Článek se zabývá popisem a kritickým hodnocením vývoje přístrojové techniky pro semiinvazivní a neinvazivní stanovení glukózy v letech 1996 až 2001. Jsou uvedeny techniky odběru vzorku a vysvětleny principy optických a elektrochemických měřících metod používaných v prototypech přístrojů. Zatím nelze doporučit neinvazivní nebo minimálně invazivní metody analýzy glukózy jako náhradu monitorování krevní glukózy pacientem či biochemickou laboratoří.

The paper deals with description and critical evaluation of the instrumentation trends towards semiinvasive and non-invasive glucose determination from 1996 to 2001. The sample collection modes are mentioned and the principles of optical and electrochemical measuring methods used in prototypes of instruments are explained. The use of non-invasive or minimal invasive glucose analysis methods instead of blood glucose monitoring by the patient or the biochemical lab cannot be recommended yet.

• MeSH
• krevní glukóza analýza   krev   MeSH
• lidé MeSH
• miniinvazivní chirurgické výkony metody   MeSH
• odběr vzorku krve metody   MeSH
• Ramanova spektroskopie metody   MeSH
• technologie lékařská metody   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

The discovery of presence of fetal non cell DNA in mother's blood and possibility of their measurement in 1997 (Lo ,USA) opened perspectives of safe prenatal screening of aneuploidies. Invasive diagnostics procedures like chorionic villus sampling and amniocentesis which have been widely implemented since 70's and 80's present risk of pregnancy loss in amount 1:100 or 1: 50. This approach of invasive and risky prenatal screening in time of demographic disaster in Europe is no longer unsustainable. NIPT on the contrary represents method which is completely safe and achieves the same accuracy regarding screening of trisomy 21 (Down syndrome). Results Our centre has performed about 100 NIPT's (MaterniT21, Harmony, Panorama Prenascan) since 2012. NIPT is offered only to those pregnant women who have low or intermediate risk of aneuploidies after first trimester screening. High percentage of pregnant after assisted reproduction procedures are among those tested by NIPT. The NIPT is a good choice for pregnant women after IVF who are already in advanced age in comparison to normal population. Invasive procedures like CVS or amniocentesis are recommended in case of high risk of aneuploidies ( calculation risk 1:10 resp. 1:50) or ultrasound abnormal findings. We have experience that running NIPT technology is very easy, and has been accepted our patients. Conclusions Our experience with NIPT is very positive. Main advantage of this new technology is safety and we are sure that NIPT is ideal for using in gynaecological practise. The first trimester ultrasound skills and NIPT technology allows gynaecologist to detect majority of aneupliodies and congenital anomalies of fetus.

• MeSH
• amniocentéza škodlivé účinky   MeSH
• aneuploidie MeSH
• druhý trimestr těhotenství krev   MeSH
• genetické nemoci vrozené krev   ultrasonografie   MeSH
• genetické poradenství metody   normy   MeSH
• genetické testování * metody   MeSH
• lidé MeSH
• prenatální diagnóza * metody   MeSH
• první trimestr těhotenství * krev   MeSH
• těhotenství MeSH
• ultrasonografie prenatální metody   přístrojové vybavení   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• těhotenství MeSH
• ženské pohlaví MeSH

V této prospektivní studii shrnujeme naše první zkušenosti s neinvazivní prenatální RHc genotypizací plodu s využitím PCR v reálném čase, specifických primerů a TaqMan sondy navržených pro c alelu RHCE genu. Celkem bylo testováno 13 nealoimunizovaných a 1 anti-c aloimunizovaných těhotných žen v rozmezí 12. až 33. týdne gravidity. Výsledky neinvazivní prenatální RHc genotypizace plodu provedené na DNA extrahované z periferní krve matek jsme korelovali s výsledky imunohematologické analýzy pupečníkové krve. Výsledky RHc genotypizace plodu byly ve shodě s vyšetřením pupečníku u všech vyšetřených těhotných žen. Neinvazivní prenatální RHc genotypizace plodu umožňuje identifikaci plodů v riziku hemolytického onemocnění. Detekce Rhc negativních plodů u anti-c aloimunizovaných těhotenství může vyloučit potřebu invazivního prenatálního vyšetření.

