Clonal complex
Dotaz
Zobrazit nápovědu
Cancer development is a dynamic process during which the successive accumulation of mutations results in cells with increasingly malignant characteristics. Here, we show the clonal evolution pattern in myelodysplastic syndrome (MDS) patients receiving supportive care, with or without lenalidomide (follow-up 2.5-11 years). Whole-exome and targeted deep sequencing at multiple time points during the disease course reveals that both linear and branched evolutionary patterns occur with and without disease-modifying treatment. The application of disease-modifying therapy may create an evolutionary bottleneck after which more complex MDS, but also unrelated clones of haematopoietic cells, may emerge. In addition, subclones that acquired an additional mutation associated with treatment resistance (TP53) or disease progression (NRAS, KRAS) may be detected months before clinical changes become apparent. Monitoring the genetic landscape during the disease may help to guide treatment decisions.
- MeSH
- buňky kostní dřeně účinky léků metabolismus patologie MeSH
- chemorezistence genetika MeSH
- GTP-fosfohydrolasy genetika metabolismus MeSH
- inhibitory angiogeneze terapeutické užití MeSH
- klonální evoluce účinky léků MeSH
- lenalidomid MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- management nemoci MeSH
- membránové proteiny genetika metabolismus MeSH
- monitorování fyziologických funkcí MeSH
- mutace MeSH
- myelodysplastické syndromy farmakoterapie genetika metabolismus patologie MeSH
- nádorové biomarkery genetika metabolismus MeSH
- nádorový supresorový protein p53 genetika metabolismus MeSH
- následné studie MeSH
- progrese nemoci MeSH
- protoonkogenní proteiny p21(ras) genetika metabolismus MeSH
- regulace genové exprese u nádorů * MeSH
- sekvenování exomu MeSH
- senioři MeSH
- thalidomid analogy a deriváty terapeutické užití MeSH
- Check Tag
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
To trace evolution of Panton-Valentine leucocidin-positive clonal complex 398 methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in the Czech Republic, we tested 103 MRSA isolates from humans. Five (4.9%) were Panton-Valentine leucocidin-positive clonal complex 398, sequence types 1232 and 9181. Spread to the Czech Republic may result from travel to or from other countries.
- MeSH
- bakteriální toxiny * biosyntéza genetika MeSH
- dějiny 21. století MeSH
- dospělí MeSH
- exotoxiny * genetika biosyntéza MeSH
- leukocidiny * genetika MeSH
- lidé MeSH
- methicilin rezistentní Staphylococcus aureus * genetika izolace a purifikace MeSH
- stafylokokové infekce * mikrobiologie epidemiologie MeSH
- Check Tag
- dějiny 21. století MeSH
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- historické články MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
Cíl práce: Zjištění klonálních charakteristik souboru kmenů Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae) působících invazivní pneu-mokokové onemocnění (IPO) v České republice (ČR) v roce 2017. Porovnání klonálního členění kmenů probíhalo v Národní referenční laboratoři pro streptokokové nákazy (NRL) použitím rutinně využívané metody multilokusové sekvenační typizace (Multilocus Sequence Typing, MLST) a nově zavedené metody multilokusové analýzy tandemových repetic (Multiple-Locus Variable number tandem repeat Analysis, MLVA). Materiál a metodika: Studován byl soubor 87 kmenů S. pneumoniae, vybraný z izolátů doručených v rámci programu surveillance IPO v roce 2017 do NRL z celé ČR. Výběr byl veden přes sérotypy S. pneumoniae tak, aby soubor zahrnoval izoláty sérotypů zastoupených v pneumokokové konjugované 13valentní vakcíně (sérotypy 1, 4, 9V) a izoláty sérotypů nevakcinačních, vyskytujících se však v ČR ve značném zastoupení (sérotypy 8, 9N, 22F). Pro studium byla použita metoda MLST, která je světově rozšířeným standardem klonální charakterizace pneumokokových izolátů a využívá sekvenování souboru genových oblastí a metoda MLVA, která charakterizuje izoláty podle počtu tandemově repetitivních úseků v intergenových oblastech. Výsledky: MLST analýza ukázala a potvrdila vysokou míru klonální homogenity izolátů S. pneumoniae sérotypů 1, 9N, 9V, 22F a značnou genetickou proměnlivost izolátů sérotypů 4 a 8. Mezi klonálním členěním, poskytnutým oběma metodami, byla rámcová korelace. V porovnání s metodou MLST poskytovala metoda MLVA detailnější klonální odlišení. U izolátů s nově zjištěnými MLVA profily je žádoucí přiřazení nového MLVA typu (MT). Tato webová podpora MLVA schématu S. pneumonie však ustupuje do pozadí a neposkytuje aktuálně všechny služby oproti webové podpoře pro MLST charakterizaci. Závěry: Metoda MLST je a nadále zůstává u izolátů S. pneumoniae standardem při klonální charakterizaci původců IPO při provádění surveillance na úrovni místní i mezinárodní. MLST charakteristiky izolátů jsou využity při sledování klonální proměnlivosti národními i nadnárodními orgány ochrany veřejného zdraví. Metoda MLVA rutinně používána není, lze ji však použít jako doplňkovou pro zrychlené zjištění klonální příbuznosti izolátů ze situací lokálního charakteru, například ohniskových výskytů infekce. Zde může snáze zachytit vznik a šíření virulentní klonální varianty.
Aim: To determine clonal characteristics of Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae) strains causing invasive pneumococcal disease (IPD) in the Czech Republic (CR) in 2017. Clonal assignment of strains was performed in the National Reference Laboratory for Streptococcal Infections (NRL) by the routinely used method, multilocus sequence typing (MLST), and a newly introduced method, multiple-locus variable number tandem repeat analysis (MLVA). Material and method: The study strains were 87 isolates of S. pneumoniae selected from those referred to the NRL within the IPD surveillance programme from all over the CR in 2017. The study set covers S. pneumoniae isolates of both pneumococcal 13-valent conjugate vaccine serotypes (1, 4, and 9V) and non-vaccine serotypes (8, 9N, and 22F) widely spread in the CR. The study methods were MLST, the standard method used worldwide for the characterisation of pneumococcal isolates based on sequencing of a set of gene regions, and MLVA, which allows to characterise isolates based on the number of tandem repeats in intergenic regions. Results: MLST revealed and confirmed a high level of clonal homogeneity of S. pneumoniae isolates of serotypes 1, 9N, 9V, and 22F and a considerable genetic variability of serotype 4 and 8 isolates. There was a general correlation between the MLST and MLVA clonal complex assignments. In comparison with MLST, MLVA has superior clonal discriminatory power. Isolates with the newly determined MLVA profiles should be assigned to new MLVA types (MT). Nevertheless, the new web support of the MLVA scheme for S. pneumoniae is less relevant as it does not provide services comparable to those available from the web support for MLST characterisation. Conclusions: MLST continues to be the standard method for clonal characterisation of S. pneumoniae isolates from IPD for the purposes of both national and international surveillance. MLST characteristics of isolates are helpful in the study of clonal variability conducted by both national and transnational public health protection authorities. MLVA is not routinely used but can serve as a complementary method for rapid identification of clonal relatedness between isolates, e.g. those from local outbreaks. It is more suitable for the detection of emergence and spread of a virulent clonal variant.
The opportunistic pathogen Candida parapsilosis is a major causative agent of candidiasis leading to death in immunocompromised individuals. Azoles are the first line of defense in their treatment. The purpose of this study was to characterize eight fluconazole-resistant and sensitive C. parapsilosis hospital isolates through a battery of phenotypic tests that target pathogenicity attributes such as virulence, biofilm formation, stress resistance, and ergosterol content. Whole genome sequencing was carried out to identify mutations in key pathogenicity and resistance genes. Phylogenetic comparison was performed to determine strain relatedness and clonality. Genomic data and phylogenetic analysis revealed that two isolates were C. orthopsilosis and C. metapsilosis misidentified as C. parapsilosis. Whole genome sequencing analysis revealed known and novel mutations in key drug resistance and pathogenicity genes such as ALS6, ALS7, SAPP3, SAP7, SAP9, CDR1, ERG6, ERG11 and UPC2. Phylogenetic analysis revealed a high degree of relatedness and clonality within our C. parapsilosis isolates. Our results showed that resistant isolates exhibited an increase in biofilm content compared to the sensitive isolates. In conclusion, our study is the first of its kind in Lebanon to describe phenotypic and genotypic characteristics of nosocomial C. parapsilosis complex isolates having a remarkable ability to form biofilms.
