in explaining the exact role of the CD69 antigen in the interaction between the tumor cell and the effector natural killer lymphocyte.

• MeSH
• CD antigeny chemie   metabolismus   MeSH
• diferenciační antigeny T-lymfocytů chemie   metabolismus   MeSH
• dimerizace MeSH
• hexosaminy chemie   MeSH
• Jurkat buňky MeSH
• lektiny typu C chemie   metabolismus   MeSH
• lidé MeSH
• ligandy MeSH
• molekulární modely MeSH
• podjednotky proteinů chemie   metabolismus   MeSH
• vazebná místa MeSH
• vztahy mezi strukturou a aktivitou MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• publikace stažené z tisku MeSH