In this prospective study, we described our first experience with non-invasive foetal RHc genotyping by analysis of DNA extracted from maternal plasma samples by using real-time PCR, specific primers and TaqMan probe targeted toward c allele of RHCE gene. We analysed 13 non-alloimmunised and 1 anti-c alloimmunised pregnant woman within 12th and 33rd week of pregnancy and correlated the results with serological analysis of cord blood. Non-invasive prenatal foetal RHc genotyping analysis of maternal plasma samples was in complete concordance with the analysis of cord blood in all pregnancies. Non-invasive foetal RHc genotyping enables the identification of foetuses at risk of haemolytic disease of the newborn. An identification of RHc negative foetuses in anti-c alloimmunized pregnancies may exclude the demand of invasive prenatal procedures.

• MeSH
• DNA analýza   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• krevní skupiny - systém Rh-Hr analýza   genetika   MeSH
• lidé MeSH
• novorozenec MeSH
• prenatální diagnóza metody   využití   MeSH
• těhotenské testy imunologické metody   využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• novorozenec MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Where microbes colonizing skin surface may help maintain organism homeostasis, those that invade living skin layers cause disease. In bats, white-nose syndrome is a fungal skin infection that affects animals during hibernation and may lead to mortality in severe cases. Here, we inferred the amount of fungus that had invaded skin tissue of diseased animals. We used simulations to estimate the unobserved disease severity in a non-lethal wing punch biopsy and to relate the simulated pathology to the measured fungal load in paired biopsies. We found that a single white-nose syndrome skin lesion packed with spores and hyphae of the causative agent, Pseudogymnoascus destructans, contains 48.93 pg of the pathogen DNA, which amounts to about 1560 P destructans genomes in one skin lesion. Relating the information to the known UV fluorescence in Nearctic and Palearctic bats shows that Nearctic bats carry about 1.7 µg of fungal DNA per cm2, whereas Palearctic bats have 0.04 µg cm-2 of P. destructans DNA. With the information on the fungal load that had invaded the host skin, the researchers can now calculate disease severity as a function of invasive fungal growth using non-destructive UV light transillumination of each bat's wing membranes. Our results will enable and promote thorough disease severity assessment in protected bat species without the need for extensive animal and laboratory labor sacrifices.

• MeSH
• Ascomycota * metabolismus   patogenita   MeSH
• Chiroptera mikrobiologie   MeSH
• dermatomykózy * mikrobiologie   prevence a kontrola   terapie   veterinární   MeSH
• hibernace * MeSH
• křídla zvířecí mikrobiologie   MeSH
• kůže mikrobiologie   MeSH
• ultrafialové záření * MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Cíl studie: Uskutečnit screeningové vyšetření genitální chlamydiózy adolescentů v městě Brně,jako první akci toho druhu v České republice. Získané výsledky uplatnit jako podklad pro dopo-ručení k provádění obdobných akcí na vyšší (celostátní) úrovni.Typ studie: Prospektivní epidemiologická studie, jejímž cílem je prevence genitální chlamydiózy.Název a sídlo pracovišť: Výzkumný ústav veterinárního lékařství Brno; Ústav klinické biochemie1. LF UK a VFN Praha; Zdravotní odbor Magistrátu města Brna; Bioplus s.r.o. Brno; KHS Brno;FN Brno.Metodika: Jako probandi byli zvoleni studující středních zdravotnických škol v Brně (337 dívek,15 chlapců) starších 18 roků. Ze sedimentu prvního proudu moči každého z probandů byla prove-dena detekce C. trachomatis za použití přímé imunofluorescenční reakce, ELISA reakce a ligázo-vé řetězové reakce.Výsledky: Z celkového počtu 352 probandů reagovalo 31 (8,8 %). U těchto 31 reagentů byla přímáimunofluorescence pozitivní 11krát (35,5 %), suspektní 3krát (9,6 %), ELISA reakce byla pozitivní9krát (23,0 %), suspektní 8krát (25,8 %) a ligázová reakce byla pozitivní 3krát (16,6 %). Celkováprevalence 8,8 % převyšuje celoevropský průměr (3,9 %).Závěr: Ve městě Brně byla provedena jako první v ČR screeningová akce za účelem zjištěníprevalence chlamydiové genitální infekce. Bylo vyšetřeno celkem 352 probandů (337 dívek, 15chlapců) kolem 18 roků. Chlamydia trachomatis byla prokazována v močovém sedimentu reakcíELISA, ligázovou řetězovou reakcí a přímou imunofluorescenční reakcí. Zjištěná prevalence je8,8 % (celoevropský průměr 3,9 %).