- MeSH
- antifungální látky * farmakologie MeSH
- biofilmy * růst a vývoj MeSH
- Candida parapsilosis * genetika izolace a purifikace klasifikace MeSH
- fenotyp * MeSH
- flukonazol farmakologie MeSH
- fungální léková rezistence * genetika MeSH
- fylogeneze * MeSH
- genotyp * MeSH
- infekce spojené se zdravotní péčí mikrobiologie MeSH
- kandidóza * mikrobiologie MeSH
- lidé MeSH
- mikrobiální testy citlivosti * MeSH
- nemocnice MeSH
- sekvenování celého genomu * MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Geografické názvy
- Libanon MeSH
Cíl práce: Cílem tohoto sdělení je prezentace výsledků klonální analýzy meningokoků izolovaných z invazivního meningokokového onemocnění a od zdravých nosičů z České republiky za více než 40leté období. Materiál a metody: Celkem bylo studováno 2 179 izolátů Neisseria meningitidis z období 1971–2014 (květen), z toho 1 093 izolátů od pacientů s invazivním meningokokovým onemocněním a 1 086 izolátů od zdravých nosičů. Veškeré izoláty byly podrobeny multilokusové sekvenční typizaci (MLST), jedné z hlavních metod molekulární epidemiologie invazivního meningokokového onemocnění. Výsledky: U izolátů N. meningitidis z invazivního meningokokového onemocnění byla zjištěna výrazná převaha výskytu séroskupin B a C (souhrnně přes 94 %). Nejčastěji se vyskytující kmeny séroskupiny B byly geneticky vysoce heterogenní: u 1 093 izolátů bylo zjištěno 25 klonálních komplexů. Stejně tak kmeny druhé nejčastěji se vyskytující séroskupiny C se jevily jako geneticky heterogenní, vykazovaly příslušnost k 19 klonálním komplexům. U třetí nejčastěji se vyskytující séroskupiny Y byl stav opačný. Tato skupina izolátů z invazivních meningokokových onemocnění byla na základě detekce pouze tří klonálních komplexů hodnocena jako vysoce homogenní. Z více než 75 % byly převažující klonální komplexy u invazivních izolátů séroskupiny Y (cc23) i séroskupiny C (cc11) řazeny mezi hypervirulentní uskupení, a vykazovaly tak nejvyšší míru virulence pro hostitelskou populaci. U invazivních izolátů séroskupiny B byly hypervirulentní klonální komplexy zjištěny více než z 80 % (cc32, cc41/44, cc18, cc269 a cc11). U 1086 izolátů N. menin-gitidis od zdravých nosičů převažovaly kmeny, u nichž nelze séroskupinu určit, kmeny značené jako N. meningitidis NG (41,4 %). Zařazení těchto izolátů do klonálních komplexů bylo vysoce heterogenní. Celkem bylo zjištěno 28 klonálních komplexů, jejichž příslušnost k hypervirulentním klonálním komplexům byla minoritní. Závěry: Analýza sekvenčních dat MLST za více než 40leté období prokázala, že populace kmenů N. meningitidis způsobujících invazivní meningokokové onemocnění se jeví jako geneticky odlišná od kmenů N. meningitidis zjišťovaných u zdravých nosičů. Tyto výsledky jsou důležité pro optimální aplikaci preventivních opatření v ohnisku invazivního meningokokového onemocnění i pro vývoj účinné meningokokové vakcíny a doporučení vhodné vakcinační strategie. Klíčová slova: Neisseria meningitidis – multilokusová sekvenční typizace – klonální analýza
Objective: To present the results of clonal analysis of the meningococcal populations isolated from invasive disease and healthy carriers in the Czech Republic over four decades. Material and methods: A total of 2179 isolates of Neisseria meningitidis from 1971–2014 (May) were studied: 1093 isolates from patients with invasive meningococcal disease (IMD) and 1086 isolates from healthy carriers. All study isolates were analysed by multilocus sequence typing (MLST), one of the major methods used in molecular epidemiology of IMD. Results: More than 94 % of N. meningitidis isolates