Objective: To run a screening for genital chlamydiosis in adolescents living in the town Brno asthe first action of this type in the Czech Republic and to use the results of the screening for theelaboration of recommendations for running similar actions on the national scale.Design: Prospective epidemiological study.Setting: Veterinary Research Institute, Brno; Institute of Clinical Biochemistry, 1 st Faculty ofMedicine, Charles University and General Faculty Hospital, Prague; Section of Public Health,Municipal Authorities of Brno; Bioplus Ltd., Brno; Regional Hygienic Services, Brno; FacultyHospital Brno; with technical assistance of teachers and students of two Medical Assistant Schoolsin Brno.Methods: Students (337 females and 15 males) of two Medical Assistant Schools, older than 18years, were used as probands within the study. Sediments of the first portions of urine col lectedfrom the individual probands were tested for the presence of Chlamydia trachomatis using thedirect fluorescent test, ELISA, and the ligase chain reaction.Results: Positive reactions in any of the three tests were found in 31 of the 352 probands (8.8%).Positive and doubtful reactions in the direct fluorescent antibody test were obtained in 11 (35.5%)and 3 (9.6%) of the 31 reactors, respectively. The corresponding values for ELISA were 9 (23.0%)and 8 (25.8%), respectively, and those for the ligase chain reaction 3 (16.6%) and 3 (16.6%), respecti-vely. The overall prevalence of 8.8% is higher than the European mean.Conclusions: The first limited screening for genital Chlamydia infections in the Czech Republicwas run in Brno. Urinary samples were collected from 337 females and 15 males aged approxima-tely 18 years. The presence of Chlamydia trachomatis in the urinary sediment was demonstratedby the direct fluorescent test, ELISA, and the ligase chain reaction. The established prevalence of8.8% exceeded the European mean (3.9%).

• MeSH
• Chlamydia trachomatis patogenita   MeSH
• chlamydiové infekce diagnóza   epidemiologie   prevence a kontrola   MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• plošný screening metody   MeSH
• pohlavní orgány patologie   MeSH
• prospektivní studie MeSH
• studenti zdravotnických povolání MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH
• srovnávací studie MeSH
• Geografické názvy
• Evropa MeSH

V této prospektivní studii shrnujeme naše první zkušenosti s neinvazivní prenatální RH genotypizací plodu u aloimunizovaných těhotenství s využitím PCR v reálném čase, specifických primerů a TaqMan sond navržených pro RHD a RHCE geny. Celkem bylo testováno 22 aloimunizovaných těhotných žen (15 anti-D, 5 anti-D+C, 2 anti-E) v rozmezí 11. až 33. týdne gravidity. Výsledky neinvazivní prenatální RHD a RHCE genotypizace plodu provedené na DNA extrahované z periferní krve matek jsme korelovali s výsledky imunohematologické analýzy pupečníkové krve. Výsledky RHD a RHCE genotypizace plodu byly ve shodě s vyšetřením pupečníku u všech vyšetřených aloimunizovaných těhotných žen. Neinvazivní prenatální RHD a RHCE genotypizace plodu umožňuje identifikaci plodů v riziku hemolytického onemocnění. Detekce negativních plodů v současné graviditě může vyloučit potřebu invazivního prenatálního vyšetření.

In this prospective study, we described our first experience with non-invasive foetal RH genotyping in alloimmunised pregnancies by analysis of DNA extracted from maternal plasma samples by using real-time PCR and primers and probes targeted toward RHD and RHCE genes. We analysed 22 alloimmunised pregnant women (15 anti-D, 5 anti-D+C, 2 anti-E) within 11th and 33rd week of pregnancy and correlated the results with serological analysis of cord blood. Non-invasive prenatal foetal RHD and RHCE genotyping analysis of maternal plasma samples was in complete concordance with the analysis of cord blood in all alloimmunised pregnancies. Non-invasive foetal RHD and RHCE genotyping enables the identification of foetuses at risk of haemolytic disease of the newborn. An identification of negative foetuses may exclude the demand of invasive prenatal procedures.

• MeSH
• antikoagulancia farmakologie   klasifikace   terapeutické užití   MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH
• směrnice pro lékařskou praxi MeSH

Vtéto prospektivní studii shrnujeme naše zkušenosti se zavedenímnové neinvazivnímetody prenatálníRHD, RHC a RHE genotypizace plodu z periferní krve RhD negativních těhotných žen s využitím PCRv reálném čase a specifických primerů a TaqMan sond navržených pro RHD a RHCE geny. Celkem bylotestováno 29 RhD negativních těhotných žen v rozmezí 14. a 40. týdne gravidity.Výsledky neinvazivníprenatální RHD, RHC a RHE genotypizace plodu provedené na DNA extrahované z periferní krvematek jsme korelovali s výsledky imunohematologické analýzy pupečníkové krve po porodu dítěte.Výsledky genotypizace plodu v oblasti exonu 7 a exonu 10 RHD genu byly ve shodě s vyšetřenímpupečníku u 29 z 29 RhD negativních těhotných žen, které porodily 13 RhD pozitivních a 16 RhDnegativních dětí. RHC genotypizace plodu v oblasti exonu 2 byla správně provedena u 25 z 25 Rhchomozygotních těhotných žen, z toho 8 žen porodilo RhC pozitivní a 17 RhC negativní děti. RHEgenotypizace plodu byla rovněž správně provedena u 29 z 29 Rhe homozygotních těhotných žen, z toho5 žen porodilo RhE pozitivní a 24 RhE negativní děti. RHC a RHE genotypizace plodu je velmi cennázejména v případě identifikace RhD negativního plodu vzhledem k amplifikaci další paternálně zděděnéalely, jež je průkazem přítomnosti fetálníDNAvmateřské cirkulaci.Doporučujeme proto provádětsimultánní RHD, RHC a RHE genotypizaci plodu u RhD negativních aloimunizovaných těhotenství veII. nebo III. trimestru gravidity za předpokladu, že matka nese příslušný Rh fenotyp (ccee, ccEe, Ccee).

In this prospective study,we assessed the feasibility of foetalRHD,RHCandRHEgenotyping by analysisof DNA extracted from maternal plasma samples collected from RhD negative pregnant women usingRQ-PCR and primers and probes targeted toward RHD and RHCE genes.We analysed 29 RhD negativepregnant women within 14th and 40th week of pregnancy and correlated the results with serologicalanalysis of cord blood after the delivery. Non-invasive prenatal foetal RHD exon 7 and exon 10genotyping analysis of maternal plasma samples was in complete concordance with the analysis of cordblood in 29 out of 29 RhD negative pregnant women delivering 13 RhD positive and 16 RhD negativenewborns. Non-invasive prenatal foetal RHC exon 2 genotyping was well performed in 25 out of 25 Rhchomozygote pregnant women delivering 8 RhC positive and 17 RhC negative newborns. Similarlynon-invasive prenatal foetal RHE genotyping was well done in 29 out of 29 Rhe homozygote pregnantwomen delivering 5 RhE positive and 24 RhE negative newborns. Foetal RHC and RHE genotyping inRhD negative pregnancies is very valuable, since in case of identification of RhD negative fetussimultaneous amplification of another paternally inherited allele (RhC or RhE positivity) proves thepresence of foetal DNA in maternal circulation. We recommend to perform simultaneous foetal RHD,RHC and RHE genotyping in alloimunised RhD negative pregnancies with certain phenotypes (ccee,ccEe, Ccee).