from IMD were assigned to serogroups B or C. The strains of the leading serogroup B were genetically highly heterogeneous: 1093 isolates were assigned to 25 clonal complexes. Similarly, the strains of the second leading serogroup C appeared genetically heterogeneous and were classified into 19 clonal complexes. The third leading serogroup Y of IMD isolates showed an opposite tendency and appeared highly homogeneous, with only three clonal complexes being detected. Over 75% of the predominant clonal complexes of IMD isolates of both serogroup Y (cc23) and serogroup C (cc11) were classified as hypervirulent and, as such, posed the highest risk to the host population. Over 80% of IMD isolates of serogroup B were assigned to hypervirulent clonal complexes (cc32, cc41/44, cc18, cc269, and cc11). Of 1086 N. meningitidis isolates from healthy carriers, 41.4% were non-serogroupable, i.e. designated N. meningitidis NG. Classification of these isolates into clonal complexes was highly heterogeneous. In total, 28 clonal complexes were identified of which only a minority were hypervirulent. Conclusions: The analysis of MLST data on strains collected over four decades revealed that the population of N. meningitidis strains involved in IMD differ genetically from N. meningitidis strains isolated from healthy carriers. These results are relevant to both the optimal use of preventive measures in a focus of IMD and to the development of an effective meningococcal vaccine and vaccination strategy guidelines. Keywords: Neisseria meningitides – multilocus sequence typing – clonal analyse
- Klíčová slova
- klonální analýza, klonální komplex,
- MeSH
- frekvence genu MeSH
- genetická variace MeSH
- lidé MeSH
- meningokokové infekce * genetika MeSH
- multilokusová sekvenční typizace * statistika a číselné údaje MeSH
- Neisseria meningitidis séroskupiny B genetika MeSH
- Neisseria meningitidis séroskupiny C genetika MeSH
- Neisseria meningitidis séroskupiny Y genetika MeSH
- Neisseria meningitidis * genetika MeSH
- přenašečství * mikrobiologie MeSH
- techniky typizace bakterií MeSH
- virulence genetika MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- srovnávací studie MeSH
BACKGROUND: This study presents antigenic and genetic characteristics of Neisseria meningitidis strains recovered from invasive meningococcal disease (IMD) in the Czech Republic in 1971-2015. MATERIAL AND METHODS: A total of 1970 isolates from IMD, referred to the National Reference Laboratory for Meningococcal Infections in 1971-2015, were studied. All isolates were identified and characterized by conventional biochemical and serological tests. Most isolates (82.5%) were characterized by multilocus sequence typing method. RESULTS: In the study period 1971-2015, the leading serogroup was B (52.4%), most often assigned to clonal complexes cc32, cc41/44, cc18, and cc269. A significant percentage of strains were of serogroup C (41.4%), with high clonal homogeneity due to hyperinvasive complex cc11, which played an important role in IMD in the Czech Republic in the mid-1990s. Serogroup Y isolates, mostly assigned to cc23, and isolates of clonally homogeneous serogroup W have also been recovered more often over the last years. CONCLUSION: The incidence of IMD and distribution of serogroups and clonal complexes of N. meningitidis in the Czech Republic varied over time, as can be seen from the long-term monitoring, including molecular surveillance data. Data from the conventional and molecular IMD surveillance are helpful in refining the antimeningococcal vaccination strategy in the Czech Republic.