• MeSH
• dospělí MeSH
• fenotyp MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• genotyp MeSH
• hematologické komplikace těhotenství diagnóza   terapie   MeSH
• lidé MeSH
• nemoci plodu diagnóza   genetika   MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• prenatální diagnóza metody   MeSH
• Rho(D) imunoglobulin genetika   MeSH
• těhotenství MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• těhotenství MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH
• srovnávací studie MeSH

V této prospektivní studii shrnujeme naše zkušenosti se zavedením nové neinvazivní metody prenatálnídiagnostiky RHD genotypizace plodu z periferní krve těhotných žen s využitím PCR v reálném časea specifických primerů a TaqMan sond pro exon 7 a exon 10 RHD genu. Celkem jsme analyzovali 46vzorků od 39 RhD negativních těhotných žen (z toho 5 aloimunizovaných: 1x anti-D, 2x anti-D a anti-Ca 2x přítomnost nespecifických protilátek v enzymatickém testu). Výsledky neinvazivní prenatálníRHD genotypizace plodu provedené na DNA extrahované z periferní krve matek jsme korelovalis výsledky imunohematologické analýzy pupečníkové krve po porodu dítěte. Výsledky genotypizaceplodu v oblasti exonu 7 RHD genu byly ve shodě s vyšetřením pupečníku u všech těhotných žen, kterédoposud porodily (n = 20, z toho 12 RhD pozitivních a 8 RhD negativních dětí). V případě genotypizaceplodu v oblasti exonu 10 RHD genu jsme nedetekovali RhD pozitivitu plodu u 10 z 12 těhotenství.Předpokládáme, že tyto dva falešně negativní výsledky mohly být způsobeny částečnou delecí neboaberacemi RHD genu v 3´ netranslatované oblasti exonu 10, kde se specifické primery a TaqMan sondaváží k cílové DNA. Specificita metody pro oba RHD (exon 7 a exon 10) RQ-PCR systémy dosáhla 100 %,jelikož jsme v periferní krvi těhotných žen, které porodilyRhDnegativní děti (n = 8),nedetekovali žádnéRHD pozitivní amplifikační signály. Neinvazivní predikce RhD statutu plodu je rychlá a spolehliváa může být zahrnuta do rutinních vyšetření prenatální diagnostiky. Pro spolehlivou diagnostiku všakdoporučujeme, aby byla vždy prováděna amplifikace alespoň dvou různých oblastí RHD genu. NeinvazivníprenatálníRHD genotypizace plodu umožňuje identifikaci plodů v riziku hemolytického onemocnění.Doporučujeme, aby byl v průběhu těhotenství u každé RhD negativní ženy vyšetřen neinvazivněRHD genotyp plodu, nejlépe v I. nebo II. trimestru, a to i u nesenzibilizovaných těhotenství, kterých jevětšina.