- MeSH
- incidence MeSH
- lidé MeSH
- meningokokové infekce diagnóza epidemiologie mikrobiologie MeSH
- multilokusová sekvenční typizace MeSH
- Neisseria meningitidis genetika izolace a purifikace MeSH
- séroskupina MeSH
- techniky typizace bakterií MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika epidemiologie MeSH
Chronic lymphocytic leukemia (CLL) patients may acquire new chromosome abnormalities during the course of their disease. Clonal evolution (CE) has been detected by conventional chromosome banding (CBA), several groups also confirmed CE with fluorescence in situ hybridization (FISH). At present, there are minimal prospective data on CE frequency determined using a combination of both methods. Therefore, the aim of our study was to prospectively assess CE frequency using a combination of FISH and CBA after stimulation with CpG oligonucleotides and interleukin-2. Between 2008 and 2012, we enrolled 140 patients with previously untreated CLL in a prospective trial evaluating CE using FISH and CBA after stimulation. Patients provided baseline and regular follow-up peripheral blood samples for testing. There was a median of 3 cytogenetic examinations (using both methods) per patient. CE was detected in 15.7% (22/140) of patients using FISH, in 28.6% (40/140) using CBA, and in 34.3% (48/140) of patients by combining both methods. Poor-prognosis CE (new deletion 17p, new deletion 11q or new complex karyotype) was detected in 15% (21/140) of patients and was significantly associated with previous CLL treatment (p=0.013). CBA provides more complex information about cytogenetic abnormalities in CLL patients than FISH and confirms that many patients can acquire new abnormalities during the course of their disease in a relatively short time period.
- MeSH
- aktivace lymfocytů účinky léků MeSH
- chronická lymfatická leukemie genetika patologie MeSH
- dospělí MeSH
- hybridizace in situ fluorescenční * MeSH
- interleukin-2 farmakologie MeSH
- klonální evoluce * MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- oligodeoxyribonukleotidy farmakologie MeSH
- prospektivní studie MeSH
- pruhování chromozomů * MeSH
- senioři MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- hodnotící studie MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- srovnávací studie MeSH
Staphylococcus aureus is a leading cause of bloodstream infections (BSI) and diseases that may be caused by hematogenous spread. The staphylococcal adhesin, for which the association with the infections emerging as a complication of septicemia has been well documented, is a bone sialoprotein-binding protein (Bbp). The aim of the study was to assess the prevalence of a bbp gene in S. aureus bloodstream isolates associated with BSI and to investigate to what degree the distribution of this gene is linked to the clonality of the population. Spa typing, used in order to explore the genetic population structure of the isolates, yielded 29 types. Six spa clusters and seven singletons were identified. The most frequent was spa clonal complex CC021 associated with MLST CC30 (38%). The bbp gene was found in 47% of isolates. Almost all isolates (95%) clustered in spa clonal complex CC021 were positive for this gene. All isolates carrying the bbp gene were sensitive to methicillin, and if clustered in the spa CC021, belonged to agr group III. Our study shows that Bbp is not strictly associated with BSI. However, one may conclude that for clonally related S. aureus strains most commonly causing BSI, the risk of Bbp-mediated complications of septicemia is expected to be higher than for other strains.
- MeSH
- antibakteriální látky farmakologie MeSH
- bakteriální proteiny genetika MeSH
- krev mikrobiologie MeSH
- lidé MeSH
- mikrobiální testy citlivosti MeSH
- multilokusová sekvenční typizace MeSH
- stafylokokové infekce krev mikrobiologie MeSH
- Staphylococcus aureus účinky léků genetika izolace a purifikace metabolismus MeSH
- transportní proteiny genetika MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Besides several exceptions, asexual metazoans are usually viewed as ephemeral sinks for genomes, which become 'frozen' in clonal lineages after their emergence from ancestral sexual species. Here, we investigated whether and at what rate the asexuals are able to introgress their genomes back into the parental sexual population, thus more or less importantly affecting the gene pools of sexual species. We focused on hybridogenetic hybrids of western Palaearctic water frogs (Pelophylax esculentus), which originate through hybridization between P. ridibundus and P. lessonae, but transmit only clonal ridibundus genome into their gametes. Although usually mating with P. lessonae, P. esculentus may upon mating with P. ridibundus or another hybrid produce sexually reproducing P. ridibundus offspring with the introgressed ex-clonal genome. We compared the rate of nuclear amplified fragment length polymorphism (AFLP) and mitochondrial introgression in two types of populations, that is, those where P. ridibundus occurs in isolation and those where it lives with the hybridogens. Although significant differentiation (Φpt) between sexual and clonal ridibundus genomes suggested limited gene flow between sexuals and hybridogens, a non-negligible (~5%) proportion of P. ridibundus bore introgressed mtDNA and AFLP markers. Whereas transfer of mtDNA was exclusively unidirectional, introgression of nuclear markers was bidirectional. The proportion of introgressed P. ridibundus was highest in syntopic populations with P. esculentus, proving an ongoing and site-specific interspecific genetic transfer mediated by hybridogenetic hybrids. It turns out that asexual hybrids are not just a sink for genes of sexual species, but may significantly influence the genetic architecture of their sexual counterparts.
Cíl práce: Cílem práce bylo zhodnotit epidemiologickou situaci kmenů komplexu Burkholderia cepacia izolovaných na Ústavu mikrobiologie Lékařské fakulty Univerzity Palackého a Fakultní nemocnice Olomouc, zjistit nejčastější zástupce a prokázat, nebo vyvrátit možnost klonálního šíření těchto kmenů. Metodika: V průběhu osmi měsíců byly sbírány veškeré kmeny určené jako Burkholderia cepacia komplex. Byla stanovena citlivost na vybrané antimikrobiální přípravky a pomocí vhodných molekulárně genetických metod se zjišťovala jejich genetická příbuznost. Výsledky: Celkem bylo testováno 52 izolátů, nejčastěji (88,5 %) se jednalo o genomovar II (Burkholderia multivorans). Více než 46 % z nich bylo geneticky příbuzných a 58,3 % bylo zachyceno na jednotkách intenzivní péče. Všechny izoláty vykazovaly značnou rezistenci k antimikrobiálním přípravkům a úmrtí spojené s infekcí Burkholderia multivorans bylo popsáno ve čtyřech případech. Závěr: Lze předpokládat šíření geneticky příbuzných kmenů Burkholderia multivorans z nemocničního prostředí. Zdroj infekce zatím nebyl zjištěn a je třeba dalšího šetření.
Background: The aim was to assess the epidemiology of Burkholderia cepacia complex strains isolated at the Department of Microbiology, Faculty of Medicine and Dentistry, Palacký University and University Hospital Olomouc, determine the most frequent strains and confirm or rule out potential clonal spread of the strains. Material and methods: Over a period of eight months, all strains classified as Burkholderia cepacia complex were collected. Susceptibility to selected antimicrobial agents was determined and adequate molecular genetic methods were used to assess their genetic relationship. Results: A total of 52 isolates were tested, with the most frequent (88.5 %) being genomovar II (Burkholderia multivorans). More than 46 % of them were genetically related; 58.3 % of them were detected in intensive care units. All isolates were highly resistant to antimicrobial agents. In four cases, deaths associated with Burkholderia multivorans infection were reported. Conclusion: It may be assumed that genetically related strains of Burkholderia multivorans spread from the hospital setting. As yet, the source of infection has not been determined and further investigations are needed.
- Klíčová slova
- Burkholderia multivorans, klonalita, rezistence,
- MeSH
- bakteriální léková rezistence genetika MeSH
- Burkholderia cepacia komplex genetika izolace a purifikace patogenita MeSH
- financování organizované MeSH
- genom bakteriální genetika MeSH
- hospitalizovaní pacienti MeSH
- infekce bakteriemi rodu Burkholderia epidemiologie mikrobiologie MeSH
- infekce spojené se zdravotní péčí mikrobiologie MeSH
- jednotky intenzivní péče MeSH
- kohortové studie MeSH
- lidé MeSH
- mikrobiální testy citlivosti statistika a číselné údaje MeSH
- molekulární epidemiologie metody MeSH
- polymerázová řetězová reakce statistika a číselné údaje MeSH
- technika náhodné amplifikace polymorfní DNA statistika a číselné údaje MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