In this prospective study, we assessed the feasibility of fetal RHD genotyping by analysis of DNAextracted from maternal plasma samples collected from RhD negative pregnant women using RQ-PCRand primers and probes targeted toward exon 7 and exon 10 of RHD gene.We analysed 46 samples from39 RhD negative pregnant women including 5 sensitised (1x anti-D, 2x anti-D and anti-C, 2x non-specificantibodies in enzymatic assay) and correlated the results with serological analysis of cord blood afterthe delivery. Non-invasive prenatal fetal RHD exon 7 genotyping analysis of maternal plasma sampleswas in complete concordance with the analysis of cord blood in all 20 RhD negative pregnant womendelivering 12RhDpositive and8RhDnegativenewbornsuntilnow.RHDexon 10 specificPCRampliconswere not detected in 2 out of 12 studied plasma samples from women bearing RhDpositive fetus, despitethe positive amplification in RHD exon 7 region observed in all cases. We supposed that false negativeresults might be caused by a partly deletion or aberrant structure of the 3´ untranslated exon 10 regionof RHD gene where specific primers and probe should anneal. The specificity of both RHD exon 7 andexon 10 systems approached 100% since no RHD positive signals were detected in women currentlypregnant with RhD negative fetus (n = 8). Prediction of fetal Rhesus D status from maternal plasma ishighly accurate and enables implementation into clinical routine. We suggest that safe non-invasiveprenatal fetal RHD genotyping using maternal plasma should involve the amplification of at least twoRHD specific products. Fetal RHD genotyping may allow the identification of fetuses at risk ofhaemolytic disease of newborn. However,we suggest to apply a non-invasive prenatal RHD genotyping assay in the routine testing of allRhDnegativewomen involving both sensitised as well as nonsensitizedpregnancies, which is the majority.

• MeSH
• DNA krev   MeSH
• dospělí MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• genotyp metody   MeSH
• lidé MeSH
• nemoci plodu diagnóza   genetika   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   MeSH
• prospektivní studie MeSH
• Rho(D) imunoglobulin genetika   krev   MeSH
• těhotenství MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• těhotenství MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH
• srovnávací studie MeSH

Reports on non-invasive blood sampling are limited, and there are only a few studies on using kissing bugs (Reduviidae) and medicinal leeches (Hirudo medicinalis) for hematology and biochemistry testing in various zoo animal species. The aim of this study was to evaluate the usefulness of non-invasive blood sampling with medicinal leeches for arbovirus epidemiological investigations in various animal species from one zoo collection. Medicinal leeches were manually applied on 35 animals of 11 species. Control blood samples were obtained by venipuncture of the jugular vein. Antibodies to tick-borne encephalitic virus (TBEV) were detected by using the immunoenzymatic method or an immunofluorescent assay (IFAT), depending on the animal species. One of the 35 animals (2.9%) was seropositive (Ovis aries), whereas the rest of the samples were seronegative in both methods of sampling (non-invasive by leeches vs. invasive by venipuncture). Blood sampling using medicinal leeches showed promising results. It is likely a good alternative to other more complex and invasive methods, and it can provide significant advancement in blood sampling for preventive medicine and epidemiological studies in zoo animals.

• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

In accordance with the 3 Rs principle (to replace, reduce and refine) animal models in biomedical research, we have developed and applied a new approach for sampling and analyzing hair follicles in various experimental settings. This involves use of a convenient device for non-invasive collection of hair follicles and processing methods that provide sufficient amounts of biological material to replace stressful and painful biopsies. Moreover, the main components of hair follicles are live cells of epithelial origin, which are highly relevant for most types of malignant tumors, so they provide opportunities for studying aging-related pathologies including cancer. Here, we report the successful use of the method to obtain mouse hair follicular cells for genotyping, quantitative PCR, and quantitative immunofluorescence. We present proof of concept data demonstrating its utility for routine genotyping and monitoring changes in quality and expression levels of selected proteins in mice after gamma irradiation and during natural or experimentally induced aging. We also performed pilot translation of animal experiments to human hair follicles irradiated ex vivo. Our results highlight the value of hair follicles as biological material for convenient in vivo sampling and processing in both translational research and routine applications, with a broad range of ethical and logistic advantages over currently used biopsy-based approaches.

• MeSH
• fluorescenční protilátková technika MeSH
• genotypizační techniky MeSH
• myši inbrední C57BL MeSH
• myši MeSH
• ocas patologie   MeSH
• poškození DNA * účinky záření   MeSH
• stárnutí patologie   fyziologie   MeSH
• vlasový folikul anatomie a histologie   metabolismus   fyziologie   účinky záření   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• mužské pohlaví MeSH
• myši MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH